摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
第一章 绪论 | 第17-21页 |
第二章 染料木素衍生物WH-20对人MCF-7 乳腺癌细胞增殖的影响 | 第21-31页 |
2.1 仪器与材料 | 第21-23页 |
2.1.1 实验仪器 | 第21页 |
2.1.2 实验耗材与试剂 | 第21-22页 |
2.1.3 主要溶液的配制 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-25页 |
2.2.1 细胞培养 | 第23页 |
2.2.2 MTT法检测MCF-7 乳腺癌细胞的增殖 | 第23-24页 |
2.2.3 MCF-7 乳腺癌细胞平板克隆形成实验 | 第24页 |
2.2.4 WB检测MCF-7 乳腺癌细胞中CyclinD1蛋白的表达 | 第24页 |
2.2.5 PI染色流式细胞术检测MCF-7 乳腺癌细胞周期 | 第24-25页 |
2.2.6 统计学分析 | 第25页 |
2.3 实验结果 | 第25-30页 |
2.3.1 MTT法检测不同浓度他莫昔芬、染料木素、染料木素衍生物WH-20对MCF-7 乳腺癌细胞的增殖 | 第25-26页 |
2.3.2 WH-20对MCF-7 乳腺癌细胞平板克隆形成能力 | 第26-27页 |
2.3.3 MTT法检测不同时间段WH-20对MCF-7 乳腺癌细胞的增殖 | 第27-28页 |
2.3.4 WB检测不同浓度和时间的WH-20对MCF-7 乳腺癌细胞中CyclinD1蛋白的表达影响 | 第28-29页 |
2.3.5 WH-20对MCF-7 乳腺癌细胞周期影响 | 第29-30页 |
2.4 小结 | 第30-31页 |
第三章 染料木素衍生物WH-20对人MCF-7 乳腺癌细胞的迁移和侵袭的影响 | 第31-39页 |
3.1 仪器和材料 | 第31-32页 |
3.1.1 实验仪器 | 第31页 |
3.1.2 实验耗材与试剂 | 第31-32页 |
3.1.3 主要溶液的配制 | 第32页 |
3.2 实验方法 | 第32-34页 |
3.2.1 细胞培养 | 第32页 |
3.2.2 MCF-7 乳腺癌细胞基质粘附实验 | 第32-33页 |
3.2.3 MCF-7 乳腺癌细胞迁移实验 | 第33页 |
3.2.4 MCF-7 乳腺癌细胞侵袭实验 | 第33页 |
3.2.5 WB检测MCF-7 乳腺癌细胞中MMP9和VEGF蛋白的表达 | 第33-34页 |
3.2.6 统计学分析 | 第34页 |
3.3 实验结果 | 第34-37页 |
3.3.1 WH-20对MCF-7 乳腺癌细胞基质粘附影响 | 第34页 |
3.3.2 WH-20对MCF-7 乳腺癌细胞迁移影响 | 第34-35页 |
3.3.3 WH-20对MCF-7 乳腺癌细胞侵袭实验 | 第35-36页 |
3.3.4 WB检测不同浓度的WH-20对MCF-7 乳腺癌细胞中MMP9和VEGF蛋白的表达影响 | 第36-37页 |
3.4 小结 | 第37-39页 |
第四章 染料木素衍生物WH-20调控Notch信号通路抑制人MCF-7的增殖迁移侵袭 | 第39-51页 |
4.1 仪器和材料 | 第39-40页 |
4.1.1 实验仪器 | 第39页 |
4.1.2 实验耗材与试剂 | 第39-40页 |
4.1.3 主要溶液的配制 | 第40页 |
4.2 实验方法 | 第40-42页 |
4.2.1 细胞培养 | 第40-41页 |
4.2.2 Western blot检测蛋白表达 | 第41页 |
4.2.3 MTT法检测Notch1信号受干扰后经WH-20处理的MCF-7乳腺癌细胞增殖 | 第41页 |
