| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-22页 |
| 1.1 高血压 | 第14页 |
| 1.2 高血压发病机理 | 第14页 |
| 1.3 高血压模型研究现状 | 第14-15页 |
| 1.4 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) | 第15-16页 |
| 1.4.1 血管内皮细胞与高血压关系 | 第15-16页 |
| 1.4.2 HUVEC特点 | 第16页 |
| 1.5 模型诱导剂的选择 | 第16-18页 |
| 1.5.1 Ang Ⅰ | 第17页 |
| 1.5.2 Ang Ⅱ | 第17页 |
| 1.5.3 H_2O_2 | 第17-18页 |
| 1.6 芹菜 | 第18-19页 |
| 1.6.1 芹菜黄酮 | 第18-19页 |
| 1.6.2 芹菜黄酮功能 | 第19页 |
| 1.7 芹菜黄酮与PI3K/Akt及NADPH信号通路作用 | 第19-20页 |
| 1.8 研究目的与内容 | 第20-22页 |
| 1.8.1 研究目的与意义 | 第20页 |
| 1.8.2 主要研究内容 | 第20-22页 |
| 第二章 人脐静脉内皮细胞高血压损伤模型的建立 | 第22-49页 |
| 2.1 试验材料、试剂与仪器 | 第22-24页 |
| 2.1.1 试验材料和试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-28页 |
| 2.2.1 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养 | 第24页 |
| 2.2.2 内皮损伤模型分组及处理 | 第24页 |
| 2.2.3 倒置相差显微镜观察细胞形态 | 第24页 |
| 2.2.4 细胞活性测定 | 第24页 |
| 2.2.5 细胞培养液处理 | 第24-25页 |
| 2.2.6 细胞内容物提取 | 第25页 |
| 2.2.7 总蛋白含量测定 | 第25-26页 |
| 2.2.8 细胞内丙二醛(MDA)含量测定 | 第26页 |
| 2.2.9 细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第26页 |
| 2.2.10 NO的释放测定 | 第26页 |
| 2.2.11 一氧化氮合酶(NOS)的活性测定 | 第26-27页 |
| 2.2.12 内皮素-1(ET-1)测定 | 第27页 |
| 2.2.13 数据分析 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第28-48页 |
| 2.3.1 各模型组细胞形态 | 第28-29页 |
| 2.3.2 各模型组细胞活性变化 | 第29-30页 |
| 2.3.3 模型细胞蛋白标准曲线 | 第30-31页 |
| 2.3.4 诱导时间对模型细胞MDA生成影响 | 第31-33页 |
| 2.3.5 不同诱导剂对模型细胞MDA生成影响 | 第33-34页 |
| 2.3.6 诱导时间对模型细胞SOD活力影响 | 第34-36页 |
| 2.3.7 不同诱导剂对模型细胞SOD活力影响 | 第36-37页 |
| 2.3.8 诱导时间对模型细胞NO释放影响 | 第37-39页 |
| 2.3.9 不同诱导剂对模型细胞NO释放影响 | 第39-41页 |
| 2.3.10 诱导时间对模型细胞NOS影响 | 第41-43页 |
| 2.3.11 诱导时间对模型细胞ET-1释放影响 | 第43-46页 |
| 2.3.12 不同诱导剂对模型细胞ET-1释放影响 | 第46-48页 |
| 2.4 结论 | 第48-49页 |
| 第三章 芹菜苷对HUVEC高血压损伤模型的修复 | 第49-63页 |
| 3.1 试验材料、试剂与仪器 | 第49-50页 |
| 3.1.1 试验材料和试剂 | 第49页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第49-50页 |
| 3.2 试验方法 | 第50-51页 |
| 3.2.1 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养 | 第50页 |
| 3.2.2 芹菜苷处理分组 | 第50页 |
| 3.2.3 倒置相差显微镜观察细胞形态 | 第50-51页 |
| 3.2.4 细胞活性测定 | 第51页 |
| 3.2.5 细胞培养液处理 | 第51页 |
| 3.2.6 细胞内容物提取 | 第51页 |
| 3.2.7 总蛋白含量测定 | 第51页 |
| 3.2.8 细胞内丙二醛(MDA)含量测定 | 第51页 |
| 3.2.9 细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第51页 |
| 3.2.10 NO的释放测定 | 第51页 |
| 3.2.11 一氧化氮合酶(NOS)的活性测定 | 第51页 |
| 3.2.12 内皮素-1(ET-1)测定 | 第51页 |
| 3.2.13 数据分析 | 第51页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第51-62页 |
| 3.3.1 芹菜苷对HUVEC高血压损伤模型细胞形态的影响 | 第51-53页 |
| 3.3.2 芹菜苷对损伤模型细胞活性的影响 | 第53页 |
| 3.3.3 不同浓度芹菜苷对模型细胞MDA生成影响 | 第53-54页 |
| 3.3.4 不同浓度芹菜苷对模型细胞SOD活力影响 | 第54-55页 |
| 3.3.5 不同浓度芹菜苷对损伤模型NO释放和NOS活力的影响 | 第55-56页 |
| 3.3.6 不同浓度芹菜苷对损伤模型ET-1释放的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.7 不同时间点芹菜苷对模型细胞MDA生成影响 | 第57-58页 |
| 3.3.8 不同时间点芹菜苷对模型细胞SOD活力影响 | 第58-59页 |
| 3.3.9 不同时间点芹菜苷对模型细胞NO释放和NOS活力的影响 | 第59-61页 |
| 3.3.10 不同时间点芹菜苷对模型细胞ET-1生成影响 | 第61-62页 |
| 3.4 结论 | 第62-63页 |
| 第四章 芹菜苷对HUVEC损伤模型中PI3K/Akt和NADPH信号通路的作用 | 第63-80页 |
| 4.1 试验材料、试剂与仪器 | 第63-65页 |
| 4.1.1 试验材料和试剂 | 第63-64页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第64-65页 |
| 4.2 试验方法 | 第65-72页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第65页 |
| 4.2.2 分组及处理 | 第65-66页 |
| 4.2.3 RT-PCR测定Akt、p47phox、eNOS的mRNA | 第66页 |
| 4.2.4 总RNA提取 | 第66-67页 |
| 4.2.5 逆转录cDNA合成 | 第67页 |
| 4.2.6 PCR扩增目的片段 | 第67-68页 |
| 4.2.7 Western Blot测定p-Akt、p47phox、eNOS和p-eNOS的蛋白表达 | 第68-69页 |
| 4.2.8 细胞总蛋白的提取 | 第69页 |
| 4.2.9 细胞总蛋白含量测定 | 第69-70页 |
| 4.2.10 SDS-PAGE蛋白电泳 | 第70页 |
| 4.2.11 转印 | 第70-71页 |
| 4.2.12 免疫反应 | 第71页 |
| 4.2.13 凝胶图像分析 | 第71页 |
| 4.2.14 NO的释放测定 | 第71页 |
| 4.2.15 内皮素-1(ET-1)测定 | 第71-72页 |
| 4.2.16 数据分析 | 第72页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第72-78页 |
| 4.3.1 芹菜苷对Akt表达的影响 | 第72-74页 |
| 4.3.2 芹菜苷对p47phox表达的影响 | 第74-75页 |
| 4.3.3 芹菜苷对eNOS表达的影响 | 第75-77页 |
| 4.3.4 芹菜苷对NO和ET-1释放的影响 | 第77-78页 |
| 4.4 结论 | 第78-80页 |
| 第五章 主要结论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 攻读期间的研究成果 | 第89-90页 |
