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质子感知受体调控人髓核细胞凋亡机制研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
缩略语/符号说明第14-17页
前言第17-22页
    研究现状、成果第17-20页
    研究目的、方法第20-22页
一、酸性环境对人椎间盘髓核细胞凋亡的影响第22-38页
    1.1 对象和方法第22-31页
        1.1.1 组织来源第22页
        1.1.2 主要试剂第22-23页
        1.1.3 主要实验仪器第23-24页
        1.1.4 常用溶液配制第24-26页
        1.1.5 滤器的使用第26-27页
        1.1.6 髓核细胞的分离培养、传代、冻存、复苏及计数第27-29页
        1.1.7 髓核细胞的染色观察和鉴定第29-30页
        1.1.8 实验分组第30页
        1.1.9 髓核细胞DAPI染色第30-31页
        1.1.10 流式细胞仪检测髓核细胞的凋亡率第31页
        1.1.11 统计学分析第31页
    1.2 结果第31-34页
        1.2.1 髓核细胞的培养及形态观察第31-32页
        1.2.2 髓核细胞的染色观察及鉴定结果第32-33页
        1.2.3 髓核细胞的DAPI染色结果第33页
        1.2.4 流式细胞仪测定的髓核细胞的凋亡率第33-34页
    1.3 讨论第34-37页
        1.3.1 椎间盘退变研究的现状第34页
        1.3.2 椎间盘组织酸性环境的成因第34-35页
        1.3.3 酸性环境对椎间盘基质及细胞的影响第35-36页
        1.3.4 髓核细胞DAPI染色机理第36页
        1.3.5 AnnexinV-FITC/PI双染细胞凋亡测定机理第36页
        1.3.6 实验结果第36页
        1.3.7 展望第36-37页
    1.4 小结第37-38页
二、质子感知受体在人椎间盘髓核细胞中的表达第38-60页
    2.1 对象和方法第38-54页
        2.1.1 组织来源第38-39页
        2.1.2 主要试剂第39-41页
        2.1.3 主要实验仪器第41-42页
        2.1.4 常用溶液配制第42-44页
        2.1.5 滤器的使用第44-45页
        2.1.6 髓核细胞的分离培养、传代、冻存、复苏及计数第45-47页
        2.1.7 髓核细胞的染色观察和鉴定第47-48页
        2.1.8 实验分组第48页
        2.1.9 人椎间盘髓核细胞总RNA提取,浓度测定及qRT-PCR第48-51页
        2.1.10 Western Blot检测三组OGR1蛋白表达情况第51-54页
        2.1.11 统计学分析第54页
    2.2 结果第54-56页
        2.2.1 髓核细胞的培养及形态观察第54页
        2.2.2 髓核细胞的染色观察及鉴定结果第54页
        2.2.3 髓核细胞OGR1亚家族受体基因表达情况第54-55页
        2.2.4 Western Blot测定的三组OGR1蛋白表达情况第55-56页
    2.3 讨论第56-58页
        2.3.1 酸性靶点通道的研究进展第56-58页
        2.3.2 实验结果第58页
        2.3.3 展望第58页
    2.4 小结第58-60页
三、OGR1介导细胞内Ca~(2+)水平调控人髓核细胞凋亡机制研究第60-78页
    3.1 对象和方法第60-71页
        3.1.1 组织来源第60-61页
        3.1.2 主要试剂第61-62页
        3.1.3 主要实验仪器第62-63页
        3.1.4 常用溶液配制第63-66页
        3.1.5 滤器的使用第66-67页
        3.1.6 髓核细胞的分离培养、传代、冻存、复苏及计数第67-69页
        3.1.7 髓核细胞的染色观察和鉴定第69-70页
        3.1.8 实验分组第70页
        3.1.9 激光共聚焦显微镜观察检测髓核细胞内Ca~(2+)水平第70页
        3.1.10 Western Blot检测三组Calpain和Calcineurin蛋白表达情况第70页
        3.1.11 Elisa法检测三组Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白表达情况第70-71页
        3.1.12 统计学分析第71页
    3.2 结果第71-73页
        3.2.1 髓核细胞的培养及形态观察第71-72页
        3.2.2 髓核细胞的染色观察及鉴定结果第72页
        3.2.3 激光共聚焦显微镜观察测定的髓核细胞内Ca~(2+)水平第72页
        3.2.4 Western Blot测定的三组Calpain和Calcineurin蛋白表达情况第72-73页
        3.2.5 Elisa法测定的三组Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白表达情况第73页
    3.3 讨论第73-76页
        3.3.1 PLC-IP3信号转导通路的研究现状第73-74页
        3.3.2 Calpain的研究现状第74页
        3.3.3 Calcineurin的研究现状第74-75页
        3.3.4 细胞凋亡的研究现状第75页
        3.3.5 实验结果第75-76页
        3.3.6 展望第76页
    3.4 小结第76-78页
全文结论第78-79页
论文创新点第79-80页
参考文献第80-88页
发表论文和参加科研情况说明第88-89页
综述 酸性环境对椎间盘退变影响的研究进展第89-99页
    综述参考文献第94-99页
致谢第99-101页
个人简历第101页

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