| 致谢 | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 目录 | 第14-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-27页 |
| 1 畸形细胞的概念 | 第17-18页 |
| 1.1 畸形细胞的起源 | 第17页 |
| 1.2 畸形细胞的数量和形态 | 第17-18页 |
| 2 畸形细胞的功能 | 第18-21页 |
| 2.1 畸形细胞的营养功能 | 第18-19页 |
| 2.2 畸形细胞调控寄主发育功能 | 第19-20页 |
| 2.3 畸形细胞抑制寄主的免疫系统 | 第20-21页 |
| 3 昆虫抗菌肽的概念 | 第21-22页 |
| 4 昆虫抗菌肽的分类 | 第22-25页 |
| 4.1 天蚕素类 | 第22-23页 |
| 4.2 富含半胱氨酸的抗菌肽 | 第23页 |
| 4.3 富含脯氨酸的抗菌肽 | 第23-24页 |
| 4.4 富含甘氨酸的抗菌肽 | 第24-25页 |
| 5 昆虫抗菌肽的作用机制 | 第25页 |
| 6 肽聚糖识别蛋白的概念 | 第25-27页 |
| 第二章 基本材料与方法 | 第27-38页 |
| 1 养虫设备 | 第27-28页 |
| 1.1 全自动人工气候室 | 第27页 |
| 1.2 智能人工气候箱 | 第27页 |
| 1.3 养虫笼 | 第27页 |
| 1.4 产卵笼 | 第27页 |
| 1.5 保蜂盒及寄生盒 | 第27-28页 |
| 1.6 吸虫管 | 第28页 |
| 2 供试材料 | 第28页 |
| 2.1 供试蔬菜 | 第28页 |
| 2.2 供试菌种 | 第28页 |
| 3 供试昆虫的人工饲养 | 第28-29页 |
| 3.1 虫源 | 第28页 |
| 3.2 小菜蛾的饲养 | 第28-29页 |
| 3.3 寄生蜂的饲养 | 第29页 |
| 4 实验仪器及软件系统 | 第29-30页 |
| 4.1 实验仪器 | 第29-30页 |
| 4.2 软件系统 | 第30页 |
| 5 常用实验试剂及配制 | 第30-32页 |
| 5.1 工具酶及试剂盒 | 第30页 |
| 5.2 其它试剂 | 第30-31页 |
| 5.3 一般试剂的配制 | 第31-32页 |
| 6 常规实验方法 | 第32-38页 |
| 6.1 菜蛾盘绒茧蜂畸形细胞的收集 | 第32页 |
| 6.2 TRIZol法提取总RNA | 第32-33页 |
| 6.3 cDNA第一链的合成 | 第33页 |
| 6.4 PCR反应 | 第33-34页 |
| 6.5 感受态细胞的制备 | 第34页 |
| 6.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第34页 |
| 6.7 凝胶回收目的片段 | 第34-35页 |
| 6.8 连接反应 | 第35页 |
| 6.9 转化与活化 | 第35页 |
| 6.10 质粒提取 | 第35-36页 |
| 6.11 3 ’、5’末端快速扩增(RACE) | 第36页 |
| 6.12 荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第36页 |
| 6.13 试验菌液的制备 | 第36-38页 |
| 第三章 菜蛾盘绒茧蜂畸形细胞免疫相关基因的筛选与验证 | 第38-41页 |
| 1 材料与方法 | 第38-39页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第38页 |
| 1.2 畸形细胞的体外诱导 | 第38页 |
| 1.3 合成cDNA文库 | 第38页 |
| 1.4 片段序列扩增及鉴定 | 第38页 |
| 1.5 生物信息学分析 | 第38-39页 |
| 2 结果 | 第39-41页 |
| 2.1 免疫相关基因的筛选 | 第39页 |
| 2.2 部分免疫相关基因的验证 | 第39-41页 |
| 第四章 畸形细胞肽聚糖识别蛋白和抗菌肽的基因克隆与序列分析 | 第41-50页 |
| 1 材料与方法 | 第41-43页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第41页 |
| 1.2 菜蛾盘绒茧蜂畸形细胞的收集 | 第41页 |
| 1.3 畸形细胞RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第41页 |
| 1.4 畸形细胞的体外诱导 | 第41页 |
| 1.5 引物设计 | 第41-42页 |
| 1.6 RACE | 第42-43页 |
| 1.7 产物纯化、连接T载体及鉴定 | 第43页 |
| 1.8 生物信息学分析 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-48页 |
| 2.1 PGRP和defensin基因的序列分析 | 第43-46页 |
| 2.2 氨基酸序列的同源进化分析 | 第46-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 微生物诱导下畸形细胞肽聚糖识别蛋白和抗菌肽基因的转录模式 | 第50-64页 |
| 1 材料与方法 | 第50-51页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第50页 |
| 1.2 菜蛾盘绒茧蜂畸形细胞的收集与体外诱导 | 第50页 |
| 1.3 畸形细胞RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第50页 |
| 1.4 实时荧光定量rt-qPCR检测 | 第50-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-63页 |
| 2.1 引物的特异性和扩增效率 | 第51-52页 |
| 2.2 畸形细胞肽聚糖识别蛋白和抗菌肽在微生物诱导后的转录模式 | 第52-63页 |
| 3 讨论 | 第63-64页 |
| 第六章 畸形细胞抗菌肽的抑菌活性及与寄主幼虫死亡率关系的初探 | 第64-69页 |
| 1 材料与方法 | 第64-65页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第64页 |
| 1.2 CvTdef-A多肽合成 | 第64页 |
| 1.3 抑菌试验 | 第64页 |
| 1.4 辐射处理雌蜂及其假寄生 | 第64页 |
| 1.5 小菜蛾感菌能力研究 | 第64-65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-67页 |
| 2.1 CvTdef-A抑菌效果的检测 | 第65-66页 |
| 2.2 畸形细胞与寄主感菌后死亡率的关系 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 第七章 总结 | 第69-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
