摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第8-11页 |
引言 | 第11-13页 |
1 文献综述 | 第13-21页 |
1.1 水稻的耐淹机制 | 第13-17页 |
1.1.1 水稻对水淹环境的适应性 | 第13-14页 |
1.1.2 与水稻耐淹性有关的三种激素 | 第14页 |
1.1.3 乙烯响应 | 第14页 |
1.1.4 水稻应对淹涝胁迫的两种策略 | 第14-17页 |
1.1.4.1 逃逸策略 | 第16页 |
1.1.4.2 静止策略 | 第16-17页 |
1.2 水稻受到淹涝胁迫时的糖类代谢 | 第17-19页 |
1.2.1 糖类代谢 | 第17-18页 |
1.2.2 终产物代谢 | 第18-19页 |
1.3 结论及研究前景 | 第19-21页 |
2. 实验材料与方法 | 第21-46页 |
2.1 实验材料 | 第21-27页 |
2.1.1 水稻品种、菌株、载体及引物 | 第21-24页 |
2.1.2 工具酶 | 第24页 |
2.1.3 其他试剂及试剂盒 | 第24页 |
2.1.4 试剂配制 | 第24-27页 |
2.1.4.1 培养基 | 第24页 |
2.1.4.2 抗生素贮存液 | 第24-25页 |
2.1.4.3 化学贮存液 | 第25页 |
2.1.4.4 质粒提取试剂 | 第25页 |
2.1.4.5 植物基因组DNA提取试剂 | 第25页 |
2.1.4.6 电泳缓冲液及试剂 | 第25-26页 |
2.1.4.7 GST融合蛋白纯化所需试剂 | 第26页 |
2.1.4.8 GUS染色液所需试剂 | 第26-27页 |
2.1.4.9 基因缺失实验所需试剂 | 第27页 |
2.1.5 仪器设备 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-46页 |
2.2.1 Sub1A Promoter缺失研究 | 第27-35页 |
2.2.1.1 植物基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
2.2.1.2 目的基因的扩增及测序 | 第28-31页 |
2.2.1.3 Sub1A Promoter缺失实验 | 第31-32页 |
2.2.1.4 GUS植物表达载体的构建 | 第32页 |
2.2.1.5 农杆菌感受态制备、农杆菌转化及农杆菌质粒的提取 | 第32-34页 |
2.2.1.6 水稻的遗传转化 | 第34页 |
2.2.1.7 PCR鉴定转基因植株 | 第34页 |
2.2.1.8 GUS染色验证转基因植株 | 第34-35页 |
2.2.1.9 潮霉素筛选T1代种子 | 第35页 |
2.2.2 耐淹基因Snorkel1(SK1)、Snrokel2(SK2)作用机制研究 | 第35-46页 |
2.2.2.1 植物基因组DNA的提取 | 第35页 |
2.2.2.2 植物总RNA的提取 | 第35-36页 |
2.2.2.3 目的基因的扩增及测序 | 第36-38页 |
2.2.2.4 Genome walking扩增SK1、SK2启动子区序列 | 第38-40页 |
2.2.2.5 植物表达载体构建 | 第40-43页 |
2.2.2.5.1 糖皮质激素诱导表达载体的构建 | 第40-41页 |
2.2.2.5.2 GA合成突变体转化载体的构建 | 第41-42页 |
2.2.2.5.3 带标签的植物表达载体的构建 | 第42-43页 |
2.2.2.6 水稻的遗传转化 | 第43页 |
2.2.2.7 PCR鉴定转基因植株 | 第43-44页 |
2.2.2.8 GST-SK1/SK2融合蛋白的原核表达 | 第44页 |
2.2.2.9 GST-SK1/SK2融合蛋白的纯化、透析及定量 | 第44-46页 |
3. 结果与分析 | 第46-82页 |
3.1 Sub1A Promoter缺失研究 | 第46-57页 |
3.1.1 植物基因组DNA的提取 | 第46页 |
3.1.2 目的基因的扩增及测序 | 第46-47页 |
3.1.3 Sub1A Promoter缺失实验 | 第47-51页 |
3.1.4 GUS植物表达载体的构建 | 第51-53页 |
3.1.5 水稻的遗传转化 | 第53-54页 |
3.1.6 PCR鉴定转基因植株 | 第54-56页 |
3.1.7 GUS染色鉴定阳性植株 | 第56页 |
3.1.8 潮霉素筛选T1代种子 | 第56-57页 |
3.2 耐淹基因Snorkel1(SK1)、Snrokel2(SK2)作用机制研究 | 第57-78页 |
3.2.1 植物基因组DNA的提取 | 第57-58页 |
3.2.2 植物总RNA的提取 | 第58页 |
3.2.3 目的基因的扩增及测序 | 第58-61页 |
3.2.4 Genome walking扩增SK1、SK2启动子区序列 | 第61-71页 |
3.2.5 植物表达载体构建 | 第71-74页 |
3.2.5.1 糖皮质激素诱导表达载体的构建 | 第71-72页 |
3.2.5.2 GA合成突变体转化载体的构建 | 第72-74页 |
3.2.5.3 带标签的植物表达载体的构建 | 第74页 |
3.2.6 PCR鉴定转基因植株 | 第74-75页 |
3.2.7 GST-SK1/SK2融合蛋白的原核表达 | 第75-78页 |
3.3 讨论 | 第78-82页 |
结论 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-91页 |
附录 | 第91-93页 |
后记 | 第93-94页 |
攻读学位期间取得的科研成果清单 | 第94页 |