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猪SLC35D3基因克隆、结构特征及其功能研究

中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 前言第14-25页
    1.1 肌内脂肪形成及影响因素第14-17页
        1.1.1 肌内脂肪与肉品质第14-15页
        1.1.2 肌内脂肪发生、生成与分布第15-16页
        1.1.3 影响猪肌内脂肪沉积的因素第16页
        1.1.4 影响猪脂肪沉积的基因第16-17页
    1.2 动物脂肪组织和肌内脂肪代谢调控的研究进展第17-21页
        1.2.1 脂肪形成最主要的转录因子-PPARγ第17-18页
        1.2.2 C/EBPs家族第18页
        1.2.3 ADD1/SREBP1家族第18-19页
        1.2.4 其他转录因子第19-21页
    1.3 SLC35D3的研究进展第21页
    1.4 生物信息学第21-23页
        1.4.1 核酸序列的生物信息学分析第22页
        1.4.2 蛋白质序列的生物信息学分析第22-23页
        1.4.3 蛋白质序列的比对和系统发生分析第23页
    1.5 本研究的目的意义第23-25页
2 材料与方法第25-41页
    2.1 试验材料第25-29页
        2.1.1 试验动物及样品采集第25页
        2.1.2 主要试剂第25页
        2.1.3 主要仪器第25-26页
        2.1.4 常用试剂的配制第26-27页
        2.1.5 引物第27-29页
    2.2 试验方法第29-41页
        2.2.1 总RNA的提取及检测第29页
        2.2.2 cDNA序列的获得第29-35页
        2.2.3 生物信息学分析和系统进化分析第35页
        2.2.4 SLC35D3基因的组织表达研究第35-36页
        2.2.5 SLC35D3蛋白的组织表达研究第36-38页
        2.2.6 猪原代肌内前体脂肪细胞的分离培养第38-40页
        2.2.7 干扰SLC35D3对猪肌内前体脂肪细胞分化的影响第40-41页
3 结果与分析第41-57页
    3.1 SLC35D3基因的克隆及序列分析第41-48页
        3.1.1 SLC35D3基因的克隆第41-42页
        3.1.2 核苷酸序列分析第42-43页
        3.1.3 氨基酸序列分析与蛋白的功能预测第43-46页
        3.1.4 蛋白氨基酸序列的同源性和系统进化分析第46-48页
    3.2 SLC35D3基因的组织表达规律及品种差异研究第48-51页
        3.2.1 荧光定量PCR扩增的熔解曲线分析第48页
        3.2.2 SLC35D3基因mRNA表达分析第48-50页
        3.2.3 SLC35D3蛋白表达分析第50-51页
    3.3 猪肌内前体脂肪细胞的分离培养与鉴定第51-53页
        3.3.1 猪肌内前体脂肪细胞传代培养第51页
        3.3.2 猪肌内前体脂肪细胞不同分化阶段形态观察第51-52页
        3.3.3 油红O染色鉴定第52-53页
        3.3.4 肌内脂肪细胞分化阶段mRNA表达第53页
    3.4 干扰SLC35D3对猪肌内脂肪沉积的影响第53-57页
        3.4.1 siRNA的设计及筛选第53-54页
        3.4.2 转染SLC35D3-siRNA对脂肪代谢关键功能基因表达的影响第54-56页
        3.4.3 转染SLC35D3-siRNA对培养基中游离脂肪酸含量的影响第56页
        3.4.4 转染SLC35D3-siRNA对细胞内脂滴含量的影响第56-57页
4 讨论第57-61页
    4.1 SLC35D3基因的组织表达特点以及在各种脂肪组织及各品种猪之间表达比较分析第57-58页
    4.2 SLC35D3蛋白结构预测与其功能关系第58-59页
    4.3 SLC35D3基因氨基酸序列与其它动物的相似性比较第59-60页
    4.4 SLC35D3对脂肪细胞分解合成代谢的影响分析第60-61页
5 结论第61-62页
参考文献第62-72页
致谢第72-73页
攻读学位期间发表论文情况第73页

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