| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 朊蛋白及朊病毒疾病概述 | 第13-26页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 1. 朊病毒的发现 | 第14-15页 |
| 2. 朊病毒的研究进展 | 第15-16页 |
| 2.1 朊病毒致病因子(protein only)的提出 | 第15-16页 |
| 2.2 PrP是朊病毒的主要组成部分 | 第16页 |
| 2.3 PrP~(Sc)的特殊性质 | 第16页 |
| 3. 朊蛋白的序列和结构 | 第16-18页 |
| 3.1 朊蛋白的一级结构 | 第17-18页 |
| 3.2 朊蛋白的三维结构 | 第18页 |
| 4. 朊蛋白的生理功能 | 第18-19页 |
| 5. 朊病毒致病的分子机制 | 第19-22页 |
| 5.1 PrP~C和PrP~(Sc)的特性 | 第19-20页 |
| 5.2 朊蛋白构象的转变 | 第20-21页 |
| 5.3 与朊蛋白空间构象转变相关的其他蛋白质 | 第21页 |
| 5.4 致病性朊蛋白的复制增殖 | 第21-22页 |
| 6. 朊病毒的致病机制 | 第22-23页 |
| 6.1 PrP~(Sc)诱导内质网压力的凋亡途径 | 第22-23页 |
| 6.2 PrP~(Sc)抑制泛素蛋白酶体活性 | 第23页 |
| 7. 朊病毒类疾病的诊断及防治 | 第23-26页 |
| 7.1 朊病毒病的诊断 | 第23-24页 |
| 7.2 朊病毒病的防治 | 第24-26页 |
| 第二章 自吞噬 | 第26-42页 |
| 引言 | 第26页 |
| 1 自吞噬的发现 | 第26-27页 |
| 2 自吞噬的分子机制 | 第27-31页 |
| 2.1 吞噬泡的形成 | 第28-29页 |
| 2.2 LC3/ATG8剪切 | 第29-30页 |
| 2.3 自吞噬泡底物的选择 | 第30-31页 |
| 2.4 自吞噬泡和溶酶体融合 | 第31页 |
| 3 自吞噬的生理功能 | 第31-33页 |
| 3.1 自吞噬抵抗代谢压力 | 第31-32页 |
| 3.2 自吞噬保持基因组的稳定 | 第32页 |
| 3.3 自吞噬和细胞存活 | 第32-33页 |
| 4 自吞噬的检测方法 | 第33-36页 |
| 4.1 电镜检测 | 第33-34页 |
| 4.2 荧光显微镜检测 | 第34-35页 |
| 4.3 生化试验 | 第35-36页 |
| 5 自吞噬在疾病中的意义 | 第36-42页 |
| 5.1 自吞噬和神经退化性疾病 | 第36-37页 |
| 5.2 自吞噬和肝病 | 第37-38页 |
| 5.3 自吞噬和肌肉疾病 | 第38-39页 |
| 5.4 自吞噬和心脏病 | 第39-40页 |
| 5.5 自吞噬和癌症 | 第40页 |
| 5.6 自吞噬和衰老 | 第40-42页 |
| 第三章 RTN3 | 第42-47页 |
| 引言 | 第42页 |
| 1. RTN3及其家族概述 | 第42-44页 |
| 1.1. RTN家族分类和进化 | 第42页 |
| 1.2 RTN蛋白组织分布 | 第42-43页 |
| 1.3 RTN3蛋白的亚细胞定位 | 第43-44页 |
| 2. RTN3的结构 | 第44页 |
| 3. RTN3的功能 | 第44-46页 |
| 3.1 影响内质网钙离子平衡 | 第44-45页 |
| 3.2 RTN3调控BACE1的活性调控β-淀粉样肽的产生 | 第45-46页 |
| 4. RTN3在神经退行性疾病中的作用 | 第46-47页 |
| 第四章 实验材料和方法 | 第47-63页 |
| 1. 实验材料与设备 | 第47-51页 |
| 1.1 实验仪器 | 第47-48页 |
| 1.2 材料与试剂 | 第48-49页 |
| 1.3 培养基及溶液的配置 | 第49-51页 |
| 2 质粒的构建 | 第51-55页 |
| 2.1 PCR产物的回收与酶切 | 第51-53页 |
| 2.2 质粒提取和酶切 | 第53-54页 |
| 2.3 连接与转化 | 第54-55页 |
| 2.4 单克隆鉴定和保存 | 第55页 |
| 3 细胞的复苏、冻存及培养 | 第55-56页 |
| 4. 细胞的转染 | 第56页 |
| 5. Western Blotting | 第56-57页 |
| 6. 抗蛋白酶K | 第57-58页 |
| 7. 去污剂可溶性 | 第58页 |
| 8. 免疫共沉淀 | 第58页 |
| 9. siRNA干扰 | 第58-59页 |
| 10. RNA提取、反转录和荧光实时定量PCR | 第59-60页 |
| 11. 凋亡检测 | 第60页 |
| 12. MTS法测定细胞活性 | 第60-61页 |
| 13. 自吞噬检测 | 第61页 |
| 14. 免疫荧光染色 | 第61-62页 |
| 15. 双萤光素酶报告基因检测系统 | 第62-63页 |
| 第五章 细胞质表达的人PrP蛋白能够激活内质网压力和诱导RTN3的表达 | 第63-71页 |
| 引言 | 第63页 |
| 1 原生质表达的PrP_(90-231)在细胞质形成聚集体 | 第63-66页 |
| 2 原生质表达的PrP_(90-231)激活内质网压力 | 第66-67页 |
| 3 细胞质表达的PrP_(90-231)激活RTN3 | 第67-68页 |
| 4 原生质表达的PrP_(90-231)诱导细胞凋亡 | 第68-69页 |
| 5 总结 | 第69-71页 |
| 第六章 RTN3能够抑制自吞噬 | 第71-78页 |
| 引言 | 第71页 |
| 1 抑制RNT3的表达加强thapsigargin诱导的自吞噬 | 第71-75页 |
| 2 抑制RNT3的表达加强了PrP_(90-231)诱导的自吞噬 | 第75-77页 |
| 3 讨论 | 第77-78页 |
| 第七章 RTN3促进Bcl-2抑制自吞噬的诱导 | 第78-83页 |
| 引言 | 第78页 |
| 1 内质网定位的Bcl-2抑制thapsigargin诱导的自吞噬发生 | 第78-80页 |
| 2 RTN3加强Bcl-2和Becilin1的结合 | 第80-81页 |
| 3 RTN3加强Bcl-2对自吞噬的抑制 | 第81-82页 |
| 4 讨论 | 第82-83页 |
| 第八章 RTN3抑制原生质PrP聚集体的清除 | 第83-86页 |
| 第九章 抑制RTN3的表达能够加强自吞噬的诱导,从而能够恢复或者减轻原生质表达的PrP引起的泛素蛋白酶体活性的减弱,内质网压力的诱导和促进细胞存活 | 第86-90页 |
| 研究总结 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-101页 |
| 博士期间发表论文 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
