| CONTENTS | 第5-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-17页 |
| 1.1 黄芪多糖研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 雏鸡肠道黏膜免疫研究进展 | 第13页 |
| 1.3 TLR4研究进展 | 第13-15页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第15-17页 |
| 2 材料和方法 | 第17-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-22页 |
| 2.1.1 黄芪多糖 | 第17页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第17页 |
| 2.1.3 工程菌及质粒 | 第17页 |
| 2.1.4 主要生物学试剂、化学试剂 | 第17页 |
| 2.1.5 主要仪器与设备 | 第17-18页 |
| 2.1.6 主要试剂的配制 | 第18-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-33页 |
| 2.2.1 chTLR4多克隆抗体的制备 | 第22-31页 |
| 2.2.2 chTLR4参与APS调节雏鸡肠道免疫功能 | 第31-33页 |
| 2.3 数据统计与分析 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-59页 |
| 3.1 chTLR4基因的克隆、鉴定及体外诱导表达 | 第34-39页 |
| 3.1.1 雏鸡胸腺总RNA的提取 | 第34页 |
| 3.1.2 chTLR4抗原位点预测及跨膜区分析 | 第34-35页 |
| 3.1.3 chTLR4基因的扩增 | 第35-36页 |
| 3.1.4 重组菌PCR鉴定 | 第36-37页 |
| 3.1.5 重组原核质粒双酶切鉴定 | 第37页 |
| 3.1.6 重组原核质粒测序 | 第37-38页 |
| 3.1.7 重组原核质粒体外诱导表达 | 第38-39页 |
| 3.2 兔抗chTLR4多克隆抗体的制备及检测 | 第39-43页 |
| 3.2.1 重组蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| 3.2.2 间接ELISA方法检测兔抗chTLR4多克隆抗体效价 | 第40页 |
| 3.2.3 Western-blot检测多克隆抗体特异性 | 第40页 |
| 3.2.4 重组真核质粒的构建 | 第40-43页 |
| 3.3 雏鸡肠道chTLR4表达的动态变化检测 | 第43-48页 |
| 3.3.1 雏鸡十二指肠及法氏囊中chTLR4 mRNA表达动态变化 | 第43-48页 |
| 3.3.2 雏鸡十二指肠、空肠、回肠、法氏囊中chTLR4蛋白表达动态变化 | 第48页 |
| 3.4 雏鸡肠道chTLR4信号转导通路相关信号分子mRNA表达动态变化 | 第48-55页 |
| 3.5 雏鸡肠道细胞因子chTNF-α、chIFN-β mRNA表达变化 | 第55-58页 |
| 3.6 雏鸡肠道sIgA含量动态变化 | 第58页 |
| 3.7 雏鸡肠道sIgA表达的动态变化 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-64页 |
| 4.1 兔抗chTLR4多抗的制备 | 第59页 |
| 4.2 黄芪多糖与雏鸡肠道免疫 | 第59-61页 |
| 4.3 chTLR4信号转导通路参与黄芪多糖调节雏鸡肠道免疫 | 第61-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 附录 | 第70-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第72页 |
