中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第14-25页 |
1.1 肌内脂肪形成及影响因素 | 第14-17页 |
1.1.1 肌内脂肪与肉品质 | 第14-15页 |
1.1.2 肌内脂肪发生、生成与分布 | 第15-16页 |
1.1.3 影响猪肌内脂肪沉积的因素 | 第16页 |
1.1.4 影响猪脂肪沉积的基因 | 第16-17页 |
1.2 动物脂肪组织和肌内脂肪代谢调控的研究进展 | 第17-21页 |
1.2.1 脂肪形成最主要的转录因子-PPARγ | 第17-18页 |
1.2.2 C/EBPs家族 | 第18页 |
1.2.3 ADD1/SREBP1家族 | 第18-19页 |
1.2.4 其他转录因子 | 第19-21页 |
1.3 SLC35D3的研究进展 | 第21页 |
1.4 生物信息学 | 第21-23页 |
1.4.1 核酸序列的生物信息学分析 | 第22页 |
1.4.2 蛋白质序列的生物信息学分析 | 第22-23页 |
1.4.3 蛋白质序列的比对和系统发生分析 | 第23页 |
1.5 本研究的目的意义 | 第23-25页 |
2 材料与方法 | 第25-41页 |
2.1 试验材料 | 第25-29页 |
2.1.1 试验动物及样品采集 | 第25页 |
2.1.2 主要试剂 | 第25页 |
2.1.3 主要仪器 | 第25-26页 |
2.1.4 常用试剂的配制 | 第26-27页 |
2.1.5 引物 | 第27-29页 |
2.2 试验方法 | 第29-41页 |
2.2.1 总RNA的提取及检测 | 第29页 |
2.2.2 cDNA序列的获得 | 第29-35页 |
2.2.3 生物信息学分析和系统进化分析 | 第35页 |
2.2.4 SLC35D3基因的组织表达研究 | 第35-36页 |
2.2.5 SLC35D3蛋白的组织表达研究 | 第36-38页 |
2.2.6 猪原代肌内前体脂肪细胞的分离培养 | 第38-40页 |
2.2.7 干扰SLC35D3对猪肌内前体脂肪细胞分化的影响 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-57页 |
3.1 SLC35D3基因的克隆及序列分析 | 第41-48页 |
3.1.1 SLC35D3基因的克隆 | 第41-42页 |
3.1.2 核苷酸序列分析 | 第42-43页 |
3.1.3 氨基酸序列分析与蛋白的功能预测 | 第43-46页 |
3.1.4 蛋白氨基酸序列的同源性和系统进化分析 | 第46-48页 |
3.2 SLC35D3基因的组织表达规律及品种差异研究 | 第48-51页 |
3.2.1 荧光定量PCR扩增的熔解曲线分析 | 第48页 |
3.2.2 SLC35D3基因mRNA表达分析 | 第48-50页 |
3.2.3 SLC35D3蛋白表达分析 | 第50-51页 |
3.3 猪肌内前体脂肪细胞的分离培养与鉴定 | 第51-53页 |
3.3.1 猪肌内前体脂肪细胞传代培养 | 第51页 |
3.3.2 猪肌内前体脂肪细胞不同分化阶段形态观察 | 第51-52页 |
3.3.3 油红O染色鉴定 | 第52-53页 |
3.3.4 肌内脂肪细胞分化阶段mRNA表达 | 第53页 |
3.4 干扰SLC35D3对猪肌内脂肪沉积的影响 | 第53-57页 |
3.4.1 siRNA的设计及筛选 | 第53-54页 |
3.4.2 转染SLC35D3-siRNA对脂肪代谢关键功能基因表达的影响 | 第54-56页 |
3.4.3 转染SLC35D3-siRNA对培养基中游离脂肪酸含量的影响 | 第56页 |
3.4.4 转染SLC35D3-siRNA对细胞内脂滴含量的影响 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-61页 |
4.1 SLC35D3基因的组织表达特点以及在各种脂肪组织及各品种猪之间表达比较分析 | 第57-58页 |
4.2 SLC35D3蛋白结构预测与其功能关系 | 第58-59页 |
4.3 SLC35D3基因氨基酸序列与其它动物的相似性比较 | 第59-60页 |
4.4 SLC35D3对脂肪细胞分解合成代谢的影响分析 | 第60-61页 |
5 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第73页 |