| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 符号与缩略语说明 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-36页 |
| 第一节 有机磷农药的微生物降解 | 第16-27页 |
| 1 有机磷农药的结构 | 第16-17页 |
| 2 有机磷农药的毒理 | 第17-18页 |
| 3 有机磷农药的微生物降解 | 第18-27页 |
| 3.1 降解有机磷农药的微生物种类 | 第18-20页 |
| 3.2 微生物降解有机磷农药的机理 | 第20-21页 |
| 3.3 影响微生物降解有机磷农药的因子 | 第21-22页 |
| 3.4 微生物降解有机磷农药的代谢途径研究 | 第22-24页 |
| 3.5 有机磷农药降解酶基因研究进展 | 第24-26页 |
| 3.6 有机磷农药污染土壤的微生物修复 | 第26-27页 |
| 第二节 毒死蜱的微生物降解研究进展 | 第27-36页 |
| 1 毒死蜱的理化性质及用途 | 第27-28页 |
| 2 毒死蜱的生态毒理 | 第28-29页 |
| 3 毒死蜱的残留 | 第29-30页 |
| 4 TCP的理化性质 | 第30-31页 |
| 5 TCP的生态毒理 | 第31页 |
| 6 毒死蜱的微生物降解 | 第31-36页 |
| 第二部分 实验部分 | 第36-114页 |
| 第一章 毒死蜱降解菌的分离鉴定 | 第36-60页 |
| 第一节 毒死蜱降解菌的分离及生物学特性 | 第36-44页 |
| 1 材料与方法 | 第36-39页 |
| 1.1 菌株、培养基与试剂 | 第36页 |
| 1.2 降解菌株的驯化与分离 | 第36-37页 |
| 1.3 降解菌株的培养特征及生理生化鉴定 | 第37页 |
| 1.4 降解菌株的16S rRNA序列的测定与分析 | 第37-38页 |
| 1.5 降解菌株系统发育地位的确定 | 第38页 |
| 1.6 菌体生长量的测定 | 第38-39页 |
| 1.7 毒死蜱、TCP的提取与检测方法 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-44页 |
| 2.1 毒死蜱降解菌的分离筛选 | 第39-40页 |
| 2.2 降解菌OP-1、DT-1的菌落形态及生理生化特征 | 第40-41页 |
| 2.3 降解菌株的基因组DNA提取 | 第41页 |
| 2.4 降解菌株的系统发育地位 | 第41-44页 |
| 第二节 菌株OP-1的分类地位研究 | 第44-56页 |
| 1 材料与方法 | 第44-48页 |
| 1.1 培养基与菌株 | 第44页 |
| 1.2 试剂 | 第44页 |
| 1.3 最适生长温度测定 | 第44页 |
| 1.4 最适生长pH的测定 | 第44-45页 |
| 1.5 API检测分析 | 第45页 |
| 1.6 Biolog检测 | 第45页 |
| 1.7 细胞壁脂肪酸检测 | 第45-46页 |
| 1.8 细胞醌类测定 | 第46-47页 |
| 1.9 细胞极性脂组分分析 | 第47页 |
| 1.10 G+C mol%的测定 | 第47-48页 |
| 1.11 DNA-DNA杂交 | 第48页 |
| 1.12 菌株系统进化树分析 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-56页 |
| 2.1 菌株OP-1的API鉴定结果 | 第48-50页 |
| 2.2 菌株的Biolog鉴定结果 | 第50-51页 |
| 2.3 菌株OP-1与相近模式种的生理生化差异总结 | 第51-52页 |
| 2.4 细胞脂肪酸分析 | 第52-53页 |
| 2.5 菌株醌组分分析 | 第53页 |
| 2.6 菌株极性脂组分分析 | 第53-54页 |
| 2.7 菌株的G+C mol%含量测定 | 第54页 |
| 2.8 DNA-DNA同源性分析 | 第54页 |
