| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第13-22页 |
| 1.1 家蚕二分浓核病毒研究概况 | 第13-14页 |
| 1.1.1 家蚕二分浓核病毒 | 第13页 |
| 1.1.2 家蚕二分浓核病毒主要结构蛋白VP | 第13-14页 |
| 1.1.3 家蚕二分浓核病毒次要结构蛋白 P133 | 第14页 |
| 1.2 家蚕对家蚕二分浓核病毒的抵抗性研究 | 第14-17页 |
| 1.2.1 家蚕对家蚕二分浓核病毒的抗性 | 第14-15页 |
| 1.2.2 敏感性基因+~(nsd-2)的国内外研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2.3 家蚕细胞株的研究 | 第16-17页 |
| 1.3 病毒蛋白与细胞受体相互作用研究 | 第17-18页 |
| 1.3.1 病毒蛋白与细胞受体的结合机制 | 第17页 |
| 1.3.2 蛋白质相互作用的研究方法 | 第17-18页 |
| 1.3.3 病毒蛋白与细胞受体相互作用的研究前景 | 第18页 |
| 1.4 立题依据及意义 | 第18-19页 |
| 1.5 主要研究内容和技术路线 | 第19-22页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第19-21页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 稳定表达潜在受体蛋白NSD-2细胞株的建立 | 第22-42页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第22-25页 |
| 2.1.1 菌株和细胞系 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂和溶液的配制 | 第22-24页 |
| 2.1.3 主要实验仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-35页 |
| 2.2.1 稳定表达+~(nsd-2)基因质粒的构建 | 第25-28页 |
| 2.2.2 BmN细胞的培养、转染和筛选 | 第28-30页 |
| 2.2.3 稳转细胞的RT-PCR检测 | 第30-32页 |
| 2.2.4 稳转细胞的westernblot检测 | 第32-34页 |
| 2.2.5 稳转细胞的免疫荧光检测 | 第34-35页 |
| 2.3 结果及分析 | 第35-40页 |
| 2.3.1 敏感性基因+~(nsd-2)瞬时表达质粒的鉴定 | 第35-36页 |
| 2.3.2 稳转细胞株BmN(+~(nsd-2))细胞的形态观察 | 第36-38页 |
| 2.3.3 BmN(+~(nsd-2))细胞中+~(nsd-2)基因的转录 | 第38页 |
| 2.3.4 BmN(+~(nsd-2))细胞中NSD-2蛋白的表达 | 第38-39页 |
| 2.3.5 BmN(+~(nsd-2))细胞中NSD-2蛋白的定位分析 | 第39-40页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第40-42页 |
| 第三章 结构蛋白表达质粒构建 | 第42-64页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第42-44页 |
| 3.1.1 质粒、菌株及细胞系 | 第42页 |
| 3.1.2 主要试剂和溶液的配制 | 第42-43页 |
| 3.1.3 主要实验仪器设备 | 第43-44页 |
| 3.2 实验方法 | 第44-54页 |
| 3.2.1 vp和p133基因原核表达质粒的构建 | 第44页 |
| 3.2.2 单克隆抗体的制备 | 第44页 |
| 3.2.3 vp和p133基因真核表达质粒的构建及鉴定 | 第44-51页 |
| 3.2.4 vp基因截短片段表达质粒的构建及鉴定 | 第51-54页 |
| 3.3 结果及分析 | 第54-62页 |
| 3.3.1 vp基因及p133基因真核表达质粒 | 第54-57页 |
| 3.3.2 BmN(+~(nsd-2))细胞中表达VP蛋白和P133蛋白 | 第57-59页 |
| 3.3.3 vp基因截短片段表达质粒和蛋白表达 | 第59-62页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第62-64页 |
| 第四章 病毒主要结构蛋白VP与NSD-2蛋白的相互作用 | 第64-70页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第64-65页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第64页 |
| 4.1.2 主要试剂和溶液的配制 | 第64页 |
| 4.1.3 主要实验仪器设备 | 第64-65页 |
| 4.2 实验方法 | 第65-66页 |
| 4.2.1 免疫共沉淀相互作用分析 | 第65-66页 |
| 4.2.2 免疫荧光分析 | 第66页 |
| 4.3 结果及分析 | 第66-68页 |
| 4.3.1 VP蛋白及NSD-2表达鉴定 | 第66-67页 |
| 4.3.2 VP与NSD-2蛋白间相互作用分析 | 第67-68页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第68-70页 |
| 第五章 BmBDV对稳转细胞株BmN(+~(nsd-2))的侵染性 | 第70-78页 |
| 5.1 材料和试剂 | 第70页 |
| 5.1.1 细胞系 | 第70页 |
| 5.1.2 主要试剂和溶液的配制 | 第70页 |
| 5.1.3 主要实验仪器设备 | 第70页 |
| 5.2 实验方法 | 第70-73页 |
| 5.2.1 BmBDV侵染BmN(+~(nsd-2))细胞 | 第70-72页 |
| 5.2.2 BmBDV侵染BmN(+~(nsd-2))细胞的免疫荧光检测 | 第72页 |
| 5.2.3 BmBDV侵染BmN(+~(nsd-2))细胞的qRT-PCR检测 | 第72-73页 |
| 5.3 结果及分析 | 第73-76页 |
| 5.3.1 BmBDV病毒悬液提取后vp基因的检测 | 第73-74页 |
| 5.3.2 BmBDV侵染BmN(+~(nsd-2))细胞后VP蛋白的表达 | 第74-75页 |
| 5.3.3 BmBDV侵染BmN(+~(nsd-2))细胞后vp和ns1基因的转录 | 第75-76页 |
| 5.4 讨论与小结 | 第76-78页 |
| 第六章 总结与展望 | 第78-81页 |
| 6.1 主要总结 | 第78-79页 |
| 6.2 工作展望 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第90页 |
| 参与的研究项目 | 第90页 |
