| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第15-24页 |
| 1.1 实验材料拟南芥简介 | 第15页 |
| 1.2 植物抗旱的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.1 植物干旱胁迫的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.2 植物抗旱的机制 | 第17页 |
| 1.3 植物抗寒的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.3.1 低温逆境对植物的影响 | 第17-18页 |
| 1.3.2 冷胁迫信号 | 第18-19页 |
| 1.3.3 转录调控 | 第19-20页 |
| 1.4 脯氨酸：一种多功能氨基酸 | 第20-23页 |
| 1.4.1 脯氨酸在植物中的积累 | 第20-21页 |
| 1.4.2 植物中脯氨酸代谢的划分 | 第21-22页 |
| 1.4.3 脯氨酸代谢的调节 | 第22页 |
| 1.4.4 脯氨酸的胁迫耐受和调控功能 | 第22-23页 |
| 1.5 LWT1基因的研究进展与研究意义 | 第23-24页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第24-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第24页 |
| 2.2 主要试剂 | 第24-28页 |
| 2.2.1 常用分子生物学试剂盒 | 第24页 |
| 2.2.2 常用酶类 | 第24页 |
| 2.2.3 常用生化试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.4 常用溶液与试剂的配制 | 第25-28页 |
| 2.3 主要仪器与设备 | 第28-30页 |
| 2.4 实验方法 | 第30-40页 |
| 2.4.1 灭菌方法 | 第30页 |
| 2.4.2 拟南芥的种植和培养 | 第30-31页 |
| 2.4.3 大肠杆菌DH5α菌株感受态的制备过程 | 第31-32页 |
| 2.4.4 农杆菌GV3101感受态的制备 | 第32页 |
| 2.4.5 质粒DNA提取(Kit) | 第32页 |
| 2.4.6 重组载体的构建 | 第32-33页 |
| 2.4.7 植物基因组DNA的提取(CTAB法) | 第33-34页 |
| 2.4.8 基因定量qRT-PCR | 第34-35页 |
| 2.4.9 实验中定量引物 | 第35-36页 |
| 2.4.10 游离脯氨酸的测定方法 | 第36页 |
| 2.4.11 可溶性糖的测定 | 第36-37页 |
| 2.4.12 拟南芥植株的干旱和低温胁迫 | 第37页 |
| 2.4.13 离体植株、叶片失水率的测定 | 第37-38页 |
| 2.4.14 低温胁迫下电导率的测定 | 第38页 |
| 2.4.15 LiAc法小量转化酵母细胞 | 第38-39页 |
| 2.4.16 PDH酶活力测定 | 第39页 |
| 2.4.17 实验数据处理及统计分析 | 第39-40页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第40-59页 |
| 3.1 LWT1基因的表达模式 | 第40-42页 |
| 3.1.1 LWT1基因的组织特异性表达 | 第40-41页 |
| 3.1.2 LWT1基因的低温/干旱诱导表达 | 第41-42页 |
| 3.2 LWT1基因的过量表达 | 第42-45页 |
| 3.2.1 LWT1基因过表达载体构建 | 第42-43页 |
| 3.2.2 LWT1过表达植株的获得 | 第43-45页 |
| 3.3 LWT1过表达植株的表型分析 | 第45-51页 |
| 3.3.1 LWT1过表达植株与WT在正常情况下的表型差异 | 第45-47页 |
| 3.3.2 LWT1过表达植株对干旱胁迫的响应 | 第47-49页 |
| 3.3.3 LWT1过表达植株对低温胁迫的响应 | 第49-51页 |
| 3.4 LWT1过表达植株体内脯氨酸及可溶性糖含量测定 | 第51-53页 |
| 3.4.1 LWT1过表达植株体内可溶性糖含量测定 | 第52页 |
| 3.4.2 LWT1过表达植株体内脯氨酸含量的测定 | 第52-53页 |
| 3.5 LWT1过表达植株中脯氨酸代谢相关基因的表达 | 第53-55页 |
| 3.6 PDH酶活测定 | 第55-56页 |
| 3.7 LWT1和PDH蛋白的相互作用分析 | 第56-59页 |
| 3.7.1 酵母双杂交载体构建 | 第56页 |
| 3.7.2 利用酵母双杂交技术研究LWT1和PDH蛋白的相互作用 | 第56-59页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第59-61页 |
| 4.1 结果与讨论 | 第59-60页 |
| 4.2 后续工作展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
