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大丽花高温胁迫响应机制的蛋白质组学研究

中文摘要第4-6页
abstract第6-7页
引言第12-14页
第一章 文献综述第14-26页
    1.1 植物高温胁迫响应机理的研究进展第14-18页
        1.1.1 高温胁迫对植物生理代谢的影响第14-15页
        1.1.2 植物高温胁迫响应的分子机制第15-18页
    1.2 植物蛋白质组学研究进展第18-21页
        1.2.1 蛋白质组学概念第18-19页
        1.2.2 蛋白质组学技术在植物逆境胁迫研究中的应用第19-21页
    1.3 植物高温胁迫响应相关蛋白的研究第21-24页
        1.3.1 植物热激蛋白研究概况第21页
        1.3.2 热激蛋白的产生及分类第21-24页
    1.4 研究目的与意义第24-26页
第二章 大丽花花瓣和叶片蛋白表达谱构建的初步研究第26-33页
    2.1 材料与方法第26-27页
        2.1.1 植物材料第26页
        2.1.2 蛋白质提取及定量试剂第26页
        2.1.3 大丽花花瓣和叶片蛋白质的提取第26-27页
        2.1.4 大丽花花瓣和叶片蛋白质的SDS-PAGE第27页
        2.1.5 差异条带的质谱分析第27页
        2.1.6 GO分析第27页
    2.2 结果与分析第27-31页
        2.2.1 大丽花花瓣和叶片总蛋白的SDS-PAGE分析第27-28页
        2.2.2 大丽花花瓣和叶片蛋白的质谱鉴定第28-29页
        2.2.3 大丽花花瓣和叶片蛋白质的GO分子功能注释第29-30页
        2.2.4 大丽花花瓣和叶片蛋白质的GO生物过程注释第30-31页
        2.2.5 大丽花叶片和花瓣蛋白质的GO细胞组分注释第31页
    2.3 讨论第31-33页
第三章 大丽花高温胁迫响应相关蛋白2-DE/MS分析第33-42页
    3.1 材料与方法第33-35页
        3.1.1 植物材料第33页
        3.1.2 蛋白质组学实验相关试剂第33-34页
        3.1.3 大丽花花瓣蛋白质样品的制备第34页
        3.1.4 大丽花花瓣蛋白质的双向电泳第34-35页
        3.1.5 凝胶扫描分析第35页
        3.1.6 胶内酶切及质谱鉴定第35页
    3.2 结果与分析第35-40页
        3.2.1 高温胁迫对大丽花花瓣生长发育的影响第35-36页
        3.2.2 高温胁迫下大丽花花瓣蛋白表达谱的2-DE分析第36页
        3.2.3 高温胁迫相关差异蛋白质的质谱鉴定及功能分析第36-40页
    3.3 讨论第40-42页
第四章 大丽花花瓣响应外源SA调控相关蛋白的1-DE/MS分析第42-54页
    4.1 材料与方法第42-43页
        4.1.1 植物材料第42-43页
        4.1.2 大丽花花瓣蛋白质的提取第43页
        4.1.3 花瓣蛋白质的SDS-PAGE第43页
        4.1.4 差异条带的质谱分析第43页
        4.1.5 GO和KEGG分析第43页
    4.2 结果与分析第43-51页
        4.2.1 大丽花花瓣响应外源SA调控相关蛋白的SDS-PAGE分析第43-44页
        4.2.2 大丽花花瓣1-DE差异条带的质谱分析第44页
        4.2.3 大丽花花瓣外源SA响应相关蛋白的GO分析第44-48页
        4.2.4 大丽花花瓣外源SA响应相关蛋白的KEGG分析第48-51页
    4.3 讨论第51-54页
        4.3.1 外源水杨酸对大丽花花瓣蛋白质表达谱的影响第51页
        4.3.2 外源水杨酸对大丽花花瓣应激响应相关蛋白表达的影响第51-52页
        4.3.3 外源水杨酸对大丽花花瓣光合作用相关蛋白表达的影响第52-53页
        4.3.4 外源水杨酸对大丽花花瓣代谢相关蛋白表达的影响第53-54页
第五章 大丽花高温胁迫响应相关DPHSPs基因的克隆第54-74页
    5.1 材料与方法第54-57页
        5.1.1 植物材料第54页
        5.1.2 主要试剂与溶液第54-55页
        5.1.3 总RNA的提取第55页
        5.1.4 cDNA第一链的合成第55-56页
        5.1.5 引物设计第56页
        5.1.6 PCR及扩增片段回收第56-57页
        5.1.7 PCR扩增片段的连接及转化第57页
        5.1.8 阳性克隆的筛选与测序第57页
    5.2 结果与分析第57-71页
        5.2.1 花瓣总RNA的质量分析第57-58页
        5.2.2 大丽花花瓣HSP90基因cDNA序列的克隆及分析第58-61页
        5.2.3 大丽花花瓣HSP70基因cDNA序列的克隆及分析第61-64页
        5.2.4 大丽花花瓣CPN60基因cDNA序列的克隆及分析第64-68页
        5.2.5 大丽花花瓣HSP17基因cDNA序列的克隆及分析第68-71页
    5.3 讨论第71-74页
        5.3.1 大丽花DpHSPs基因及氨基酸序列的同源性第71-72页
        5.3.2 热激蛋白与高温胁迫的关系及其生物学功能第72-74页
第六章 大丽花高温胁迫相关DpHSPs基因的表达分析第74-84页
    6.1 材料与方法第75-76页
        6.1.1 植物材料第75页
        6.1.2 大丽花花瓣总RNA的提取第75页
        6.1.3 cDNA第一条链的合成。第75页
        6.1.4 引物设计第75页
        6.1.5 标准品的制备第75-76页
        6.1.6 实时荧光定量PCR第76页
        6.1.7 数据处理第76页
    6.2 结果与分析第76-81页
        6.2.1 花瓣总RNA的质量分析第76-77页
        6.2.2 大丽花高温胁迫相关基因的PCR产物分析第77-78页
        6.2.3 内参基因和目的基因qRT-PCR体系的构建第78-80页
        6.2.4 不同处理条件下大丽花花瓣DpHSPs基因的表达分析第80-81页
    6.3 讨论第81-84页
        6.3.1 大丽花高温胁迫与DpHSPs基因表达的关系第81-82页
        6.3.2 外源SA与大丽花DpHSPs基因表达的关系第82-84页
第七章 全文结论第84-87页
    7.1 结论第84-85页
    7.2 特色与创新第85-86页
    7.3 存在问题及今后课题第86-87页
参考文献第87-107页
攻读硕士学位期间的科研成果第107-108页
附录 I 大丽花花瓣和叶片蛋白质的质谱鉴定结果第108-139页
附录 II 大丽花花瓣高温胁迫及外源SA响应相关蛋白的质谱鉴定结果第139-155页
致谢第155-157页

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