| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-28页 |
| 1.1 手性药物的概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 手性药物的基本概念 | 第13页 |
| 1.1.2 手性药物的市场发展 | 第13-14页 |
| 1.1.3 手性药物的药理选择性 | 第14页 |
| 1.1.4 生产手性药物的方法 | 第14-16页 |
| 1.2 生物催化羰基不对称还原成手性醇 | 第16-22页 |
| 1.2.1 反应机理 | 第16-18页 |
| 1.2.2 不对称还原合成手性醇的微生物种类 | 第18-19页 |
| 1.2.3 影响生物转化和控制反应立体选择性的因素 | 第19-22页 |
| 1.3 度洛西汀 | 第22-26页 |
| 1.3.1 抑郁症的药物治疗 | 第22-23页 |
| 1.3.2 度洛西汀及其关键中间体 | 第23-25页 |
| 1.3.3 度洛西汀关键中间体的化学合成工艺 | 第25页 |
| 1.3.4 度洛西汀关键中间体的的生物催化 | 第25-26页 |
| 1.4 本论文主要研究内容 | 第26-28页 |
| 第二章 转化DKTP形成(S)-DHTP菌株的筛选 | 第28-40页 |
| 2.1 前言 | 第28页 |
| 2.2 材料与方法 | 第28-33页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第28-31页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第31-33页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第33-38页 |
| 2.3.1 对映体过量值(ee)测定条件的摸索 | 第33-36页 |
| 2.3.2 菌株的筛选 | 第36-37页 |
| 2.3.3 苯乙酮对转化结果的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.4 菌体的重复再利用 | 第38页 |
| 2.4 本章小结 | 第38-40页 |
| 第三章 羰基还原酶基因的克隆 | 第40-54页 |
| 3.1 前言 | 第40页 |
| 3.2 材料与方法 | 第40-47页 |
| 3.2.1 材料 | 第40-42页 |
| 3.2.2 方法 | 第42-47页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第47-53页 |
| 3.3.1 PCR扩增目的片段 | 第47-49页 |
| 3.3.2 羰基还原酶基因测序结果比对 | 第49-53页 |
| 3.4 本章小结 | 第53-54页 |
| 第四章 羰基还原酶的表达及表达条件优化 | 第54-68页 |
| 4.1 前言 | 第54页 |
| 4.2 材料与方法 | 第54-58页 |
| 4.2.1 材料 | 第54-57页 |
| 4.2.2 方法 | 第57-58页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第58-66页 |
| 4.3.1 表达载体的构建 | 第58-59页 |
| 4.3.2 CMCR在重组菌E.coli BL21 (pET28a-CMCR)和E.coli Rosetta(pET28a-CMCR)的表达 | 第59-62页 |
| 4.3.3 MCRF在重组菌E.coli BL21 (pET28a-MCRF)和E.coli Rosetta(pET28a-MCRF)的表达 | 第62-63页 |
| 4.3.4 E.coli Rosetta (pET28a-CMCR)诱导条件的优化 | 第63-66页 |
| 4.4 本章小结 | 第66-68页 |
| 第五章 羰基还原酶的酶学性质研究 | 第68-75页 |
| 5.1 前言 | 第68页 |
| 5.2 实验材料与方法 | 第68-69页 |
| 5.2.1 材料 | 第68-69页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第69页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第69-73页 |
| 5.3.1 CMCR的专一性和底物的特异性 | 第69-70页 |
| 5.3.2 温度对CMCR活性的影响 | 第70-71页 |
| 5.3.3 pH值对CMCR活性的影响 | 第71-73页 |
| 5.3.4 金属离子及浓度对CMCR催化活力的影响 | 第73页 |
| 5.4 本章小结 | 第73-75页 |
| 第六章 E.coli BL21(pET28a-CMCR)与E.coli Rossta (pET28a-CMCR)在不对称在手性药物中间体中的应用 | 第75-80页 |
| 6.1 前言 | 第75页 |
| 6.2 材料与方法 | 第75-77页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第75-76页 |
| 6.2.2 实验方法 | 第76-77页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第77-79页 |
| 6.3.1 重组菌催化的不对称还原反应 | 第77-79页 |
| 6.4 本章小结 | 第79-80页 |
| 结论与展望 | 第80-82页 |
| 1 结论 | 第80-81页 |
| 2 展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 附录 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第88页 |