| 2.9 16S rRNA基因系统发育分析 | 第54-55页 |
| 2.10 新种描述 | 第55-56页 |
| 讨论 | 第56-57页 |
| 本章小结 | 第57-60页 |
| 第二章 菌株DT-1的生长、降解特性研究 | 第60-74页 |
| 第一节 菌株DT-1的生长特性研究 | 第60-66页 |
| 1 材料与方法 | 第60-61页 |
| 1.1 菌株、培养基与试剂 | 第60页 |
| 1.2 菌种制备及菌体生长量的测定方法 | 第60页 |
| 1.3 菌体生长曲线的测定 | 第60页 |
| 1.4 温度对菌株DT-1生长的影响 | 第60-61页 |
| 1.5 初始pH值对菌株DT-1生长的影响 | 第61页 |
| 1.6 通气量对菌株DT-1生长的影响 | 第61页 |
| 1.7 NaCl浓度对菌株DT-1生长的影响 | 第61页 |
| 1.8 不同碳氮源对菌株DT-1生长的影响 | 第61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-66页 |
| 2.1 菌株的生长曲线 | 第61-62页 |
| 2.2 温度对菌株DT-1生长的影响 | 第62页 |
| 2.3 pH对菌株DT-1生长的影响 | 第62-63页 |
| 2.4 通气量对菌株DT-1生长的影响 | 第63页 |
| 2.5 NaCl浓度对菌株DT-1生长的影响 | 第63-64页 |
| 2.6 不同碳源对菌株DT-1生长的影响 | 第64页 |
| 2.7 不同氮源对菌株DT-1生长的影响 | 第64-66页 |
| 第二节 菌株DT-1对毒死蜱的降解特性研究 | 第66-71页 |
| 1 材料与方法 | 第66-67页 |
| 1.1 菌株、培养基与试剂 | 第66页 |
| 1.2 菌株种子液的制备 | 第66页 |
| 1.3 培养基中毒死蜱、TCP的提取与检测 | 第66页 |
| 1.4 菌株DT-1利用毒死蜱为唯一碳源的生长和降解 | 第66页 |
| 1.5 温度对菌株DT-1降解毒死蜱的影响 | 第66页 |
| 1.6 初始pH值对菌株DT-1降解毒死蜱的影响 | 第66页 |
| 1.7 通气量对菌株DT-1降解毒死蜱的影响 | 第66-67页 |
| 1.8 接种量对菌株DT-1降解毒死蜱的影响 | 第67页 |
| 1.9 NaCl浓度对菌株DT-1降解毒死蜱的影响 | 第67页 |
| 1.10 金属离子对菌株DT-1降解毒死蜱的影响 | 第67页 |
| 1.11 菌株DT-1的降解谱 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-71页 |
| 2.1 菌株DT-1利用毒死蜱为唯一碳源的生长降解情况 | 第67-68页 |
| 2.2 温度对菌株DT-1降解毒死蜱的影响 | 第68-69页 |
| 2.3 初始pH值对菌株DT-1降解毒死蜱的影响 | 第69页 |
| 2.4 通气量对菌株DT-1降解毒死蜱的影响 | 第69-70页 |
| 2.5 接种量对菌株DT-1降解毒死蜱的影响 | 第70页 |
| 2.6 NaCl浓度对菌株DT-1降解毒死蜱的影响 | 第70-71页 |
| 2.7 金属离子对菌株DT-1降解毒死蜱的影响 | 第71页 |
| 2.8 菌株DT-1的降解谱 | 第71页 |
| 讨论 | 第71-72页 |
| 本章小结 | 第72-74页 |
| 第三章 菌株DT-1对毒死蜱的降解途径研究 | 第74-92页 |
| 第一节 菌株DT-1降解毒死蜱的产物检测及途径分析 | 第74-83页 |
| 1 材料与方法 | 第74-75页 |
| 1.1 菌株、培养基 | 第74页 |
| 1.2 农药、试剂 | 第74页 |
| 1.3 毒死蜱降解中间产物的检测分析 | 第74-75页 |
| 1.4 TCP降解产物的检测 | 第75页 |
| 1.5 菌株DT-1利用2-羟基吡啶为唯一碳源的生长和降解 | 第75页 |
| 2 实验结果 | 第75-83页 |
