| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第13-15页 |
| 目录 | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-34页 |
| 1.1 青蒿及青蒿素简介 | 第17-18页 |
| 1.2 转录因子在植物次生代谢调控中的作用 | 第18-23页 |
| 1.2.1 转录因子在生物碱代谢调控中的作用 | 第19-20页 |
| 1.2.2 转录调控因子在萜类代谢中的作用 | 第20-22页 |
| 1.2.3 转录因子在苯丙烷类及其衍生物代谢调控中的作用 | 第22-23页 |
| 1.2.4 结语 | 第23页 |
| 1.3 茉莉酸类物质在植物次生代谢调控中的作用 | 第23-29页 |
| 1.3.1 茉莉酸类物质的生物合成途径 | 第24-25页 |
| 1.3.2 茉莉酸类物质在植物次生代谢中的作用 | 第25-28页 |
| 1.3.3 茉莉酸类物质在调控植物防御相关基因方面的作用 | 第28页 |
| 1.3.4 总结与展望 | 第28-29页 |
| 1.4 过表达青蒿素合成途径的关键酶基因提高青蒿中青蒿素的含量 | 第29-32页 |
| 1.4.1 背景 | 第29页 |
| 1.4.2 青蒿素合成途径中的关键基因 | 第29-32页 |
| 1.4.3 总结和展望 | 第32页 |
| 1.5 本研究的目的及实验技术路线 | 第32-34页 |
| 第二章 青蒿AP2/ERF类转录因子的克隆和功能研究 | 第34-84页 |
| 2.1 引言 | 第34-35页 |
| 2.2 材料和方法 | 第35-60页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第35-37页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第37-60页 |
| 2.3 结果和讨论 | 第60-84页 |
| 2.3.1 青蒿AaERF类转录因子的克隆和命名 | 第60-61页 |
| 2.3.2 AaORA全长cDNA的克隆与序列分析 | 第61-62页 |
| 2.3.3 青蒿叶片不同发育阶段的表达分析 | 第62-64页 |
| 2.3.4 AaERFs在青蒿不同组织部位的表达分析 | 第64-67页 |
| 2.3.5 茉莉 酸甲酯和损失处理后AaORA基因的表达分析 | 第67-69页 |
| 2.3.6 亚细胞定位 | 第69-71页 |
| 2.3.7 AaORA的启动子活性分析 | 第71-72页 |
| 2.3.8 AaORA在青蒿中过量表达 | 第72-75页 |
| 2.3.9 利用 RNAi技术抑制AaORA在青蒿中的表达 | 第75-77页 |
| 2.3.10 酵母单杂交检测AaORA和ADS 、 AaERF1启动子的结合 | 第77-79页 |
| 2.3.11 GUS定量检测 AaORA对ADS启动子的调控 | 第79-80页 |
| 2.3.12 AaORA在植物抗灰霉菌中发挥重要作用 | 第80-82页 |
| 2.3.13 讨论和小结 | 第82-84页 |
| 第三章 青蒿茉莉酸合成途径关键酶基因的克隆和功能分析 | 第84-112页 |
| 3.1 引言 | 第84-85页 |
| 3.2 材料和方法 | 第85-92页 |
| 3.2.1 实验材料和试剂 | 第85-86页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第86-92页 |
| 3.3 实验结果和讨论 | 第92-112页 |
| 3.3.1. AaAOC和 AaA OS 基因的克隆 | 第92-93页 |
| 3.3.2 AaAOC蛋白的序列分析 | 第93-96页 |
| 3.3.3 AaAOC蛋白的原核表达 | 第96-97页 |
| 3.3.4 AaAOC蛋白的进化分析 | 第97-98页 |
| 3.3.5 AaAOC的拷贝数分析 | 第98-99页 |
| 3.3.6 AaAOC的启动子克隆和 分析 | 第99-100页 |
| 3.3.7 AaAOC的表达模式 | 第100-102页 |
| 3.3.8 AaAOC的激素和胁迫处理 | 第102-103页 |
| 3.3.9 AaAOC过量表达转基因青蒿的鉴定及RT-Q- PCR分析 | 第103-104页 |
| 3.3.10 过量表达 AaAOC导致植物内源茉莉酸含量增加 | 第104-106页 |
| 3.3.11 过量表达 AaAOC导致青蒿油性腺毛增加 | 第106-108页 |
| 3.3.12 过量表达 AaAOC导致转基因青蒿中次生代谢物质含量增高 | 第108-109页 |
| 3.3.13 过表达AaAOC转基因青蒿中部分青蒿素合成途径关键基因表达量升高 | 第109-110页 |
| 3.3.14 小结和讨论 | 第110-112页 |
| 第四章 采用多基因共转化提高青蒿中青蒿素含量的研究 | 第112-121页 |
| 4.1 引言 | 第112页 |
| 4.2 实验方法 | 第112-114页 |
| 4.2.1 PCR扩增目的基因的编码区 | 第112页 |
| 4.2.2 大肠杆菌DH5α感受态的制备及转化 | 第112-113页 |
| 4.2.3 植物表达载体pCAM BI A2300- ACR 的构建 | 第113页 |
| 4.2.4 青蒿叶片的遗传转化 | 第113-114页 |
| 4.2.5 转基因青蒿的分子检测 | 第114页 |
| 4.3 实验结果 | 第114-120页 |
| 4.3.1 青蒿叶片的遗传转化 | 第114-116页 |
| 4.3.2 转基因青蒿的PCR检测 | 第116页 |
| 4.3.3 转基因青蒿的Southern blot分析 | 第116-117页 |
| 4.3.4 转基因青蒿中各基因表达的RT-Q- PCR分析 | 第117-119页 |
| 4.3.5 转基因青蒿中青蒿素含量的测定 | 第119-120页 |
| 4.4 讨论 | 第120-121页 |
| 第五章 总结和展望 | 第121-125页 |
| 5.1 研究总结 | 第121-123页 |
| 5.2 创新点 | 第123页 |
| 5.3 后续工作展望 | 第123-125页 |
| 参考文献 | 第125-139页 |
| 附录 | 第139-146页 |
| 致谢 | 第146-147页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第147-150页 |
| 攻读博士学位期间申请的专利 | 第150页 |
