| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1.1 纤维素与几丁质 | 第14-16页 |
| 1.1.1 纤维素 | 第14-15页 |
| 1.1.2 几丁质 | 第15-16页 |
| 1.2 纤维素与几丁质的酶法降解 | 第16-17页 |
| 1.2.1 纤维素的酶法降解 | 第16-17页 |
| 1.2.2 几丁质的酶法降解 | 第17页 |
| 1.3 LPMO氧化裂解几丁质 | 第17-22页 |
| 1.3.1 CBP21的发现 | 第18-19页 |
| 1.3.2 CBP21的蛋白质结构 | 第19-20页 |
| 1.3.3 CBP21—溶解性多糖单加氧酶 | 第20-22页 |
| 1.4 LPMO氧化裂解纤维素 | 第22-23页 |
| 1.5 AA9家族与AA10家族 | 第23-25页 |
| 1.6 研究目的和研究意义 | 第25-26页 |
| 1.7 研究内容 | 第26-27页 |
| 第二章 AA10家族LPMO基因的克隆、融合表达及其成熟蛋白的制备 | 第27-55页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-33页 |
| 2.1.1 菌株 | 第27页 |
| 2.1.2 质粒 | 第27-28页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第28-31页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第31-32页 |
| 2.1.5 实验分析软件 | 第32-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-36页 |
| 2.2.1 LPMO基因及其编码氨基酸序列的分析 | 第33页 |
| 2.2.2 LPMO基因的分子克隆 | 第33-34页 |
| 2.2.3 重组质粒的构建和鉴定 | 第34-36页 |
| 2.2.4 融合蛋白的诱导表达和分离纯化 | 第36页 |
| 2.2.5 融合蛋白的MBP标签切除及纯化 | 第36页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第36-54页 |
| 2.3.1 LPMO基因的序列分析 | 第36-40页 |
| 2.3.2 Actinosynnema mirum DSM 43827 Am1的基因克隆、融合表达和制备 | 第40-45页 |
| 2.3.3 Actinosynnema mirum DSM 43827 Am5的基因克隆、融合表达和制备 | 第45-50页 |
| 2.3.4 Thermobifida fusca YX Tf1的基因克隆、融合表达和制备 | 第50-54页 |
| 2.4 小结 | 第54-55页 |
| 第三章 AA10家族LPMO的酶学性质研究 | 第55-73页 |
| 3.1 实验材料 | 第55-56页 |
| 3.1.1 蛋白质 | 第55页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第55-56页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第56页 |
| 3.2 实验方法 | 第56-58页 |
| 3.2.1 Am1与Am5氧化活性的鉴定 | 第56页 |
| 3.2.2 还原剂对Am5活性的影响 | 第56-57页 |
| 3.2.3 Am5与几丁质酶协同降解几丁质 | 第57-58页 |
| 3.2.4 Am5与不同底物吸附性的研究 | 第58页 |
| 3.2.5 Am5蛋白结构的同源建模与分析 | 第58页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第58-72页 |
| 3.3.1 Am1与Am5氧化活性的鉴定 | 第58-63页 |
| 3.3.2 还原剂对Am5氧化性的影响 | 第63-65页 |
| 3.3.3 Am5与几丁质酶协同降解几丁质 | 第65-68页 |
| 3.3.4 Am5与不同底物吸附性的研究 | 第68-69页 |
| 3.3.5 Actinosynnema mirum DSM43827 Am5蛋白结构的同源建模与分析 | 第69-72页 |
| 3.4 小结 | 第72-73页 |
| 第四章 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 硕士期间已发表的研究成果 | 第81页 |
