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普通小麦春化基因VRN3的克隆及表达特性分析

致谢第4-8页
摘要第8-10页
1 文献综述第10-18页
    1.1 温光对植物开花的调控作用第10-11页
        1.1.1 光周期调控作用第10-11页
        1.1.2 春化调控作用第11页
    1.2 植物春化作用的生理生化研究第11-12页
        1.2.1 碳水化合物代谢变化第12页
        1.2.2 核酸代谢变化第12页
        1.2.3 蛋白质代谢变化第12页
    1.3 春化作用的分子调控机制研究第12-18页
        1.3.1 模式植物拟南芥调控春化作用的相关基因第12-14页
        1.3.2 小麦中调控春化作用的相关基因第14-16页
            1.3.2.1 小麦中的开花促进基因VRN1第14页
            1.3.2.2 小麦中的开花抑制基因VRN2第14-15页
            1.3.2.3 小麦开花促进因子VRN3第15-16页
            1.3.2.4 小麦春化基因VRN4第16页
        1.3.3 小麦春化基因互作调控模式第16-18页
2 引言第18-19页
3 材料与方法第19-28页
    3.1 材料第19-20页
        3.1.1 试验材料第19页
        3.1.2 菌株与质粒载体第19页
        3.1.3 分子生物学试剂及仪器第19页
        3.1.4 PCR引物第19-20页
    3.2 试验方法第20-28页
        3.2.1 试验材料处理第20页
            3.2.1.1 基因克隆用试验材料的处理第20页
            3.2.1.2 RACE克隆试验材料准备第20页
            3.2.1.3 表达分析试验材料处理第20页
        3.2.2 DNA的提取及质量检测第20-21页
        3.2.3 RNA的提取、纯化和反转录第21-22页
            3.2.3.1 RNA的提取和纯化第21-22页
            3.2.3.2 cDNA第一链的合成第22页
        3.2.4 目的基因基因组序列扩增第22-24页
            3.2.4.1 基因的PCR扩增第22-23页
            3.2.4.2 PCR产物的回收第23页
            3.2.4.3 回收产物与克隆载体的连接第23-24页
            3.2.4.4 重组载体的转化第24页
            3.2.4.5 阳性克隆的筛选、鉴定及测序第24页
        3.2.5 VRN3基因的c DNA RACE扩增第24-26页
            3.2.5.1 RACE用c DNA第一条链的合成第24-25页
            3.2.5.2 目的基因的 5’RACE和 3’RACE克隆第25-26页
        3.2.6 普通小麦VRN3基因的表达特性分析第26页
            3.2.6.1 VRN3与VRN1、VRN2基因在小麦生长发育过程中的表达特性分析第26页
            3.2.6.2 小麦VRN-B3、VRN-D3及VRN3总体表达分析第26页
        3.2.7 VRN3基因启动子区的扩增第26-28页
4 结果与分析第28-41页
    4.1 小麦VRN3基因CDNA部分序列的扩增和比对第28-29页
    4.2 小麦VRN33 个部分同源基因基因组序列扩增和比对第29-31页
        4.2.1 小麦VRN3基因A,B,D基因组的序列比对和分析第29-31页
        4.2.2 不同小麦品种VRN3基因A基因组序列分析第31页
        4.2.3 不同小麦品种VRN3基因B基因组序列分析第31页
        4.2.4 不同小麦品种VRN3基因D基因组序列分析第31页
    4.3 小麦VRN33 个部分同源基因CDNA的RACE扩增和序列比对第31-32页
    4.4 不同春化特性品种VRN-B3和VRN-D3 CDNA序列的扩增和序列比对第32-34页
    4.5 VRN3蛋白的氨基酸序列分析第34-35页
        4.5.1 辽春10号VRN-A3、VRN-B3和VRN-D3氨基酸序列比对分析第34页
        4.5.2 不同品种VRN3基因的氨基酸序列比对第34-35页
    4.6 VRN3基因的表达特性分析第35-38页
        4.6.1 不同小麦品种VRN3、VRN1和VRN2的表达特性分析第35页
        4.6.2 小麦VRN3两个部分同源基因的表达分析第35-38页
    4.7 VRN3基因启动子区序列的扩增第38-41页
        4.7.1 辽春10号VRN-B3和VRN-D3启动子区序列的site-finding PCR扩增第38页
        4.7.2 不同品种VRN-B3启动子区序列的PCR特异性扩增及比对第38-41页
5 结论与讨论第41-44页
    5.1 普通小麦VRN3基因的序列分析第41-42页
    5.2 小麦春化基因VRN3表达特性分析第42-43页
    5.3 VRN3基因启动子序列特征分析第43-44页
参考文献第44-49页
ABSTRACT第49-51页

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