| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-18页 |
| 1 类胡萝卜素的种类和功能 | 第13-15页 |
| 1.1 海产贝类体内的类胡萝卜素种类 | 第13页 |
| 1.2 类胡萝卜素的存在形式和部位 | 第13-14页 |
| 1.3 海洋动物中类胡萝卜素的功能 | 第14页 |
| 1.4 海洋贝类壳色多态性与类胡萝卜素的相关性 | 第14-15页 |
| 1.4.1 影响壳色多态性的因素 | 第14-15页 |
| 1.4.2 壳色多态性的分子机制 | 第15页 |
| 2 类胡萝卜素合成过程中关键酶及相关基因的研究进展 | 第15-17页 |
| 2.1 牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶 | 第16页 |
| 2.2 八氢番茄红素合成酶 | 第16-17页 |
| 2.3 番茄红素合成 | 第17页 |
| 2.4 胡萝卜素合成 | 第17页 |
| 3 海洋经济贝类遗传育种方法研究进展 | 第17-18页 |
| 第二章 文蛤外套膜色素带的显微观察及其胡萝卜素含量的测定 | 第18-22页 |
| 1 材料与方法 | 第18-19页 |
| 1.1 试验材料 | 第18页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第18页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 1.2 方法 | 第18页 |
| 1.2.1 取样 | 第18页 |
| 1.2.2 文蛤外套膜色素颗粒观察 | 第18页 |
| 1.2.3 类胡萝卜素的分离及含量测定 | 第18页 |
| 1.3 数据处理 | 第18-19页 |
| 2 结果分析 | 第19-20页 |
| 2.1 文蛤外套膜色素颗粒观察 | 第19页 |
| 2.2 不同壳色文蛤外套膜边缘类胡萝卜素含量的比较 | 第19-20页 |
| 3 讨论 | 第20-22页 |
| 3.1 外套膜色素带与文蛤壳色形成之间的关系 | 第20页 |
| 3.2 类胡萝卜素含量与文蛤壳色之间的关系 | 第20-22页 |
| 第三章 类胡萝卜素累积过程关键基因的克隆及其与文蛤壳色的相关性研究 | 第22-44页 |
| 1 材料与方法 | 第22-31页 |
| 1.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 1.1.1 试剂 | 第22-23页 |
| 1.1.2 菌株和质粒 | 第23页 |
| 1.1.3 引物合成及测序 | 第23页 |
| 1.1.4 仪器设备 | 第23页 |
| 1.2 方法 | 第23-31页 |
| 1.2.1 红壳文蛤外套膜总 RNA 提取 | 第23-24页 |
| 1.2.2 文蛤 GGPP 合成酶基因的克隆 | 第24-28页 |
| 1.2.2.1 cDNA 第一条链的合成 | 第24-25页 |
| 1.2.2.2 cDNA 末端快速扩增 | 第25-26页 |
| 1.2.2.3 目的条带割胶回收 | 第26-27页 |
| 1.2.2.4 连接 | 第27页 |
| 1.2.2.5 转化 | 第27-28页 |
| 1.2.2.6 菌液 PCR | 第28页 |
| 1.2.2.7 测序 | 第28页 |
| 1.2.3 GGPP 在不同壳色文蛤外套膜中的表达差异分析 | 第28-31页 |
| 1.2.3.1 文蛤外套膜 RNA 提取(Trizol 法) | 第28-29页 |
| 1.2.3.2 cDNA 第一链合成 | 第29页 |
| 1.2.3.3 GGPP 基因和 crtO 基因荧光定量引物的设计 | 第29页 |
| 1.2.3.4 qRT-PCR | 第29-31页 |
| 1.2.3.5 荧光定量数据处理 | 第31页 |
| 1.2.3.6 基因序列的生物信息学分析 | 第31页 |
| 2 结果分析 | 第31-40页 |
| 2.1 文蛤外套膜 RNA 的提取及纯度检测 | 第31-32页 |
| 2.2 文蛤 GGPP 基因和 crtO 基因全长的序列特征 | 第32页 |
| 2.3 文蛤 GGPP 基因和 crtO 基因氨基酸序列特征 | 第32-39页 |
| 2.4 文蛤 GGPP 和 crtO 基因的表达差异分析 | 第39-40页 |
| 3 | 第40-44页 |
| 3.1 文蛤 GGPS 和 crtO 氨基酸序列及结构分析 | 第40-41页 |
| 3.2 文蛤 GGPS 和 crtO 基因的表达分析 | 第41-44页 |
| 第四章 MSAP 标记技术在四种壳色文蛤中的差异分析 | 第44-54页 |
| 1 材料与方法 | 第44-49页 |
| 1.1 实验材料 | 第44页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第44页 |
| 1.1.2 主要试剂的配置 | 第44页 |
| 1.2 方法 | 第44-48页 |
| 1.2.1 DNA 的提取及纯度检测 | 第44-45页 |
| 1.2.2 四种壳色文蛤的 MSAP 分析 | 第45-48页 |
| 1.2.2.1 DNA 酶切及连接 | 第45-46页 |
| 1.2.2.2 预扩增 | 第46页 |
| 1.2.2.3 选择性扩增 | 第46-47页 |
| 1.2.2.4 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第47-48页 |
| 1.3 MSAP 引物筛选 | 第48页 |
| 1.4 四种壳色文蛤群体甲基化差异分析 | 第48页 |
| 1.5 数据处理 | 第48-49页 |
| 2 结果分析 | 第49-52页 |
| 2.1 基因组 DNA 的纯度检测结果 | 第49-50页 |
| 2.2 酶切产物检测结果 | 第50页 |
| 2.3 预扩产物检测结果 | 第50页 |
| 2.4 选择性扩增检测结果 | 第50-51页 |
| 2.5 MSAP 引物筛选 | 第51页 |
| 2.6 壳色特异性引物筛选 | 第51页 |
| 2.7 不同壳色文蛤的甲基化状态分析 | 第51页 |
| 2.8 不同壳色文蛤甲基化差异位点的筛选 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 小结 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 在学研究成果 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
