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水稻耐淹基因识别序列及下游调控基因的初步研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
目录第8-11页
引言第11-13页
1 文献综述第13-21页
    1.1 水稻的耐淹机制第13-17页
        1.1.1 水稻对水淹环境的适应性第13-14页
        1.1.2 与水稻耐淹性有关的三种激素第14页
        1.1.3 乙烯响应第14页
        1.1.4 水稻应对淹涝胁迫的两种策略第14-17页
            1.1.4.1 逃逸策略第16页
            1.1.4.2 静止策略第16-17页
    1.2 水稻受到淹涝胁迫时的糖类代谢第17-19页
        1.2.1 糖类代谢第17-18页
        1.2.2 终产物代谢第18-19页
    1.3 结论及研究前景第19-21页
2. 实验材料与方法第21-46页
    2.1 实验材料第21-27页
        2.1.1 水稻品种、菌株、载体及引物第21-24页
        2.1.2 工具酶第24页
        2.1.3 其他试剂及试剂盒第24页
        2.1.4 试剂配制第24-27页
            2.1.4.1 培养基第24页
            2.1.4.2 抗生素贮存液第24-25页
            2.1.4.3 化学贮存液第25页
            2.1.4.4 质粒提取试剂第25页
            2.1.4.5 植物基因组DNA提取试剂第25页
            2.1.4.6 电泳缓冲液及试剂第25-26页
            2.1.4.7 GST融合蛋白纯化所需试剂第26页
            2.1.4.8 GUS染色液所需试剂第26-27页
            2.1.4.9 基因缺失实验所需试剂第27页
        2.1.5 仪器设备第27页
    2.2 实验方法第27-46页
        2.2.1 Sub1A Promoter缺失研究第27-35页
            2.2.1.1 植物基因组DNA的提取第27-28页
            2.2.1.2 目的基因的扩增及测序第28-31页
            2.2.1.3 Sub1A Promoter缺失实验第31-32页
            2.2.1.4 GUS植物表达载体的构建第32页
            2.2.1.5 农杆菌感受态制备、农杆菌转化及农杆菌质粒的提取第32-34页
            2.2.1.6 水稻的遗传转化第34页
            2.2.1.7 PCR鉴定转基因植株第34页
            2.2.1.8 GUS染色验证转基因植株第34-35页
            2.2.1.9 潮霉素筛选T1代种子第35页
        2.2.2 耐淹基因Snorkel1(SK1)、Snrokel2(SK2)作用机制研究第35-46页
            2.2.2.1 植物基因组DNA的提取第35页
            2.2.2.2 植物总RNA的提取第35-36页
            2.2.2.3 目的基因的扩增及测序第36-38页
            2.2.2.4 Genome walking扩增SK1、SK2启动子区序列第38-40页
            2.2.2.5 植物表达载体构建第40-43页
                2.2.2.5.1 糖皮质激素诱导表达载体的构建第40-41页
                2.2.2.5.2 GA合成突变体转化载体的构建第41-42页
                2.2.2.5.3 带标签的植物表达载体的构建第42-43页
            2.2.2.6 水稻的遗传转化第43页
            2.2.2.7 PCR鉴定转基因植株第43-44页
            2.2.2.8 GST-SK1/SK2融合蛋白的原核表达第44页
            2.2.2.9 GST-SK1/SK2融合蛋白的纯化、透析及定量第44-46页
3. 结果与分析第46-82页
    3.1 Sub1A Promoter缺失研究第46-57页
        3.1.1 植物基因组DNA的提取第46页
        3.1.2 目的基因的扩增及测序第46-47页
        3.1.3 Sub1A Promoter缺失实验第47-51页
        3.1.4 GUS植物表达载体的构建第51-53页
        3.1.5 水稻的遗传转化第53-54页
        3.1.6 PCR鉴定转基因植株第54-56页
        3.1.7 GUS染色鉴定阳性植株第56页
        3.1.8 潮霉素筛选T1代种子第56-57页
    3.2 耐淹基因Snorkel1(SK1)、Snrokel2(SK2)作用机制研究第57-78页
        3.2.1 植物基因组DNA的提取第57-58页
        3.2.2 植物总RNA的提取第58页
        3.2.3 目的基因的扩增及测序第58-61页
        3.2.4 Genome walking扩增SK1、SK2启动子区序列第61-71页
        3.2.5 植物表达载体构建第71-74页
            3.2.5.1 糖皮质激素诱导表达载体的构建第71-72页
            3.2.5.2 GA合成突变体转化载体的构建第72-74页
            3.2.5.3 带标签的植物表达载体的构建第74页
        3.2.6 PCR鉴定转基因植株第74-75页
        3.2.7 GST-SK1/SK2融合蛋白的原核表达第75-78页
    3.3 讨论第78-82页
结论第82-84页
参考文献第84-91页
附录第91-93页
后记第93-94页
攻读学位期间取得的科研成果清单第94页

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