中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
引言 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-26页 |
1.1 植物高温胁迫响应机理的研究进展 | 第14-18页 |
1.1.1 高温胁迫对植物生理代谢的影响 | 第14-15页 |
1.1.2 植物高温胁迫响应的分子机制 | 第15-18页 |
1.2 植物蛋白质组学研究进展 | 第18-21页 |
1.2.1 蛋白质组学概念 | 第18-19页 |
1.2.2 蛋白质组学技术在植物逆境胁迫研究中的应用 | 第19-21页 |
1.3 植物高温胁迫响应相关蛋白的研究 | 第21-24页 |
1.3.1 植物热激蛋白研究概况 | 第21页 |
1.3.2 热激蛋白的产生及分类 | 第21-24页 |
1.4 研究目的与意义 | 第24-26页 |
第二章 大丽花花瓣和叶片蛋白表达谱构建的初步研究 | 第26-33页 |
2.1 材料与方法 | 第26-27页 |
2.1.1 植物材料 | 第26页 |
2.1.2 蛋白质提取及定量试剂 | 第26页 |
2.1.3 大丽花花瓣和叶片蛋白质的提取 | 第26-27页 |
2.1.4 大丽花花瓣和叶片蛋白质的SDS-PAGE | 第27页 |
2.1.5 差异条带的质谱分析 | 第27页 |
2.1.6 GO分析 | 第27页 |
2.2 结果与分析 | 第27-31页 |
2.2.1 大丽花花瓣和叶片总蛋白的SDS-PAGE分析 | 第27-28页 |
2.2.2 大丽花花瓣和叶片蛋白的质谱鉴定 | 第28-29页 |
2.2.3 大丽花花瓣和叶片蛋白质的GO分子功能注释 | 第29-30页 |
2.2.4 大丽花花瓣和叶片蛋白质的GO生物过程注释 | 第30-31页 |
2.2.5 大丽花叶片和花瓣蛋白质的GO细胞组分注释 | 第31页 |
2.3 讨论 | 第31-33页 |
第三章 大丽花高温胁迫响应相关蛋白2-DE/MS分析 | 第33-42页 |
3.1 材料与方法 | 第33-35页 |
3.1.1 植物材料 | 第33页 |
3.1.2 蛋白质组学实验相关试剂 | 第33-34页 |
3.1.3 大丽花花瓣蛋白质样品的制备 | 第34页 |
3.1.4 大丽花花瓣蛋白质的双向电泳 | 第34-35页 |
3.1.5 凝胶扫描分析 | 第35页 |
3.1.6 胶内酶切及质谱鉴定 | 第35页 |
3.2 结果与分析 | 第35-40页 |
3.2.1 高温胁迫对大丽花花瓣生长发育的影响 | 第35-36页 |
3.2.2 高温胁迫下大丽花花瓣蛋白表达谱的2-DE分析 | 第36页 |
3.2.3 高温胁迫相关差异蛋白质的质谱鉴定及功能分析 | 第36-40页 |
3.3 讨论 | 第40-42页 |
第四章 大丽花花瓣响应外源SA调控相关蛋白的1-DE/MS分析 | 第42-54页 |
4.1 材料与方法 | 第42-43页 |
4.1.1 植物材料 | 第42-43页 |
4.1.2 大丽花花瓣蛋白质的提取 | 第43页 |
4.1.3 花瓣蛋白质的SDS-PAGE | 第43页 |
4.1.4 差异条带的质谱分析 | 第43页 |
4.1.5 GO和KEGG分析 | 第43页 |
4.2 结果与分析 | 第43-51页 |
4.2.1 大丽花花瓣响应外源SA调控相关蛋白的SDS-PAGE分析 | 第43-44页 |
4.2.2 大丽花花瓣1-DE差异条带的质谱分析 | 第44页 |
4.2.3 大丽花花瓣外源SA响应相关蛋白的GO分析 | 第44-48页 |
4.2.4 大丽花花瓣外源SA响应相关蛋白的KEGG分析 | 第48-51页 |
4.3 讨论 | 第51-54页 |
4.3.1 外源水杨酸对大丽花花瓣蛋白质表达谱的影响 | 第51页 |
4.3.2 外源水杨酸对大丽花花瓣应激响应相关蛋白表达的影响 | 第51-52页 |
4.3.3 外源水杨酸对大丽花花瓣光合作用相关蛋白表达的影响 | 第52-53页 |
4.3.4 外源水杨酸对大丽花花瓣代谢相关蛋白表达的影响 | 第53-54页 |
第五章 大丽花高温胁迫响应相关DPHSPs基因的克隆 | 第54-74页 |
5.1 材料与方法 | 第54-57页 |
5.1.1 植物材料 | 第54页 |
5.1.2 主要试剂与溶液 | 第54-55页 |
5.1.3 总RNA的提取 | 第55页 |
5.1.4 cDNA第一链的合成 | 第55-56页 |
5.1.5 引物设计 | 第56页 |
5.1.6 PCR及扩增片段回收 | 第56-57页 |
5.1.7 PCR扩增片段的连接及转化 | 第57页 |
5.1.8 阳性克隆的筛选与测序 | 第57页 |
5.2 结果与分析 | 第57-71页 |
5.2.1 花瓣总RNA的质量分析 | 第57-58页 |
5.2.2 大丽花花瓣HSP90基因cDNA序列的克隆及分析 | 第58-61页 |
5.2.3 大丽花花瓣HSP70基因cDNA序列的克隆及分析 | 第61-64页 |
5.2.4 大丽花花瓣CPN60基因cDNA序列的克隆及分析 | 第64-68页 |
5.2.5 大丽花花瓣HSP17基因cDNA序列的克隆及分析 | 第68-71页 |
5.3 讨论 | 第71-74页 |
5.3.1 大丽花DpHSPs基因及氨基酸序列的同源性 | 第71-72页 |
5.3.2 热激蛋白与高温胁迫的关系及其生物学功能 | 第72-74页 |
第六章 大丽花高温胁迫相关DpHSPs基因的表达分析 | 第74-84页 |
6.1 材料与方法 | 第75-76页 |
6.1.1 植物材料 | 第75页 |
6.1.2 大丽花花瓣总RNA的提取 | 第75页 |
6.1.3 cDNA第一条链的合成。 | 第75页 |
6.1.4 引物设计 | 第75页 |
6.1.5 标准品的制备 | 第75-76页 |
6.1.6 实时荧光定量PCR | 第76页 |
6.1.7 数据处理 | 第76页 |
6.2 结果与分析 | 第76-81页 |
6.2.1 花瓣总RNA的质量分析 | 第76-77页 |
6.2.2 大丽花高温胁迫相关基因的PCR产物分析 | 第77-78页 |
6.2.3 内参基因和目的基因qRT-PCR体系的构建 | 第78-80页 |
6.2.4 不同处理条件下大丽花花瓣DpHSPs基因的表达分析 | 第80-81页 |
6.3 讨论 | 第81-84页 |
6.3.1 大丽花高温胁迫与DpHSPs基因表达的关系 | 第81-82页 |
6.3.2 外源SA与大丽花DpHSPs基因表达的关系 | 第82-84页 |
第七章 全文结论 | 第84-87页 |
7.1 结论 | 第84-85页 |
7.2 特色与创新 | 第85-86页 |
7.3 存在问题及今后课题 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-107页 |
攻读硕士学位期间的科研成果 | 第107-108页 |
附录 I 大丽花花瓣和叶片蛋白质的质谱鉴定结果 | 第108-139页 |
附录 II 大丽花花瓣高温胁迫及外源SA响应相关蛋白的质谱鉴定结果 | 第139-155页 |
致谢 | 第155-157页 |