| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 1 综述 | 第14-20页 |
| 1.1 fst 基因的发现及分子结构 | 第14页 |
| 1.2 fst 基因生物学作用的研究 | 第14-16页 |
| 1.2.1 fst 基因作用的分子生物学机制 | 第14-15页 |
| 1.2.2 fst 基因的各种生物学功能 | 第15-16页 |
| 1.3 fst 基因在硬骨鱼类中的进化 | 第16-17页 |
| 1.3.1 硬骨鱼进化树分析中两类 fst 基因的发现 | 第16页 |
| 1.3.2 硬骨鱼 fst 基因染色体定位与进化机制 | 第16-17页 |
| 1.3.3 硬骨鱼两类 fst 基因的不均等进化 | 第17页 |
| 1.4 fst 基因表达情况的研究 | 第17-19页 |
| 1.4.1 fst 基因的表达与疾病的关系 | 第17-18页 |
| 1.4.2 fst 基因在鱼类体内的表达 | 第18-19页 |
| 1.4.2.1 fst 基因在斑马鱼和大西洋鲑鱼体内的表达差异分析 | 第18页 |
| 1.4.2.2 fst 基因在斑马鱼和大西洋鲑鱼胚胎发育时期的表达 | 第18-19页 |
| 1.4.2.3 fst 基因在不同肌肉组织中表达的研究 | 第19页 |
| 1.5 fst 基因与 MSTN 基因间的关系及其在水产养殖业中的应用 | 第19-20页 |
| 2 大黄鱼个体发育早期阶段 fst 基因的表达 | 第20-37页 |
| 2.1 前言 | 第20页 |
| 2.2 样品采集与实验设计 | 第20-21页 |
| 2.3 主要试剂 | 第21-23页 |
| 2.3.1 RNA 操作相关试剂 | 第21页 |
| 2.3.2 分子克隆相关试剂 | 第21-22页 |
| 2.3.3 普通 PCR 及 Real-time PCR 扩增相关试剂 | 第22-23页 |
| 2.4 实验方法 | 第23-30页 |
| 2.4.1 总 RNA 的提取 | 第23-24页 |
| 2.4.1.1 总 RNA 抽提注意事项 | 第23页 |
| 2.4.1.2 总 RNA 抽提方法 | 第23页 |
| 2.4.1.3 总 RNA 去除 DNA 污染 | 第23-24页 |
| 2.4.1.4 总 RNA 完整性的检测 | 第24页 |
| 2.4.1.5 总 RNA 浓度、纯度的检测 | 第24页 |
| 2.4.2 cDNA 第一链的合成 | 第24-25页 |
| 2.4.3 β-actin 及 fst 基因的定量引物设计 | 第25页 |
| 2.4.4 标准质粒的构建 | 第25-29页 |
| 2.4.4.1 β-actin 及 fst 基因普通 PCR 的扩增和检测 | 第25-26页 |
| 2.4.4.2 普通 PCR 产物回收与纯化 | 第26-27页 |
| 2.4.4.3 感受态细胞的制备 | 第27页 |
| 2.4.4.4 β-actin 及 fst 基因 PCR 产物与载体的连接 | 第27页 |
| 2.4.4.5 转化和阳性克隆的筛选 | 第27-28页 |
| 2.4.4.6 测序 | 第28页 |
| 2.4.4.7 β-actin 及 fst 基因重组质粒提取 | 第28-29页 |
| 2.4.4.8 β-actin 及 fst 基因重组质粒质粒浓度检测及稀释 | 第29页 |
| 2.4.5 Real-time PCR 扩增 | 第29-30页 |
| 2.4.6 数据处理 | 第30页 |
| 2.5 实验结果 | 第30-36页 |
| 2.5.1 RNA 的提取 | 第30页 |
| 2.5.2 标准质粒的构建 | 第30-31页 |
| 2.5.2.1 标准质粒的检测 | 第31页 |
| 2.5.2.2 标准质粒浓度检测及稀释 | 第31页 |
| 2.5.3 Real-time PCR 标准曲线的构建 | 第31-35页 |
| 2.5.3.1 通过 Real-time PCR 检测 10 倍梯度稀释的标准质粒 | 第31-34页 |
| 2.5.3.2 β-actin 基因及 fst 基因标准曲线扩增效率一致性检测 | 第34-35页 |
| 2.5.4 大黄鱼个体发育早期阶段 fst 基因的表达 | 第35-36页 |
| 2.6 讨论 | 第36-37页 |
| 3 大黄鱼 fst 基因组织特异性表达 | 第37-42页 |
| 3.1 前言 | 第37页 |
| 3.2 样品采集与实验设计 | 第37-38页 |
| 3.3 主要试剂 | 第38页 |
| 3.3.1 RNA 操作相关试剂 | 第38页 |
| 3.3.2 普通 PCR 及 Real-time PCR 扩增相关试剂 | 第38页 |
| 3.4 实验方法 | 第38页 |
| 3.4.1 总 RNA 的提取 | 第38页 |
| 3.4.2 cDNA 第一链的合成 | 第38页 |
| 3.4.3 β-actin 及 fst 基因的定量引物设计 | 第38页 |
| 3.4.4 Real-time PCR 扩增 | 第38页 |
| 3.4.5 数据处理 | 第38页 |
| 3.5 实验结果 | 第38-42页 |
| 3.5.1 不同年龄大黄鱼 fst 基因组织特异性表达 | 第38-40页 |
| 3.5.2 不同性别大黄鱼 fst 基因组织特异性表达 | 第40-42页 |
| 3.6 讨论 | 第42页 |
| 4 大黄鱼不同饥饿阶段 fst 基因的组织表达 | 第42-59页 |
| 4.1 前言 | 第42-43页 |
| 4.2 样品采集与实验设计 | 第43页 |
| 4.3 主要试剂 | 第43页 |
| 4.3.1 RNA 操作相关试剂 | 第43页 |
| 4.3.2 普通 PCR 及 Real-time PCR 扩增相关试剂 | 第43页 |
| 4.4 实验方法 | 第43-44页 |
| 4.4.1 总 RNA 的提取 | 第43页 |
| 4.4.2 cDNA 第一链的合成 | 第43页 |
| 4.4.3 β-actin 及 fst 基因的定量引物设计 | 第43页 |
| 4.4.4 Real-time PCR 扩增 | 第43-44页 |
| 4.4.5 数据处理 | 第44页 |
| 4.5 实验结果 | 第44-54页 |
| 4.5.1 不同饥饿阶段脑组织 fst 基因表达 | 第44-45页 |
| 4.5.2 不同饥饿阶段心组织 fst 基因表达 | 第45-46页 |
| 4.5.3 不同饥饿阶段肝组织 fst 基因表达 | 第46-47页 |
| 4.5.4 不同饥饿阶段肾组织 fst 基因表达 | 第47-48页 |
| 4.5.5 不同饥饿阶段脾组织 fst 基因表达 | 第48-49页 |
| 4.5.6 不同饥饿阶段肌肉组织 fst 基因表达 | 第49-50页 |
| 4.5.7 不同饥饿阶段性腺组织 fst 基因表达 | 第50-51页 |
| 4.5.8 不同饥饿阶段鳃组织 fst 基因表达 | 第51-52页 |
| 4.5.9 不同饥饿阶段眼组织 fst 基因表达 | 第52-53页 |
| 4.5.10 不同饥饿阶段肠组织 fst 基因表达 | 第53-54页 |
| 4.6 讨论 | 第54-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 在学研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