4.2.4 细胞基质黏附实验检测Notch1信号受干扰后经WH-20处理的MCF-7 乳腺癌细胞黏附性 | 第41-42页 |
4.2.5 划痕检测Notch信号受干扰后经WH-20处理的MCF-7 乳腺癌细胞迁移 | 第42页 |
4.2.6 Tanswell检测Notch信号受干扰后经WH-20处理的MCF-7乳腺癌细胞侵袭 | 第42页 |
4.2.7 统计学分析 | 第42页 |
4.3 实验结果 | 第42-50页 |
4.3.1 WH-20抑制MCF-7 细胞Notch信号通路相关蛋白的表达 | 第42-44页 |
4.3.2 WB检测最适合浓度DAPT对Notch1和HES1蛋白表达。 | 第44页 |
4.3.3 WH-20对DAPT处理的MCF-7 细胞增殖影响 | 第44-45页 |
4.3.4 WH-20对使用DAPT的MCF-7 细胞迁移侵袭影响 | 第45-48页 |
4.3.5 WH-20对DAPT处理的MCF-7 细胞Notch信号相关蛋白表达。 | 第48-50页 |
4.4 小结 | 第50-51页 |
第五章 染料木素衍生物WH-20经ERβ 介导Notch信号调控人MCF-7 乳腺癌细胞增殖迁移和侵袭 | 第51-67页 |
5.1 仪器和材料 | 第51-52页 |
5.1.1 实验仪器 | 第51页 |
5.1.2 实验耗材与试剂 | 第51页 |
5.1.3 主要溶液的配制 | 第51-52页 |
5.2 实验方法 | 第52-53页 |
5.2.1 细胞培养 | 第52页 |
5.2.2 分子对接模拟WH-20与ERα 和ERβ 结合能力 | 第52页 |
5.2.3 雌激素受体ERα 和ERβ 阻断 | 第52页 |
5.2.4 ERα 和ERβ 阻断后Notch通路信号分子蛋白表达 | 第52页 |
5.2.5 MTT法检测雌激素受体干扰后经WH-20处理的MCF-7 乳腺癌细胞增殖 | 第52页 |
5.2.6 细胞基质黏附实验检测雌激素受体干扰后经WH-20处理的MCF-7 乳腺癌细胞黏附性 | 第52-53页 |
5.2.7 划痕检测雌激素受体干扰后经WH-20处理的MCF-7 乳腺癌细胞迁移 | 第53页 |
5.2.8 Tanswell检测雌激素受体干扰后经WH-20处理的MCF-7乳腺癌细胞侵袭 | 第53页 |
5.2.9 统计学分析 | 第53页 |
5.3 实验结果 | 第53-66页 |
5.3.1 分子对接模拟WH-20与ERa和ERb蛋白结合能力 | 第53-54页 |
5.3.2 WH-20对MCF-7 细胞中ERa和ERb蛋白表达影响 | 第54-55页 |
5.3.3 WB检测最适ER受体阻断浓度对ERa和ERb蛋白表达 | 第55-56页 |
5.3.4 ERa干扰后WH-20对MCF-7 细胞增殖迁移侵袭的影响 | 第56-59页 |
5.3.5 ERa干扰后WH-20对MCF-7 细胞ERa蛋白表达以及Notch信号通路相关蛋白表达。 | 第59-61页 |
5.3.6 ERβ 干扰后WH-20对MCF-7 细胞增殖迁移侵袭的影响 | 第61-64页 |
5.3.7 ERβ 干扰后WH-20对MCF-7 细胞ERβ 蛋白表达以及Notch信号通路相关蛋白表达。 | 第64-66页 |
5.4 小结 | 第66-67页 |
第六章 讨论 | 第67-71页 |
第七章 结论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-81页 |
文献综述 | 第81-89页 |
参考文献 | 第85-89页 |
附录 | 第89-91页 |
作者攻读学位期间的科研成果 | 第91-93页 |
致谢 | 第93页 |