摘要 | 第4-5页 |
Abstracts | 第5-6页 |
1 引言 | 第10-20页 |
1.1 白灵侧耳概述 | 第10页 |
1.1.1 我国白灵侧耳分布及分类地位 | 第10页 |
1.1.2 形态特征及食药用价值 | 第10页 |
1.2 外界因素对食用菌结实的影响 | 第10-13页 |
1.2.1 营养因素 | 第11-12页 |
1.2.1.1 碳源 | 第11页 |
1.2.1.2 氮源 | 第11页 |
1.2.1.3 碳氮比 | 第11页 |
1.2.1.4 矿质元素 | 第11页 |
1.2.1.5 生长激素 | 第11-12页 |
1.2.2 环境因素 | 第12-13页 |
1.2.2.1 光 | 第12页 |
1.2.2.2 温度 | 第12-13页 |
1.2.2.3 湿度 | 第13页 |
1.2.2.4 通风 | 第13页 |
1.3 遗传因素对食用菌结实的影响 | 第13-15页 |
1.3.1 与多种食用菌结实相关的基因及蛋白 | 第13-14页 |
1.3.2 与食用菌结实相关的其他基因及蛋白 | 第14-15页 |
1.4 食用菌领域基因差异表达的研究方法 | 第15-19页 |
1.4.1 基因表达系列分析(SAGE) | 第16页 |
1.4.2 代表性差异分析(RDA) | 第16-17页 |
1.4.3 抑制性消减杂交(SSH) | 第17页 |
1.4.4 mRNA 差异显示技术(DDRT-PCR) | 第17-19页 |
1.4.4.1 mRNA 差异显示技术概述 | 第17-18页 |
1.4.4.2 mRNA 差异显示技术在食用菌研究中的应用 | 第18页 |
1.4.4.3 mRNA 差异显示技术的优缺点 | 第18-19页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
2 试验材料 | 第20-24页 |
2.1 供试菌株 | 第20页 |
2.2 供试培养基及制备 | 第20页 |
2.3 供试试剂 | 第20-23页 |
2.3.1 RNA 提取与纯化试剂 | 第20-21页 |
2.3.2 反转录试剂盒 | 第21页 |
2.3.3 琼脂糖凝胶电泳试剂 | 第21页 |
2.3.4 聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳试剂 | 第21页 |
2.3.5 差异显示 PCR 反应试剂 | 第21-22页 |
2.3.6 胶回收试剂盒 | 第22页 |
2.3.7 T 克隆试剂 | 第22-23页 |
2.4 供试仪器 | 第23-24页 |
3 试验方法 | 第24-32页 |
3.1 白灵菇菌丝体的培养及原基的获得 | 第24页 |
3.2 总 RNA 提取 | 第24-25页 |
3.2.1 RNA 提取预处理 | 第24页 |
3.2.2 RNA 提取(LiCl 沉淀法) | 第24-25页 |
3.2.3 消解 RNA 中的 DNA 污染 | 第25页 |
3.3 cDNA 第一链的合成 | 第25-26页 |
3.4 内参基因的扩增 | 第26页 |
3.5 mRNA 差异显示分析 | 第26-27页 |
3.6 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第27页 |
3.7 差异条带回收及二次扩增 | 第27-28页 |
3.8 目的片段的回收及纯化 | 第28页 |
3.9 差异片段克隆 | 第28-30页 |
3.9.1 差异片段与 T 载体连接 | 第28-29页 |
3.9.2 转化 | 第29页 |
3.9.3 阳性克隆检测 | 第29-30页 |
3.10 半定量 PCR 验证 | 第30-31页 |
3.11 差异片段的同源性分析 | 第31-32页 |
4 结果与分析 | 第32-38页 |
4.1 总 RNA 提取分析 | 第32页 |
4.2 内参基因扩增 | 第32-33页 |
4.3 差异显示分析 | 第33-34页 |
4.4 片段回收及二次扩增 | 第34-35页 |
4.5 克隆测序及半定量 PCR 验证 | 第35-36页 |
4.6 发育相关差异基因片段序列分析 | 第36-38页 |
5 讨论 | 第38-41页 |
5.1 差异片段在发育中的作用机制 | 第38-39页 |
5.2 本研究存在的问题及对策 | 第39-41页 |
6 结论 | 第41-42页 |
附录 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-52页 |
作者简历 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |