| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第13-22页 |
| 1.1 土壤次生盐渍化 | 第13页 |
| 1.2 设施土壤次生盐渍化成因 | 第13-15页 |
| 1.2.1 不合理施肥 | 第13-14页 |
| 1.2.2 环境封闭 | 第14页 |
| 1.2.3 灌溉方式不合理 | 第14-15页 |
| 1.3 土壤次生盐渍化对作物的危害 | 第15页 |
| 1.4 植物对盐胁迫的响应机制 | 第15-20页 |
| 1.4.1 PLD在植物逆境信号转导中的作用 | 第16-17页 |
| 1.4.2 PLD与环境胁迫 | 第17-18页 |
| 1.4.3 PLD与植物激素 | 第18-20页 |
| 1.4.3.1 PLD与脱落酸(ABA) | 第18-19页 |
| 1.4.3.2 PLD与乙烯(ETH) | 第19页 |
| 1.4.3.3 PLD与其它激素 | 第19-20页 |
| 1.4.4 PLD与促分裂原活化蛋白激酶(MAPK) | 第20页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-30页 |
| 2.1 农杆菌介导法分别获得过表达CsPLDa烟草和黄瓜植株 | 第22-26页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第22页 |
| 2.1.2 农杆菌培养 | 第22-23页 |
| 2.1.3 烟草转化、培养和植株再生 | 第23页 |
| 2.1.4 黄瓜转化、培养和植株再生 | 第23页 |
| 2.1.5 基因组DNA的提取(CTAB法) | 第23-24页 |
| 2.1.6 转基因烟草和黄瓜的PCR筛选 | 第24页 |
| 2.1.7 植物总RNA的提取 | 第24页 |
| 2.1.8 转基因烟草和黄瓜的实时荧光定量PCR | 第24-26页 |
| 2.1.8.1 去除基因组DNA反应 | 第25页 |
| 2.1.8.2 反转录反应 | 第25页 |
| 2.1.8.3 Real-Time PCR | 第25-26页 |
| 2.1.9 转基因烟草种子的耐盐性分析 | 第26页 |
| 2.2 NaCl胁迫对黄瓜CsPLDa表达及生理生化特性的影响 | 第26-30页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第26页 |
| 2.2.2 试验处理 | 第26页 |
| 2.2.3 测定项目及方法 | 第26-30页 |
| 2.2.3.1 丙二醛含量测定 | 第26页 |
| 2.2.3.2 可溶性蛋白含量测定 | 第26页 |
| 2.2.3.3 H_2O_2和O_2~-含量测定 | 第26-27页 |
| 2.2.3.4 抗氧化酶活性测定 | 第27页 |
| 2.2.3.5 NO含量测定 | 第27页 |
| 2.2.3.6 水杨酸含量测定 | 第27-28页 |
| 2.2.3.7 赤霉素和脱落酸含量测定 | 第28-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-39页 |
| 3.1 农杆菌介导法分别获得过表达CsPLDa烟草和黄瓜植株 | 第30-33页 |
| 3.1.1 转基因烟草和黄瓜的PCR筛选 | 第30-31页 |
| 3.1.2 总RNA的提取 | 第31页 |
| 3.1.3 转基因烟草和黄瓜的实时荧光定量PCR | 第31-32页 |
| 3.1.3.1 转基因烟草的实时荧光定量PCR | 第31-32页 |
| 3.1.3.2 转基因黄瓜的实时荧光定量PCR | 第32页 |
| 3.1.4 转基因烟草种子的耐盐性分析 | 第32-33页 |
| 3.2 NaCl胁迫对黄瓜幼苗CsPLDa表达及生理生化特性的影响 | 第33-39页 |
| 3.2.1 对CsPLDa与CsNMAPK表达特性的影响 | 第33-34页 |
| 3.2.2 对NO含量的影响 | 第34页 |
| 3.2.3 对H_2O_2和O_2~-含量的影响 | 第34-35页 |
| 3.2.4 对抗氧化酶活性的影响 | 第35-36页 |
| 3.2.5 对丙二醛含量的影响 | 第36页 |
| 3.2.6 对可溶性蛋白含量的影响 | 第36-37页 |
| 3.2.7 对水杨酸含量的影响 | 第37页 |
| 3.2.8 对赤霉素和脱落酸含量的影响 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-44页 |
| 4.1 CsPLDa过表达提高了烟草种子对NaCl的抗性 | 第39-40页 |
| 4.2 农杆菌介导法获得CsPLDa过表达黄瓜 | 第40页 |
| 4.3 NaCl胁迫对CsPLDa表达及生理生化特性的影响 | 第40-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-56页 |
| 附录 | 第56-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
