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蜜蜂以色列急性麻痹病毒的分子检测、流行传播及其对蜜蜂行为的影响

目录第7-11页
摘要第11-14页
Abstract第14-17页
第1章 文献综述第18-39页
    1.1 蜜蜂健康及其主要影响因素的研究概述第18-26页
        1.1.1 大蜂螨第19-20页
        1.1.2 病毒第20-23页
        1.1.3 蜜蜂微孢子虫第23-24页
        1.1.4 真菌第24-25页
        1.1.5 杀虫剂第25-26页
        1.1.6 营养不良第26页
    1.2 蜜蜂的免疫第26-29页
        1.2.1 社会性免疫第27-28页
        1.2.2 个体免疫第28-29页
    1.3 蜜蜂以色列急性麻痹病毒(IAPV)的研究进展第29-32页
        1.3.1 IAPV与CCD的相关性第29页
        1.3.2 IAPV的分子生物学特征第29-30页
        1.3.3 IAPV非结构性多聚蛋白编码特征第30页
        1.3.4 IAPV结构性多聚蛋白编码特征第30-31页
        1.3.5 IAPV的分类学特征第31页
        1.3.6 IAPV的致病机理及预防机制第31-32页
    1.4 基于伸吻反应(PER)的蜜蜂行为研究第32-35页
        1.4.1 对蔗糖溶液刺激的应答性第32-33页
        1.4.2 基于PER的两种学习模式第33-34页
        1.4.3 影响蜜蜂PER行为的因素第34-35页
    1.5 蜜蜂归巢能力的研究第35-36页
    1.6 研究意义与主要研究内容第36-39页
        1.6.1 研究意义第36-37页
        1.6.2 主要研究内容第37-39页
第2章 浙江省蜜蜂病毒的检测及蜂群健康的调查分析第39-55页
    2.1 实验材料与方法第39-42页
        2.1.1 主要试剂及仪器第39页
        2.1.2 样品的采集第39-40页
        2.1.3 RNA的提取第40页
        2.1.4 逆转录反应,第一链cDNA的合成第40-41页
        2.1.5 PCR检测常见六种蜜蜂病毒第41页
        2.1.6 琼脂糖凝胶电泳第41-42页
        2.1.7 中、意蜂蜂群健康调查第42页
        2.1.8 中、意蜂头部基因表达谱差异分析第42页
    2.2 实验结果第42-53页
        2.2.1 六种蜜蜂病毒的检测结果及其组织嗜性分析第42-47页
        2.2.2 意大利蜜蜂、中华蜜蜂免疫相关基因的差异表达分析第47-53页
    2.3 讨论第53-55页
第3章 蜜蜂以色列急性麻痹病毒新传播载体的发现第55-72页
    3.1 实验材料与方法第55-62页
        3.1.1 主要试剂及仪器第55页
        3.1.2 MY-20培养基的配制方法第55-56页
        3.1.3 蜜蜂球囊菌的培养方法第56页
        3.1.4 蜜蜂球囊菌DNA的提取第56-57页
        3.1.5 通过PCR对球囊菌进一步确认第57-58页
        3.1.6 菌丝总RNA的抽提第58页
        3.1.7 第一链cDNA的合成,用于病毒正义链的检测第58页
        3.1.8 常见七种蜜蜂病毒的检测第58-60页
        3.1.9 PCR产物纯化第60页
        3.1.10 第一链cDNA的合成,用于病毒反义链的检测第60-61页
        3.1.11 PCR检测蜜蜂病毒反义链第61-62页
    3.2 实验结果第62-70页
        3.2.1 蜜蜂球囊菌中蜜蜂病毒的检测第62页
        3.2.2 蜜蜂球囊菌的检测第62-64页
        3.2.3 蜜蜂球囊菌中蜜蜂病毒反义链的检测第64-65页
        3.2.4 蜜蜂病毒的系统进化树分析第65-70页
    3.3 讨论第70-72页
第4章 蜜蜂以色列急性麻痹病毒对蜜蜂行为的影响第72-94页
    4.1 实验材料与方法第72-81页
        4.1.1 主要试剂及仪器第72-73页
        4.1.2 健康蜂群的筛选及采集蜂的抓取第73页
        4.1.3 IAPV的分离第73-74页
        4.1.4 蜜蜂蔗糖反应性行为实验第74-75页
        4.1.5 蜜蜂致敏化反应行为实验第75页
        4.1.6 蜜蜂习惯化反应行为实验第75页
        4.1.7 绝对定量qPCR反应中蜜蜂病毒IAPV标准曲线的绘制第75-77页
        4.1.8 RT-PCR及qPCR检测IAPV第77-78页
        4.1.9 蜜蜂存活率分析第78-79页
        4.1.10 归巢行为实验第79-81页
        4.1.11 数据分析第81页
    4.2 实验结果第81-91页
        4.2.1 IAPV对蜜蜂蔗糖反应性的影响第81-83页
        4.2.2 IAPV对蜜蜂致敏化反应的影响第83-84页
        4.2.3 IAPV对蜜蜂习惯化反应的影响第84-85页
        4.2.4 病毒的检测及头部病毒qPCR分析第85-88页
        4.2.5 被IAPV感染蜜蜂与对照组蜜蜂存活率分析第88-89页
        4.2.6 IAPV对蜜蜂归巢能力的影响第89-91页
    4.3 讨论第91-94页
第5章 蜜蜂以色列急性麻痹病毒、东方蜜蜂微孢子虫及瓦螨交互关系的初步研究第94-107页
    5.1 实验材料与方法第94-100页
        5.1.1 主要试剂及仪器第94-95页
        5.1.2 蜜蜂微孢子虫(Nosema spp.)的分离第95页
        5.1.3 蜜蜂微孢子虫计数第95-96页
        5.1.4 蜜蜂微孢子虫种的鉴定第96页
        5.1.5 蜂螨的收集第96页
        5.1.6 蜂螨、微孢子虫对蜜蜂的侵染实验第96-97页
        5.1.7 RNA的提取第97页
        5.1.8 cDNA合成第97-99页
        5.1.9 qPCR检测IAPV及免疫基因第99页
        5.1.10 qPCR扩增效率第99-100页
    5.2 实验结果第100-106页
        5.2.1 qPCR扩增效率的验证第100-102页
        5.2.2 IAPV及相关差异表达基因的分析第102-106页
    5.3 讨论第106-107页
第6章 主要结论、创新及后续研究展望第107-111页
    6.1 主要结论第107-108页
    6.2 本论文的创新点、不足之处及研究展望第108-111页
参考文献第111-129页
博士期间发表的论文第129-130页
国际交流及会议第130-131页
致谢第131页

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