| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语/符号说明 | 第14-17页 |
| 前言 | 第17-22页 |
| 研究现状、成果 | 第17-20页 |
| 研究目的、方法 | 第20-22页 |
| 一、酸性环境对人椎间盘髓核细胞凋亡的影响 | 第22-38页 |
| 1.1 对象和方法 | 第22-31页 |
| 1.1.1 组织来源 | 第22页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 1.1.3 主要实验仪器 | 第23-24页 |
| 1.1.4 常用溶液配制 | 第24-26页 |
| 1.1.5 滤器的使用 | 第26-27页 |
| 1.1.6 髓核细胞的分离培养、传代、冻存、复苏及计数 | 第27-29页 |
| 1.1.7 髓核细胞的染色观察和鉴定 | 第29-30页 |
| 1.1.8 实验分组 | 第30页 |
| 1.1.9 髓核细胞DAPI染色 | 第30-31页 |
| 1.1.10 流式细胞仪检测髓核细胞的凋亡率 | 第31页 |
| 1.1.11 统计学分析 | 第31页 |
| 1.2 结果 | 第31-34页 |
| 1.2.1 髓核细胞的培养及形态观察 | 第31-32页 |
| 1.2.2 髓核细胞的染色观察及鉴定结果 | 第32-33页 |
| 1.2.3 髓核细胞的DAPI染色结果 | 第33页 |
| 1.2.4 流式细胞仪测定的髓核细胞的凋亡率 | 第33-34页 |
| 1.3 讨论 | 第34-37页 |
| 1.3.1 椎间盘退变研究的现状 | 第34页 |
| 1.3.2 椎间盘组织酸性环境的成因 | 第34-35页 |
| 1.3.3 酸性环境对椎间盘基质及细胞的影响 | 第35-36页 |
| 1.3.4 髓核细胞DAPI染色机理 | 第36页 |
| 1.3.5 AnnexinV-FITC/PI双染细胞凋亡测定机理 | 第36页 |
| 1.3.6 实验结果 | 第36页 |
| 1.3.7 展望 | 第36-37页 |
| 1.4 小结 | 第37-38页 |
| 二、质子感知受体在人椎间盘髓核细胞中的表达 | 第38-60页 |
| 2.1 对象和方法 | 第38-54页 |
| 2.1.1 组织来源 | 第38-39页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第39-41页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第41-42页 |
| 2.1.4 常用溶液配制 | 第42-44页 |
| 2.1.5 滤器的使用 | 第44-45页 |
| 2.1.6 髓核细胞的分离培养、传代、冻存、复苏及计数 | 第45-47页 |
| 2.1.7 髓核细胞的染色观察和鉴定 | 第47-48页 |
| 2.1.8 实验分组 | 第48页 |
| 2.1.9 人椎间盘髓核细胞总RNA提取,浓度测定及qRT-PCR | 第48-51页 |
| 2.1.10 Western Blot检测三组OGR1蛋白表达情况 | 第51-54页 |
| 2.1.11 统计学分析 | 第54页 |
| 2.2 结果 | 第54-56页 |
| 2.2.1 髓核细胞的培养及形态观察 | 第54页 |
| 2.2.2 髓核细胞的染色观察及鉴定结果 | 第54页 |
| 2.2.3 髓核细胞OGR1亚家族受体基因表达情况 | 第54-55页 |
| 2.2.4 Western Blot测定的三组OGR1蛋白表达情况 | 第55-56页 |
| 2.3 讨论 | 第56-58页 |
| 2.3.1 酸性靶点通道的研究进展 | 第56-58页 |
| 2.3.2 实验结果 | 第58页 |
| 2.3.3 展望 | 第58页 |
| 2.4 小结 | 第58-60页 |
| 三、OGR1介导细胞内Ca~(2+)水平调控人髓核细胞凋亡机制研究 | 第60-78页 |
| 3.1 对象和方法 | 第60-71页 |
| 3.1.1 组织来源 | 第60-61页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第61-62页 |
| 3.1.3 主要实验仪器 | 第62-63页 |
| 3.1.4 常用溶液配制 | 第63-66页 |
| 3.1.5 滤器的使用 | 第66-67页 |
| 3.1.6 髓核细胞的分离培养、传代、冻存、复苏及计数 | 第67-69页 |
| 3.1.7 髓核细胞的染色观察和鉴定 | 第69-70页 |
| 3.1.8 实验分组 | 第70页 |
| 3.1.9 激光共聚焦显微镜观察检测髓核细胞内Ca~(2+)水平 | 第70页 |
| 3.1.10 Western Blot检测三组Calpain和Calcineurin蛋白表达情况 | 第70页 |
| 3.1.11 Elisa法检测三组Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白表达情况 | 第70-71页 |
| 3.1.12 统计学分析 | 第71页 |
| 3.2 结果 | 第71-73页 |
| 3.2.1 髓核细胞的培养及形态观察 | 第71-72页 |
| 3.2.2 髓核细胞的染色观察及鉴定结果 | 第72页 |
| 3.2.3 激光共聚焦显微镜观察测定的髓核细胞内Ca~(2+)水平 | 第72页 |
| 3.2.4 Western Blot测定的三组Calpain和Calcineurin蛋白表达情况 | 第72-73页 |
| 3.2.5 Elisa法测定的三组Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白表达情况 | 第73页 |
| 3.3 讨论 | 第73-76页 |
| 3.3.1 PLC-IP3信号转导通路的研究现状 | 第73-74页 |
| 3.3.2 Calpain的研究现状 | 第74页 |
| 3.3.3 Calcineurin的研究现状 | 第74-75页 |
| 3.3.4 细胞凋亡的研究现状 | 第75页 |
| 3.3.5 实验结果 | 第75-76页 |
| 3.3.6 展望 | 第76页 |
| 3.4 小结 | 第76-78页 |
| 全文结论 | 第78-79页 |
| 论文创新点 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第88-89页 |
| 综述 酸性环境对椎间盘退变影响的研究进展 | 第89-99页 |
| 综述参考文献 | 第94-99页 |
| 致谢 | 第99-101页 |
| 个人简历 | 第101页 |
