致谢 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-18页 |
1.1 温光对植物开花的调控作用 | 第10-11页 |
1.1.1 光周期调控作用 | 第10-11页 |
1.1.2 春化调控作用 | 第11页 |
1.2 植物春化作用的生理生化研究 | 第11-12页 |
1.2.1 碳水化合物代谢变化 | 第12页 |
1.2.2 核酸代谢变化 | 第12页 |
1.2.3 蛋白质代谢变化 | 第12页 |
1.3 春化作用的分子调控机制研究 | 第12-18页 |
1.3.1 模式植物拟南芥调控春化作用的相关基因 | 第12-14页 |
1.3.2 小麦中调控春化作用的相关基因 | 第14-16页 |
1.3.2.1 小麦中的开花促进基因VRN1 | 第14页 |
1.3.2.2 小麦中的开花抑制基因VRN2 | 第14-15页 |
1.3.2.3 小麦开花促进因子VRN3 | 第15-16页 |
1.3.2.4 小麦春化基因VRN4 | 第16页 |
1.3.3 小麦春化基因互作调控模式 | 第16-18页 |
2 引言 | 第18-19页 |
3 材料与方法 | 第19-28页 |
3.1 材料 | 第19-20页 |
3.1.1 试验材料 | 第19页 |
3.1.2 菌株与质粒载体 | 第19页 |
3.1.3 分子生物学试剂及仪器 | 第19页 |
3.1.4 PCR引物 | 第19-20页 |
3.2 试验方法 | 第20-28页 |
3.2.1 试验材料处理 | 第20页 |
3.2.1.1 基因克隆用试验材料的处理 | 第20页 |
3.2.1.2 RACE克隆试验材料准备 | 第20页 |
3.2.1.3 表达分析试验材料处理 | 第20页 |
3.2.2 DNA的提取及质量检测 | 第20-21页 |
3.2.3 RNA的提取、纯化和反转录 | 第21-22页 |
3.2.3.1 RNA的提取和纯化 | 第21-22页 |
3.2.3.2 cDNA第一链的合成 | 第22页 |
3.2.4 目的基因基因组序列扩增 | 第22-24页 |
3.2.4.1 基因的PCR扩增 | 第22-23页 |
3.2.4.2 PCR产物的回收 | 第23页 |
3.2.4.3 回收产物与克隆载体的连接 | 第23-24页 |
3.2.4.4 重组载体的转化 | 第24页 |
3.2.4.5 阳性克隆的筛选、鉴定及测序 | 第24页 |
3.2.5 VRN3基因的c DNA RACE扩增 | 第24-26页 |
3.2.5.1 RACE用c DNA第一条链的合成 | 第24-25页 |
3.2.5.2 目的基因的 5’RACE和 3’RACE克隆 | 第25-26页 |
3.2.6 普通小麦VRN3基因的表达特性分析 | 第26页 |
3.2.6.1 VRN3与VRN1、VRN2基因在小麦生长发育过程中的表达特性分析 | 第26页 |
3.2.6.2 小麦VRN-B3、VRN-D3及VRN3总体表达分析 | 第26页 |
3.2.7 VRN3基因启动子区的扩增 | 第26-28页 |
4 结果与分析 | 第28-41页 |
4.1 小麦VRN3基因CDNA部分序列的扩增和比对 | 第28-29页 |
4.2 小麦VRN33 个部分同源基因基因组序列扩增和比对 | 第29-31页 |
4.2.1 小麦VRN3基因A,B,D基因组的序列比对和分析 | 第29-31页 |
4.2.2 不同小麦品种VRN3基因A基因组序列分析 | 第31页 |
4.2.3 不同小麦品种VRN3基因B基因组序列分析 | 第31页 |
4.2.4 不同小麦品种VRN3基因D基因组序列分析 | 第31页 |
4.3 小麦VRN33 个部分同源基因CDNA的RACE扩增和序列比对 | 第31-32页 |
4.4 不同春化特性品种VRN-B3和VRN-D3 CDNA序列的扩增和序列比对 | 第32-34页 |
4.5 VRN3蛋白的氨基酸序列分析 | 第34-35页 |
4.5.1 辽春10号VRN-A3、VRN-B3和VRN-D3氨基酸序列比对分析 | 第34页 |
4.5.2 不同品种VRN3基因的氨基酸序列比对 | 第34-35页 |
4.6 VRN3基因的表达特性分析 | 第35-38页 |
4.6.1 不同小麦品种VRN3、VRN1和VRN2的表达特性分析 | 第35页 |
4.6.2 小麦VRN3两个部分同源基因的表达分析 | 第35-38页 |
4.7 VRN3基因启动子区序列的扩增 | 第38-41页 |
4.7.1 辽春10号VRN-B3和VRN-D3启动子区序列的site-finding PCR扩增 | 第38页 |
4.7.2 不同品种VRN-B3启动子区序列的PCR特异性扩增及比对 | 第38-41页 |
5 结论与讨论 | 第41-44页 |
5.1 普通小麦VRN3基因的序列分析 | 第41-42页 |
5.2 小麦春化基因VRN3表达特性分析 | 第42-43页 |
5.3 VRN3基因启动子序列特征分析 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
ABSTRACT | 第49-51页 |