| 2.1 毒死蜱代谢产物的LC-MS分析 | 第75-77页 |
| 2.2 TCP代谢产物的LC-MS分析 | 第77-79页 |
| 2.4 代谢产物的鉴定 | 第79-82页 |
| 2.5 菌株DT-1利用2-羟基吡啶为唯一碳源的生长和降解 | 第82页 |
| 2.6 代谢途径推测 | 第82-83页 |
| 第二节 DT-1对TCP的降解特性的研究 | 第83-89页 |
| 1 材料与方法 | 第83-84页 |
| 1.1 菌株、培养基 | 第83页 |
| 1.2 供试农药及化学试剂 | 第83页 |
| 1.3 菌株的培养和接种 | 第83页 |
| 1.4 检测方法 | 第83页 |
| 1.5 菌株生长和降解的关系 | 第83页 |
| 1.6 环境条件对菌株DT-1降解TCP的影响 | 第83-84页 |
| 2 结果 | 第84-89页 |
| 2.1 菌株生长和降解的关系 | 第84-85页 |
| 2.2 环境条件对降解的影响 | 第85-89页 |
| 讨论 | 第89页 |
| 本章小结 | 第89-92页 |
| 第四章 有机磷水解酶基因的克隆表达 | 第92-104页 |
| 1 材料与方法 | 第92-96页 |
| 1.1 培养基与试剂 | 第92页 |
| 1.2 所用菌株与质粒 | 第92-93页 |
| 1.3 菌体总DNA的提取 | 第93页 |
| 1.4 质粒DNA的提取 | 第93页 |
| 1.5 感受态细胞的制备 | 第93页 |
| 1.6 有机磷水解酶基因的PCR扩增 | 第93页 |
| 1.7 有机磷水解酶基因表达载体的构建 | 第93-94页 |
| 1.8 有机磷水解酶基因的表达 | 第94页 |
| 1.9 有机磷水解酶的纯化 | 第94-95页 |
| 1.10 聚丙烯酰胺凝胶的灌制 | 第95页 |
| 1.11 染色脱色 | 第95-96页 |
| 2 结果与分析 | 第96-102页 |
| 2.1 有机磷水解酶基因的PCR扩增 | 第96页 |
| 2.2 核苷酸序列水平比较 | 第96-98页 |
| 2.3 氨基酸序列水平比较 | 第98-100页 |
| 2.4 基因的表达与功能验证 | 第100-102页 |
| 3 讨论 | 第102-103页 |
| 4 本章小结 | 第103-104页 |
| 第五章 毒死蜱污染土壤的生物修复研究 | 第104-114页 |
| 1 材料与方法 | 第104-106页 |
| 1.1 菌株、培养基与试剂 | 第104页 |
| 1.2 供试土壤 | 第104页 |
| 1.3 土壤样品的处理 | 第104-105页 |
| 1.4 菌体种子液的制备 | 第105页 |
| 1.5 实验设计 | 第105页 |
| 1.6 土壤中残留毒死蜱和TCP含量的测定 | 第105页 |
| 1.7 土壤降解实验 | 第105-106页 |
| 2 结果与分析 | 第106-112页 |
| 2.1 菌株DT-1对土壤中毒死蜱的降解 | 第106-107页 |
| 2.2 接种量对菌株DT-1降解土壤中毒死蜱的影响 | 第107-108页 |
| 2.3 土壤温度对菌株DT-1降解土壤中毒死蜱的影响 | 第108-109页 |
| 2.4 土壤pH值对菌株DT-1降解土壤中毒死蜱的影响 | 第109-110页 |
| 2.5 土壤含水量对菌株DT-1降解土壤中毒死蜱的影响 | 第110-112页 |
| 3 讨论 | 第112-113页 |
| 4 本章小结 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-124页 |
| 全文总结 | 第124-126页 |
| 本论文主要创新点 | 第126-128页 |
| 附录一 文中所用培养基及试剂配方 | 第128-132页 |
| 附录二 有关核酸序列 | 第132-136页 |
| 附录三 菌种保藏证明 | 第136-140页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第140-142页 |
| 致谢 | 第142页 |
