摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第13-28页 |
1.1 蛋白质胞内递送的应用前景 | 第13-14页 |
1.2 蛋白质胞内递送的技术手段 | 第14-22页 |
1.2.1 直接对靶蛋白修饰穿膜肽 | 第15-16页 |
1.2.2 纳米载体递送蛋白质 | 第16-22页 |
1.2.2.1 脂质体纳米材料 | 第17-18页 |
1.2.2.2 阳离子高分子纳米材料 | 第18-19页 |
1.2.2.3 无机纳米材料 | 第19-22页 |
1.2.2.3.1 碳纳米管 | 第19-20页 |
1.2.2.3.2 金纳米颗粒 | 第20-21页 |
1.2.2.3.3 介孔二氧化硅纳米材料 | 第21-22页 |
1.2.2.4 蛋白质类载体 | 第22页 |
1.3 蛋白质胞内递送的关键技术问题 | 第22-23页 |
1.4 氟化高分子作为蛋白质胞内递送载体 | 第23-26页 |
1.4.1 氟化高分子在基因递送中的优异性能 | 第23-24页 |
1.4.2 氟化高分子的性质 | 第24-26页 |
1.5 论文研究思路与研究内容 | 第26-28页 |
第二章 材料与方法 | 第28-33页 |
2.1 实验材料 | 第28页 |
2.2 实验方法 | 第28-33页 |
2.2.1 氟化烷烃链,烷烃链,环烷烃链修饰的PEI的合成 | 第28页 |
2.2.2 BSA-FITC的合成 | 第28-29页 |
2.2.3 BSA-PT的合成 | 第29页 |
2.2.4 TAT偶联的BSA-FITC的合成 | 第29页 |
2.2.5 高分子/蛋白质复合物的制备 | 第29页 |
2.2.6 细胞培养 | 第29-30页 |
2.2.7 蛋白质胞内递送实验 | 第30页 |
2.2.8 高分子载体的细胞内吞实验 | 第30页 |
2.2.9 Β-GAL蛋白质活性检测 | 第30-31页 |
2.2.10 细胞毒性测试 | 第31页 |
2.2.11 纳米复合物的圆二色谱分析 | 第31-32页 |
2.2.12 BCA蛋白质测定 | 第32-33页 |
第三章 实验结果 | 第33-65页 |
3.1 引言 | 第33-34页 |
3.2 实验结果 | 第34-64页 |
3.2.1 聚乙烯亚胺阳离子高分子蛋白质材料库的筛选 | 第34-40页 |
3.2.1.1 聚乙烯亚胺阳离子高分子蛋白质胞内递送材料库的合成与表征 | 第34-37页 |
3.2.1.2 蛋白质胞内递送材料库转染效率的筛选 | 第37-39页 |
3.2.1.3 F4-1,F3-3在HeLa细胞上转染BSA-FITC的转染效率 | 第39页 |
3.2.1.4 氟化高分子转染蛋白质的效率与蛋白质修饰穿膜肽的转染效率比较 | 第39-40页 |
3.2.2 氟化高分子在蛋白质胞内递送中的氟效应 | 第40-49页 |
3.2.2.1 对比加入胎酚蓝前后F4-1,F3-3,A4-1,A3-3在HeLa细胞上转染BSA-FITC蛋白质的效率 | 第41-42页 |
3.2.2.2 A4-1,A3-3与BSA-FITC蛋白质复合物在延长转染时间下的转染效率 | 第42页 |
3.2.2.3 F4-1,F3-3,A4-1,A3-3与BSA蛋白质复合物内吞通路的比较 | 第42-44页 |
3.2.2.4 F4-1,F3-3,A4-1,A3-3与BSA蛋白质复合物的性质表征 | 第44-45页 |
3.2.2.5 F4-1,F3-3,A4-1,A3-3与BSA蛋白质复合物的圆二色谱 | 第45-46页 |
3.2.2.6 F4-1,F3-3,A4-1,A3-3的细胞内吞速度 | 第46-47页 |
3.2.2.7 F4-1,F3-3,A4-1,A3-3的细胞毒性 | 第47-48页 |
3.2.2.8 环烷烃链修饰的PEI转染BSA-FITC蛋白质的效率 | 第48-49页 |
3.2.3 氟化高分子在蛋白质胞内递送中的结构与功能关系 | 第49-54页 |
3.2.3.1 氟化高分子的蛋白质胞内递送效率 | 第49-50页 |
3.2.3.2 氟化高分子与BSA蛋白质复合物的性质表征 | 第50-52页 |
3.2.3.3 F4-1,F4-4,F3-3及F3-4与BSA-Pt蛋白质复合物的透射电镜形貌观察 | 第52-53页 |
3.2.3.4 BCA检测法检测F4-1,F4-4,F3-3及F3-4与BSA蛋白质的复合效率 | 第53-54页 |
3.2.4 氟化高分子作为蛋白质胞内递送载体的普适性 | 第54-64页 |
3.2.4.1 F4-1,F3-3转染HIN3T3及HEK293细胞系 | 第54-55页 |
3.2.4.2 F4-1,F3-3在HeLa细胞上转染小肽 | 第55-56页 |
3.2.4.3 F4-1,F3-3在HeLa细胞上转染Saporin蛋白质 | 第56-57页 |
3.2.4.4 F4-4,F3-3在HeLa细胞上转染β-Gal蛋白质 | 第57-58页 |
3.2.4.5 F4-1,F3-3与不同蛋白质复合物的表征 | 第58-60页 |
3.2.4.6 氟化高分子与BSA蛋白质的复合效率 | 第60-61页 |
3.2.4.7 体外模拟氟化高分子与蛋白质复合物的竞争性释放 | 第61页 |
3.2.4.8 肝素钠竞争性结合氟化高分子,释放β-gal蛋白质的蛋白质活性检测 | 第61-62页 |
3.2.4.9 β-gal蛋白质与F4-1,F3-3复合后的圆二色性检测 | 第62-63页 |
3.2.4.10 蛋白质浓度对转染效率的影响 | 第63-64页 |
3.3 本章小结 | 第64-65页 |
第四章 讨论与展望 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
附录 | 第75-83页 |
科研成果 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |