| 摘要 | 第2-3页 |
| abstract | 第3-4页 |
| 引言 | 第7-9页 |
| 实验材料与方法 | 第9-17页 |
| 1 实验材料 | 第9-11页 |
| 1.1 细胞株 | 第9页 |
| 1.2 主要试剂和材料 | 第9-10页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第10-11页 |
| 2 实验方法 | 第11-17页 |
| 2.1 索拉非尼耐药的肝癌细胞株的建立 | 第11页 |
| 2.1.1 PLC/PRF/5及PLC/PRF/5耐药株的培养 | 第11页 |
| 2.1.2 PLC/PRF/5及PLC/PRF/5耐药株的冻存与复苏 | 第11页 |
| 2.2 慢病毒转染实验 | 第11页 |
| 2.3 细胞总蛋白质提取实验 | 第11-12页 |
| 2.4 Westernblot | 第12页 |
| 2.5 CCK-8实验 | 第12页 |
| 2.6 染色体免疫共沉淀实验 | 第12-13页 |
| 2.7 RNA提取 | 第13页 |
| 2.8 逆转录和荧光定量PCR | 第13-16页 |
| 2.9 统计学分析 | 第16-17页 |
| 实验结果 | 第17-30页 |
| 1 索拉非尼耐药的肝癌细胞株的建立 | 第17-19页 |
| 2 通过Westernblot检验肝癌的索拉非尼耐药细胞株中MEF2D表达量以及ERK通路的激活情况 | 第19页 |
| 3 在索拉非尼敏感的肝癌细胞中上调MEF2D的表达后,通过Westernblot和CCK-8实验分别检测肝癌细胞的ERK、MEK蛋白表达量和对索拉非尼的耐药性变化 | 第19-23页 |
| 4 在索拉非尼耐药的肝癌细胞株中下调MEF2D后,通过Westernblot和CCK-实验分别检测肝癌耐药细胞的ERK、MEK的蛋白表达水平和对索拉非尼的耐药性变化 | 第23-25页 |
| 5 染色体免疫共沉淀实验检验MEF2D与SPRY4的关系 | 第25-26页 |
| 6 在索拉非尼敏感的肝癌细胞株中上调MEF2D后,通过RT-PCR和Westernblot检测SPRY4表达变化 | 第26-27页 |
| 7 沉默索拉非尼耐药细胞株中MEF2D后,通过RT-PCR和Westernblot检测SPRY4表达变化 | 第27-30页 |
| 讨论 | 第30-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-37页 |
| 综述 | 第37-55页 |
| 综述参考文献 | 第45-55页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第55-56页 |
| 缩略词表 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
