致谢 | 第6-8页 |
前言 | 第8-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
目录 | 第14-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-26页 |
1 寄生蜂对寄主的调控 | 第18-19页 |
1.1 免疫抑制 | 第18-19页 |
1.2 发育调控 | 第19页 |
2 菜蛾盘绒茧蜂寄生对寄主的影响 | 第19-20页 |
3 多分DNA病毒(PDV) | 第20-26页 |
3.1 PDV的发现 | 第20-21页 |
3.2 PDV的起源与进化 | 第21页 |
3.3 PDV生活史 | 第21-22页 |
3.4 PDV的形态结构 | 第22页 |
3.5 PDV基因组的结构及其基因家族组成 | 第22-24页 |
3.6 PDV的生理功能 | 第24-26页 |
第二章 基本材料与方法 | 第26-36页 |
1 养虫设备 | 第26-27页 |
1.1 全自动人工气候室 | 第26页 |
1.2 智能人工气候箱 | 第26页 |
1.3 养虫笼 | 第26页 |
1.4 产卵笼 | 第26页 |
1.5 保蜂盒及寄生盒 | 第26页 |
1.6 吸虫管 | 第26-27页 |
2 供试材料 | 第27页 |
2.1 供试蔬菜 | 第27页 |
3 供试昆虫的人工饲养 | 第27-28页 |
3.1 虫源 | 第27页 |
3.2 小菜蛾的饲养 | 第27页 |
3.3 寄生蜂的饲养 | 第27-28页 |
4 实验仪器及软件系统 | 第28-29页 |
4.1 实验仪器 | 第28页 |
4.2 软件系统 | 第28-29页 |
5 常用实验试剂及配制 | 第29-30页 |
5.1 工具酶及试剂盒 | 第29页 |
5.2 其它试剂 | 第29页 |
5.3 一般试剂的配制 | 第29-30页 |
6 常规实验方法 | 第30-36页 |
6.1 小菜蛾幼虫中肠、脑和血细胞的收集 | 第30页 |
6.2 总RNA的提取 | 第30-31页 |
6.3 cDNA第一链的合成 | 第31-32页 |
6.4 PCR反应 | 第32页 |
6.5 感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
6.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
6.7 凝胶回收目的片段 | 第33页 |
6.8 连接反应 | 第33-34页 |
6.9 转化与活化 | 第34页 |
6.10 质粒提取 | 第34-35页 |
6.11 3' 、5'末端快速扩增(RACE) | 第35页 |
6.12 qRT-PCR | 第35-36页 |
第三章 菜蛾盘绒茧蜂多分DNA转录基因的预测与验证 | 第36-39页 |
1 材料与方法 | 第36-37页 |
1.1 供试昆虫 | 第36页 |
1.2 寄生后小菜蛾幼虫总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第36页 |
1.3 片段序列扩增 | 第36页 |
1.4 产物纯化、连接T载体及鉴定 | 第36-37页 |
2 结果与分析 | 第37-39页 |
2.1 CvBV在寄主体内转录的基因归类 | 第37-38页 |
2.2 基因验证结果与分析 | 第38-39页 |
第四章 菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒转录基因的克隆 | 第39-55页 |
1 材料与方法 | 第39-42页 |
1.1 供试昆虫 | 第39页 |
1.2 小菜蛾幼虫中肠、脑和血细胞组织的收集 | 第39页 |
1.3 寄生后小菜蛾幼虫总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第39页 |
1.4 引物设计 | 第39-42页 |
1.5 3’端和5’端序列扩增 | 第42页 |
1.6 产物纯化、连接T载体及鉴定 | 第42页 |
1.7 生物信息学分析 | 第42页 |
2 结果与分析 | 第42-55页 |
2.1 c6-2全长cDNA及DNA序列分析 | 第43页 |
2.2 c6-5全长cDNA及DNA序列分析 | 第43-45页 |
2.3 c6-6全长cDNA及DNA序列分析 | 第45-46页 |
2.4 c12-4全长cDNA及DNA序列分析 | 第46-47页 |
2.5 c12-6全长cDNA及DNA序列分析 | 第47-48页 |
2.6 c12-9全长cDNA及DNA序列分析 | 第48-49页 |
2.7 c14-1全长cDNA及DNA序列分析 | 第49-50页 |
2.8 c28-1全长cDNA及DNA序列分析 | 第50-51页 |
2.9 c28-5全长cDNA及DNA序列分析 | 第51-52页 |
2.10 基于氨基酸序列的PTP同源相似性分析 | 第52-55页 |
第五章 菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒基因在寄主小菜蛾幼虫体内转录模式的研究 | 第55-71页 |
1 材料与方法 | 第55-58页 |
1.1 供试昆虫 | 第55页 |
1.2 小菜蛾幼虫中肠、脑和血细胞的收集 | 第55页 |
1.3 寄生后小菜蛾幼虫的中肠、脑和血细胞总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第55页 |
1.4 qRT-PCR检测 | 第55-58页 |
2 结果与分析 | 第58-70页 |
2.1 引物的特异性和扩增效率 | 第58-60页 |
2.2 CvBV基因在寄生后寄主小菜蛾幼虫体内的转录模式 | 第60-70页 |
3 讨论 | 第70-71页 |
第六章 总结与讨论 | 第71-74页 |
1 结论 | 第71-72页 |
2 讨论 | 第72-73页 |
3 本文创新之处 | 第73页 |
4 本文不足之处 | 第73页 |
5 今后研究方向 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-84页 |