| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-27页 |
| 1.1 piggyBac 转座子研究进展 | 第12-19页 |
| 1.1.1 piggyBac 转座子基本结构 | 第13页 |
| 1.1.2 PB 转座机制 | 第13-14页 |
| 1.1.3 PB 转座特性 | 第14-16页 |
| 1.1.4 PB 转座子系统的应用 | 第16-19页 |
| 1.2 人端粒酶逆转录酶 hTERT 研究进展 | 第19-27页 |
| 1.2.1 端粒与端粒酶的结构 | 第20-22页 |
| 1.2.2 端粒酶逆转录酶延长端粒的机制 | 第22-24页 |
| 1.2.3 人端粒酶逆转录酶 hTERT 的应用 | 第24-26页 |
| 1.2.4 人端粒酶逆转录酶 hTERT 诱导细胞永生化的改进策略试验研究 | 第26-27页 |
| 第二章 通用 PB 转座子载体 pTP-hTERT 构建及基本元件功能验证 | 第27-44页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.1 主要质粒、菌株和细胞 | 第27页 |
| 2.1.2 试剂 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-35页 |
| 2.2.1 永生化载体 pTP-hTERT 构建 | 第28-31页 |
| 2.2.2 载体基本元件功能验证 | 第31-35页 |
| 2.3 结果与分析 | 第35-42页 |
| 2.3.1 永生化载体 pTP-hTERT 构建 | 第35-39页 |
| 2.3.2 载体基本元件功能验证 | 第39-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-43页 |
| 2.5 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 pTP-hTERT 在牛乳腺上皮细胞上的验证 | 第44-53页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第44-45页 |
| 3.2 方法 | 第45-47页 |
| 3.2.1 牛乳腺上皮细胞的转染、筛选和传代 | 第45页 |
| 3.2.2 RT-PCR 检测 hTERT | 第45页 |
| 3.2.3 乳腺上皮细胞免疫荧光染色 | 第45-46页 |
| 3.2.4 Western blotting | 第46页 |
| 3.2.5 端粒酶活性检测 | 第46-47页 |
| 3.3 结果与分析 | 第47-51页 |
| 3.3.1 牛乳腺上皮细胞的培养、转染和筛选 | 第47-49页 |
| 3.3.2 RT-PCR | 第49-50页 |
| 3.3.3 细胞免疫荧光染色 | 第50页 |
| 3.3.4 Western blotting 检测结果 | 第50-51页 |
| 3.3.5 端粒酶活性检测 | 第51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-52页 |
| 3.5 小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 创新之处和进一步研究的课题 | 第54-55页 |
| 创新之处 | 第54页 |
| 进一步研究的课题 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介及硕士在读期间论文发表情况 | 第68页 |
