摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 前言 | 第14-31页 |
1 海水养殖常见病原菌 | 第14-16页 |
1.1 主要致病弧菌 | 第14-15页 |
1.1.1 哈维氏弧菌 | 第14-15页 |
1.1.2 鳗弧菌 | 第15页 |
1.1.3 副溶血弧菌 | 第15页 |
1.1.4 溶藻弧菌 | 第15页 |
1.2 迟钝爱德华氏菌 | 第15-16页 |
1.3 假交替单胞菌 | 第16页 |
2 常见微生物菌种保存方法 | 第16-18页 |
2.1 传代培养法 | 第16页 |
2.2 载体保存法 | 第16-17页 |
2.3 菌悬液保存法 | 第17页 |
2.4 液体石蜡保藏法 | 第17页 |
2.5 寄主保存法 | 第17页 |
2.6 冷冻保存法 | 第17-18页 |
2.7 冷冻干燥保存法 | 第18页 |
3 冷冻干燥技术 | 第18-29页 |
3.1 冷冻干燥的原理 | 第18-19页 |
3.2 冷冻干燥的一般过程 | 第19-20页 |
3.2.1 预冻结 | 第19页 |
3.2.2 升华干燥 | 第19-20页 |
3.2.3 解析干燥 | 第20页 |
3.3 冷冻干燥对细胞的损伤机制 | 第20-23页 |
3.3.1 机械损伤 | 第20页 |
3.3.2 溶质损伤 | 第20-21页 |
3.3.3 细胞膜损伤 | 第21-22页 |
3.3.4 细胞代谢调节作用损伤 | 第22页 |
3.3.5 遗传物质的损伤 | 第22页 |
3.3.6 细胞内外 pH 平衡性的改变 | 第22-23页 |
3.4 冷冻干燥技术的特点及应用 | 第23-24页 |
3.5 影响细胞冻干效果的主要因素 | 第24-26页 |
3.5.1 菌株特性 | 第24页 |
3.5.2 培养条件 | 第24页 |
3.5.3 初始细胞浓度 | 第24-25页 |
3.5.4 冻干保护剂 | 第25页 |
3.5.5 菌液与保护剂的混合比例 | 第25页 |
3.5.6 冻结过程及冻结速度 | 第25-26页 |
3.5.7 复水介质和复水条件 | 第26页 |
3.5.8 储藏条件 | 第26页 |
3.6 冷冻干燥保护剂 | 第26-29页 |
3.6.1 冷冻干燥保护剂的保护机理 | 第26-28页 |
3.6.2 冷冻干燥保护剂的种类 | 第28-29页 |
4 本研究的目的和意义 | 第29-31页 |
第二章 病原微生物冷冻干燥保护剂的筛选 | 第31-43页 |
1 实验材料 | 第31-32页 |
1.1 菌种 | 第31页 |
1.2 试剂 | 第31页 |
1.3 仪器设备 | 第31-32页 |
2 试验方法 | 第32-33页 |
2.1 菌株及菌悬液制备 | 第32页 |
2.2 冻干保护剂溶液的配制 | 第32-33页 |
2.3 真空冷冻干燥工艺参数 | 第33页 |
2.4 菌株冻干存活率测定 | 第33页 |
3 结果分析 | 第33-39页 |
3.1 假交替单胞菌冻干保护剂的筛选 | 第33-35页 |
3.2 迟钝爱德华氏菌冻干保护剂的筛选 | 第35-36页 |
3.3 哈维氏弧菌冻干保护剂的筛选 | 第36-37页 |
3.4 鳗弧菌冻干保护剂的筛选 | 第37-38页 |
3.5 灿烂弧菌冻干保护剂的筛选 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-43页 |
第三章 冷冻干燥保护剂配伍优化 | 第43-56页 |
1 实验材料 | 第43页 |
1.1 菌种 | 第43页 |
1.2 试剂 | 第43页 |
1.3 仪器设备 | 第43页 |
2 试验方法 | 第43-44页 |
2.1 菌株及菌悬液制备 | 第43页 |
2.2 冻干保护剂溶液的配制 | 第43-44页 |
2.3 真空冷冻干燥工艺参数 | 第44页 |
2.4 菌株冻干存活率测定 | 第44页 |
3 结果分析 | 第44-53页 |
3.1 假交替单胞菌冻干保护剂的复配与正交分析 | 第44-46页 |
3.2 迟钝爱德华氏菌冻干保护剂的复配与正交分析 | 第46-48页 |
3.3 哈维氏弧菌冻干保护剂的复配与正交分析 | 第48-50页 |
3.4 鳗弧菌冻干保护剂的复配与正交分析 | 第50-51页 |
3.5 灿烂弧菌冻干保护剂的复配与正交分析 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-56页 |
第四章 真空冷冻干燥条件与工艺优化 | 第56-63页 |
1 实验材料 | 第56页 |
1.1 菌种 | 第56页 |
1.2 试剂 | 第56页 |
1.3 仪器设备 | 第56页 |
2 试验方法 | 第56-58页 |
2.1 菌株及菌悬液制备 | 第56页 |
2.2 冻干保护剂溶液的配制 | 第56-57页 |
2.3 保护剂最佳含盐量的优化 | 第57页 |
2.4 初始细胞浓度对冻干存活率的影响 | 第57页 |
2.5 复水介质对细菌存活率的影响 | 第57页 |
2.6 菌液与保护剂的混合比例对细菌存活率的影响 | 第57页 |
2.7 不同生长阶段对冻干存活率的影响 | 第57页 |
2.8 真空冷冻干燥工艺参数 | 第57-58页 |
2.9 菌株冻干存活率测定 | 第58页 |
3 结果分析 | 第58-60页 |
3.1 保护剂最佳含盐量的优化 | 第58页 |
3.2 初始细胞浓度对冻干存活率的影响 | 第58-59页 |
3.3 复水介质对细菌存活率的影响 | 第59页 |
3.4 菌液与保护剂的混合比例对细菌存活率的影响 | 第59页 |
3.5 不同生长阶段对冻干存活率的影响 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60-63页 |
第五章 不同保存方式对细菌成活率的影响 | 第63-67页 |
1 实验材料 | 第63页 |
1.1 菌种 | 第63页 |
1.2 试剂 | 第63页 |
1.3 仪器设备 | 第63页 |
2 试验方法 | 第63-64页 |
2.1 菌株及菌悬液制备 | 第63页 |
2.2 冻干保护剂溶液的配制 | 第63-64页 |
2.3 冷冻干燥及超低温保藏过程 | 第64页 |
2.4 菌株冻干存活率测定 | 第64页 |
3 结果分析 | 第64-65页 |
3.1 -80℃超低温保藏条件下菌种存活率的变化情况 | 第64-65页 |
3.2 冷冻干燥保藏的两株病原菌细胞存活率的变化情况 | 第65页 |
4 讨论 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-74页 |
附录 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
个人简历 | 第76-77页 |
学术成果 | 第77-78页 |