目录 | 第7-11页 |
摘要 | 第11-14页 |
Abstract | 第14-17页 |
第1章 文献综述 | 第18-39页 |
1.1 蜜蜂健康及其主要影响因素的研究概述 | 第18-26页 |
1.1.1 大蜂螨 | 第19-20页 |
1.1.2 病毒 | 第20-23页 |
1.1.3 蜜蜂微孢子虫 | 第23-24页 |
1.1.4 真菌 | 第24-25页 |
1.1.5 杀虫剂 | 第25-26页 |
1.1.6 营养不良 | 第26页 |
1.2 蜜蜂的免疫 | 第26-29页 |
1.2.1 社会性免疫 | 第27-28页 |
1.2.2 个体免疫 | 第28-29页 |
1.3 蜜蜂以色列急性麻痹病毒(IAPV)的研究进展 | 第29-32页 |
1.3.1 IAPV与CCD的相关性 | 第29页 |
1.3.2 IAPV的分子生物学特征 | 第29-30页 |
1.3.3 IAPV非结构性多聚蛋白编码特征 | 第30页 |
1.3.4 IAPV结构性多聚蛋白编码特征 | 第30-31页 |
1.3.5 IAPV的分类学特征 | 第31页 |
1.3.6 IAPV的致病机理及预防机制 | 第31-32页 |
1.4 基于伸吻反应(PER)的蜜蜂行为研究 | 第32-35页 |
1.4.1 对蔗糖溶液刺激的应答性 | 第32-33页 |
1.4.2 基于PER的两种学习模式 | 第33-34页 |
1.4.3 影响蜜蜂PER行为的因素 | 第34-35页 |
1.5 蜜蜂归巢能力的研究 | 第35-36页 |
1.6 研究意义与主要研究内容 | 第36-39页 |
1.6.1 研究意义 | 第36-37页 |
1.6.2 主要研究内容 | 第37-39页 |
第2章 浙江省蜜蜂病毒的检测及蜂群健康的调查分析 | 第39-55页 |
2.1 实验材料与方法 | 第39-42页 |
2.1.1 主要试剂及仪器 | 第39页 |
2.1.2 样品的采集 | 第39-40页 |
2.1.3 RNA的提取 | 第40页 |
2.1.4 逆转录反应,第一链cDNA的合成 | 第40-41页 |
2.1.5 PCR检测常见六种蜜蜂病毒 | 第41页 |
2.1.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第41-42页 |
2.1.7 中、意蜂蜂群健康调查 | 第42页 |
2.1.8 中、意蜂头部基因表达谱差异分析 | 第42页 |
2.2 实验结果 | 第42-53页 |
2.2.1 六种蜜蜂病毒的检测结果及其组织嗜性分析 | 第42-47页 |
2.2.2 意大利蜜蜂、中华蜜蜂免疫相关基因的差异表达分析 | 第47-53页 |
2.3 讨论 | 第53-55页 |
第3章 蜜蜂以色列急性麻痹病毒新传播载体的发现 | 第55-72页 |
3.1 实验材料与方法 | 第55-62页 |
3.1.1 主要试剂及仪器 | 第55页 |
3.1.2 MY-20培养基的配制方法 | 第55-56页 |
3.1.3 蜜蜂球囊菌的培养方法 | 第56页 |
3.1.4 蜜蜂球囊菌DNA的提取 | 第56-57页 |
3.1.5 通过PCR对球囊菌进一步确认 | 第57-58页 |
3.1.6 菌丝总RNA的抽提 | 第58页 |
3.1.7 第一链cDNA的合成,用于病毒正义链的检测 | 第58页 |
3.1.8 常见七种蜜蜂病毒的检测 | 第58-60页 |
3.1.9 PCR产物纯化 | 第60页 |
3.1.10 第一链cDNA的合成,用于病毒反义链的检测 | 第60-61页 |
3.1.11 PCR检测蜜蜂病毒反义链 | 第61-62页 |
3.2 实验结果 | 第62-70页 |
3.2.1 蜜蜂球囊菌中蜜蜂病毒的检测 | 第62页 |
3.2.2 蜜蜂球囊菌的检测 | 第62-64页 |
3.2.3 蜜蜂球囊菌中蜜蜂病毒反义链的检测 | 第64-65页 |
3.2.4 蜜蜂病毒的系统进化树分析 | 第65-70页 |
3.3 讨论 | 第70-72页 |
第4章 蜜蜂以色列急性麻痹病毒对蜜蜂行为的影响 | 第72-94页 |
4.1 实验材料与方法 | 第72-81页 |
4.1.1 主要试剂及仪器 | 第72-73页 |
4.1.2 健康蜂群的筛选及采集蜂的抓取 | 第73页 |
4.1.3 IAPV的分离 | 第73-74页 |
4.1.4 蜜蜂蔗糖反应性行为实验 | 第74-75页 |
4.1.5 蜜蜂致敏化反应行为实验 | 第75页 |
4.1.6 蜜蜂习惯化反应行为实验 | 第75页 |
4.1.7 绝对定量qPCR反应中蜜蜂病毒IAPV标准曲线的绘制 | 第75-77页 |
4.1.8 RT-PCR及qPCR检测IAPV | 第77-78页 |
4.1.9 蜜蜂存活率分析 | 第78-79页 |
4.1.10 归巢行为实验 | 第79-81页 |
4.1.11 数据分析 | 第81页 |
4.2 实验结果 | 第81-91页 |
4.2.1 IAPV对蜜蜂蔗糖反应性的影响 | 第81-83页 |
4.2.2 IAPV对蜜蜂致敏化反应的影响 | 第83-84页 |
4.2.3 IAPV对蜜蜂习惯化反应的影响 | 第84-85页 |
4.2.4 病毒的检测及头部病毒qPCR分析 | 第85-88页 |
4.2.5 被IAPV感染蜜蜂与对照组蜜蜂存活率分析 | 第88-89页 |
4.2.6 IAPV对蜜蜂归巢能力的影响 | 第89-91页 |
4.3 讨论 | 第91-94页 |
第5章 蜜蜂以色列急性麻痹病毒、东方蜜蜂微孢子虫及瓦螨交互关系的初步研究 | 第94-107页 |
5.1 实验材料与方法 | 第94-100页 |
5.1.1 主要试剂及仪器 | 第94-95页 |
5.1.2 蜜蜂微孢子虫(Nosema spp.)的分离 | 第95页 |
5.1.3 蜜蜂微孢子虫计数 | 第95-96页 |
5.1.4 蜜蜂微孢子虫种的鉴定 | 第96页 |
5.1.5 蜂螨的收集 | 第96页 |
5.1.6 蜂螨、微孢子虫对蜜蜂的侵染实验 | 第96-97页 |
5.1.7 RNA的提取 | 第97页 |
5.1.8 cDNA合成 | 第97-99页 |
5.1.9 qPCR检测IAPV及免疫基因 | 第99页 |
5.1.10 qPCR扩增效率 | 第99-100页 |
5.2 实验结果 | 第100-106页 |
5.2.1 qPCR扩增效率的验证 | 第100-102页 |
5.2.2 IAPV及相关差异表达基因的分析 | 第102-106页 |
5.3 讨论 | 第106-107页 |
第6章 主要结论、创新及后续研究展望 | 第107-111页 |
6.1 主要结论 | 第107-108页 |
6.2 本论文的创新点、不足之处及研究展望 | 第108-111页 |
参考文献 | 第111-129页 |
博士期间发表的论文 | 第129-130页 |
国际交流及会议 | 第130-131页 |
致谢 | 第131页 |