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低温菌Pseudomonas sp.CBZ-4对炔雌醇的降解特性及适冷机制研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第1章 绪论第10-23页
    1.1 炔雌醇的性质和危害第10-11页
        1.1.1 炔雌醇的性质第10页
        1.1.2 炔雌醇的危害第10-11页
    1.2 炔雌醇环境污染现状和常用处理方法第11-13页
        1.2.1 炔雌醇在环境中的来源和归趋第11-12页
        1.2.2 炔雌醇的生物降解第12-13页
    1.3 炔雌醇降解菌的研究现状第13-17页
        1.3.1 炔雌醇降解菌及其降解机理第13-15页
        1.3.2 炔雌醇降解菌降解途径第15-16页
        1.3.3 炔雌醇降解菌生长降解动力学第16-17页
        1.3.4 菌株 CBZ-4 的研究现状第17页
    1.4 低温菌适应低温的分子机制第17-20页
        1.4.1 低温菌细胞膜的特性第18页
        1.4.2 低温菌的酶的特性第18-19页
        1.4.3 冷激蛋白的研究进展第19-20页
    1.5 本课题研究的意义和目的第20-23页
        1.5.1 课题来源第20页
        1.5.2 课题研究的意义和目的第20-21页
        1.5.3 主要研究内容及技术路线第21-23页
第2章 实验材料与方法第23-33页
    2.1 实验材料第23-27页
        2.1.1 实验仪器第23页
        2.1.2 实验试剂第23页
        2.1.3 培养基第23-26页
        2.1.4 菌种来源第26-27页
    2.2 实验方法第27-31页
        2.2.1 菌种培养第27页
        2.2.2 药品和个人护理品定量方法第27-29页
        2.2.3 药品和个人护理品及其降解产物定性方法第29-30页
        2.2.4 蛋白质含量测定第30-31页
        2.2.5 休眠细胞的制备第31页
        2.2.6 DNA 提取第31页
        2.2.7 菌株 CBZ-4 基因组测序、拼接与注释方法第31页
    2.3 实验设计第31-33页
        2.3.1 环境因素对降解的影响实验第31页
        2.3.2 混合底物转化率测定实验第31-32页
        2.3.3 菌株 CBZ-4 对不同浓度炔雌醇降解效能实验第32页
        2.3.4 炔雌醇降解产物的收集第32页
        2.3.5 菌株 CBZ-4 对药品和个人护理品的矿化实验第32-33页
第3章 菌株 CBZ-4 的生长降解特性第33-43页
    3.1 环境因子对菌株 CBZ-4 生长及对炔雌醇降解的影响第33-37页
        3.1.1 温度对菌株 CBZ-4 生长和炔雌醇降解的影响第33-34页
        3.1.2 初始 pH 值对菌株 CBZ-4 生长和炔雌醇降解的影响第34页
        3.1.3 摇床转速对菌株 CBZ-4 生长和炔雌醇降解的影响第34-35页
        3.1.4 接种量对菌株 CBZ-4 生长和炔雌醇降解的影响第35-36页
        3.1.5 菌株 CBZ-4 对炔雌醇的矿化第36-37页
    3.2 最佳条件下菌株 CBZ-4 对炔雌醇的降解第37-38页
    3.3 菌株 CBZ-4 对混合底物的降解第38-40页
        3.3.1 菌株 CBZ-4 对药品和个人护理品的矿化第38-39页
        3.3.2 菌株 CBZ-4 对混合底物的转化第39-40页
    3.4 菌株 CBZ-4 降解 EE2 的产物分析第40-41页
    3.5 本章小结第41-43页
第4章 菌株 CBZ-4 的生长动力学和炔雌醇降解动力学第43-52页
    4.1 炔雌醇作为底物的菌株 CBZ-4 生长动力学第43-47页
        4.1.1 菌株 CBZ-4 不同初始炔雌醇浓度的生长状况第44-45页
        4.1.2 菌株 CBZ-4 不同初始炔雌醇浓度的生长动力学方程第45-47页
    4.2 菌株 CBZ-4 的炔雌醇降解动力学第47-50页
        4.2.1 菌株 CBZ-4 对不同初始浓度炔雌醇的降解第48-49页
        4.2.2 菌株 CBZ-4 降解动力学方程第49-50页
    4.3 本章小结第50-52页
第5章 菌株 CBZ-4 的冷适应机制第52-68页
    5.1 菌株 CBZ-4 基因组基本特征第52-54页
    5.2 菌株 CBZ-4 的冷激蛋白序列分析第54-59页
        5.2.1 菌株 CBZ-4 的冷激蛋白功能预测第54-56页
        5.2.2 菌株 CBZ-4 的冷激蛋白的结构预测第56-59页
    5.3 菌株 CBZ-4 冷激蛋白基因的克隆与表达第59-61页
        5.3.1 菌株 CBZ-4 冷激蛋白基因的克隆第59-60页
        5.3.2 菌株 CBZ-4 冷激蛋白基因表达载体及基因工程菌的构建第60-61页
        5.3.3 菌株 CBZ-4 冷激蛋白基因在大肠杆菌中的表达第61页
    5.4 菌株 CBZ-4 冷激蛋白基因对大肠杆菌适冷特性的影响第61-66页
        5.4.1 CspA1 的表达对大肠杆菌适冷特性的影响第62页
        5.4.2 CspA2 的表达对大肠杆菌适冷特性的影响第62-63页
        5.4.3 CspC 的表达对大肠杆菌适冷特性的影响第63页
        5.4.4 CspG1 的表达对大肠杆菌适冷特性的影响第63-64页
        5.4.5 CspG2 的表达对大肠杆菌适冷特性的影响第64页
        5.4.6 CspD 的表达对大肠杆菌适冷特性的影响第64-65页
        5.4.7 菌株 CBZ-4 的 CSPs 基因表达对大肠杆菌适冷特性影响的比较第65-66页
    5.5 本章小结第66-68页
结论第68-70页
参考文献第70-77页
附录1 表达载体 pET-28a 结构图第77-78页
附录2 克隆载体 pUC57 结构图第78-79页
攻读学位期间发表的学术论文第79-81页
致谢第81页

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