| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-31页 |
| 第一节 干细胞及其研究进展 | 第15-19页 |
| 1.1.1 干细胞的分化潜能 | 第15页 |
| 1.1.2 干细胞的分类及特征 | 第15-16页 |
| 1.1.3 干细胞的研究进展 | 第16-19页 |
| 第二节 维持干细胞多能性重要转录因子 | 第19-29页 |
| 1.2.1 干细胞多能性核心调控网络 | 第19-20页 |
| 1.2.2 转录因子 Oct4 | 第20-24页 |
| 1.2.3 转录因子 Nanog | 第24-27页 |
| 1.2.4 转录因子 Sox2 | 第27-29页 |
| 第三节 本研究的目的意义与实验设计 | 第29-31页 |
| 第二章 牙鲆（Paralichthysolivaceus）多能性转录因子 Oct4 的克隆与分析 | 第31-81页 |
| 2.1 引言 | 第31页 |
| 2.2 材料与方法 | 第31-55页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第31-34页 |
| 2.2.2 牙鲆基因组 DNA 及总 RNA 的提取 | 第34-37页 |
| 2.2.3 牙鲆 cDNA 第一链的合成 | 第37-39页 |
| 2.2.4 牙鲆 Oct4 cDNA 及 DNA 全长的获得 | 第39-42页 |
| 2.2.5 牙鲆 Oct4 启动子区序列的获得及分析 | 第42-44页 |
| 2.2.6 牙鲆 Oct4 启动子区 CpG 位点甲基化分析 | 第44-46页 |
| 2.2.7 牙鲆 Oct4 时空表达的 RT-PCR 分析 | 第46-48页 |
| 2.2.8 牙鲆 Oct4 时空表达的原位杂交分析 | 第48-52页 |
| 2.2.9 牙鲆 Oct4 重组蛋白的体外表达与纯化 | 第52-54页 |
| 2.2.10 牙鲆 Oct4 在性腺组织中的细胞定位情况分析 | 第54-55页 |
| 2.3 结果 | 第55-77页 |
| 2.3.1 牙鲆 Oct4 cDNA 及 DNA 全长序列特征 | 第55-58页 |
| 2.3.2 牙鲆 Oct4 氨基酸序列同源性及系统进化分析 | 第58-62页 |
| 2.3.3 牙鲆 Oct4 蛋白质 POU 结构域三维结构预测 | 第62-63页 |
| 2.3.4 牙鲆 Oct4 基因结构及染色体同线性分析 | 第63-64页 |
| 2.3.5 牙鲆 Oct4 基因启动子序列克隆及调控序列的生物信息学分析 | 第64-69页 |
| 2.3.6 牙鲆 Oct4 基因启动子区 CpG 位点甲基化情况分析 | 第69-71页 |
| 2.3.7 牙鲆 Oct4 基因时空表达的 RT-PCR 分析 | 第71-73页 |
| 2.3.8 牙鲆 Oct4 基因时空表达的原位杂交分析 | 第73-74页 |
| 2.3.9 牙鲆 Oct4 重组蛋白的原核表达与纯化 | 第74-75页 |
| 2.3.10 牙鲆 Oct4 重组蛋白在性腺中的细胞定位 | 第75-77页 |
| 2.4 讨论 | 第77-81页 |
| 第三章 牙鲆（Paralichthys olivaceus）多能性转录因子 Nanog 的克隆与分析 | 第81-105页 |
| 3.1 引言 | 第81页 |
| 3.2 材料和方法 | 第81-84页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第81-82页 |
| 3.2.2 牙鲆 Nanog cDNA 及 DNA 全长的获得 | 第82-83页 |
| 3.2.3 牙鲆 Nanog 启动子区序列的获得及分析 | 第83页 |
| 3.2.4 牙鲆 Nanog 启动子区 CpG 位点甲基化分析 | 第83-84页 |
| 3.2.5 牙鲆 Nanog 时空表达的 RT-PCR 分析 | 第84页 |
| 3.2.6 牙鲆 Nanog 时空表达的原位杂交分析 | 第84页 |
| 3.2.7 牙鲆 Nanog 融合蛋白的体外表达与纯化 | 第84页 |
| 3.3 结果 | 第84-100页 |
| 3.3.1 牙鲆 Nanog cDNA 及 DNA 全长序列特征 | 第84-86页 |
| 3.3.2 牙鲆 Nanog 氨基酸序列同源性及系统进化分析 | 第86-88页 |
| 3.3.3 牙鲆 Nanog 蛋白质 HD 结构域三维结构预测 | 第88-89页 |
| 3.3.4 牙鲆 Nanog 基因结构及染色体同线性分析 | 第89-90页 |
| 3.3.5 牙鲆 Nanog 基因启动子序列的克隆及生物信息学分析 | 第90-94页 |
| 3.3.6 牙鲆 Nanog 基因启动子区 CpG 位点甲基化情况分析 | 第94-96页 |
| 3.3.7 牙鲆 Nanog 基因时空表达的 RT-PCR 分析 | 第96-97页 |
| 3.3.8 牙鲆 Nanog 基因时空表达的原位杂交分析 | 第97-99页 |
| 3.3.9 牙鲆 Nanog 重组蛋白的原核表达与纯化 | 第99-100页 |
| 3.4 讨论 | 第100-105页 |
| 第四章 牙鲆（Paralichthysolivaceus）多能性转录因子 Sox2 的克隆与分析 | 第105-126页 |
| 4.1 引言 | 第105页 |
| 4.2 材料和方法 | 第105-108页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第105-106页 |
| 4.2.2 牙鲆 Sox2 cDNA 全长的获得 | 第106-107页 |
| 4.2.3 牙鲆 Sox2 启动子区序列的获得及分析 | 第107页 |
| 4.2.4 牙鲆 Sox2 启动子区 CpG 位点甲基化分析 | 第107-108页 |
| 4.2.5 牙鲆 Sox2 时空表达的 RT-PCR 分析 | 第108页 |
| 4.2.6 牙鲆 Sox2 时空表达的原位杂交分析 | 第108页 |
| 4.2.7 牙鲆 Sox2 融合蛋白的体外表达与纯化 | 第108页 |
| 4.3 结果 | 第108-123页 |
| 4.3.1 牙鲆 Sox2 cDNA 全长序列特征 | 第108-110页 |
| 4.3.2 牙鲆 Sox2 氨基酸序列同源性及系统进化分析 | 第110-113页 |
| 4.3.3 牙鲆 Sox2 蛋白质 HMG 结构域三维结构预测 | 第113页 |
| 4.3.4 牙鲆 Sox2 基因启动子序列克隆及调控序列的生物信息学分析 | 第113-117页 |
| 4.3.5 牙鲆 Sox2 基因启动子区 CpG 位点甲基化情况分析 | 第117-119页 |
| 4.3.6 牙鲆 Sox2 基因时空表达的 RT-PCR 分析 | 第119-121页 |
| 4.3.7 牙鲆 Sox2 基因时空表达的原位杂交分析 | 第121-122页 |
| 4.3.8 牙鲆 Sox2 重组蛋白的原核表达 | 第122-123页 |
| 4.4 讨论 | 第123-126页 |
| 附录 | 第126-128页 |
| 参考文献 | 第128-147页 |
| 个人简历 | 第147-148页 |
| 发表的学术论文 | 第148-150页 |
| 致谢 | 第150-151页 |
