摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 前言 | 第11-17页 |
1.1 烟酰胺的概述 | 第11-13页 |
1.1.1 烟酰胺简介 | 第11页 |
1.1.2 烟酰胺化学性质 | 第11页 |
1.1.3 烟酸简介 | 第11-12页 |
1.1.4 烟酰胺用途 | 第12页 |
1.1.5 国内外烟酰胺生产及消费状况 | 第12-13页 |
1.2 烟酰胺生产工艺 | 第13-14页 |
1.2.1 化学合成法生产烟酰胺 | 第13页 |
1.2.2 微生物发酵法生产烟酰胺 | 第13-14页 |
1.3 腈水合酶简介 | 第14-15页 |
1.3.1 腈水合酶在微生物界的分布 | 第14-15页 |
1.3.2 腈水合酶的生物调控 | 第15页 |
1.3.3 腈水合酶的反应机理 | 第15页 |
1.4 研究意义 | 第15-16页 |
1.5 研究内容 | 第16-17页 |
1.5.1 高酶活烟酰胺生产菌株的筛选 | 第16页 |
1.5.2 烟酰胺的HPLC检测条件优化。 | 第16页 |
1.5.3 高酶活性烟酰胺生产菌株酶催化反应条件的优化 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-31页 |
2.1 材料 | 第17页 |
2.1.1 菌种 | 第17页 |
2.1.2 培养基 | 第17页 |
2.1.3 主要试剂 | 第17页 |
2.1.4 主要仪器 | 第17页 |
2.2 实验方法 | 第17-31页 |
2.2.1 菌种培养方法 | 第17-18页 |
2.2.2 高酶活菌株的诱变及选育 | 第18-23页 |
2.2.3 HPLC检测烟酰胺条件的优化 | 第23-26页 |
2.2.4 烟酰胺的提取 | 第26页 |
2.2.5 烟酰胺生产过程中酶催化反应条件的优化 | 第26-31页 |
3 结果与讨论 | 第31-57页 |
3.1 腈水合酶高酶活菌株初筛 | 第31-39页 |
3.1.1 ARTP诱变 | 第31-32页 |
3.1.2 微波诱变 | 第32-33页 |
3.1.3 EMS诱变 | 第33-34页 |
3.1.4 复合诱变 | 第34-36页 |
3.1.5 突变菌株遗传稳定性变化 | 第36-37页 |
3.1.6 烟酰胺高产菌株NHD-1 生长曲线的测定 | 第37页 |
3.1.7 生长过程中NHD-1 酶活性的测定 | 第37-38页 |
3.1.8 实验小结 | 第38-39页 |
3.2 烟酰胺的HPLC检测条件优化 | 第39-42页 |
3.2.1 烟酰胺HPLC检测的标准曲线绘制 | 第39页 |
3.2.2 HPLC紫外检测波长的确定 | 第39-40页 |
3.2.3 HPLC流动相流量的确定 | 第40-42页 |
3.2.4 HPLC流动相比例的确定 | 第42页 |
3.2.5 HPLC检测最佳条件 | 第42页 |
3.3 烟酰胺提取 | 第42-43页 |
3.4 腈水合酶参与的酶催化反应条件优化 | 第43-57页 |
3.4.1 菌体浓度的确定 | 第43-44页 |
3.4.2 菌龄的确定 | 第44-45页 |
3.4.3 底物浓度的确定 | 第45-46页 |
3.4.4 温度的确定 | 第46页 |
3.4.5 PH的确定 | 第46-48页 |
3.4.6 最佳反应时间 | 第48-49页 |
3.4.7 烟酰胺浓度对腈水合酶活力的影响 | 第49页 |
3.4.8 响应面法优化烟酰胺生产条件 | 第49-55页 |
3.4.9 实验小结 | 第55-57页 |
4 结论 | 第57-59页 |
5 展望 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
致谢 | 第65-66页 |