| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 1 实验仪器与材料试剂 | 第15-21页 |
| 1.1 实验仪器 | 第15-16页 |
| 1.2 细胞株、细菌及质粒来源 | 第16页 |
| 1.3 实验试剂 | 第16-17页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第17-21页 |
| 2 实验方法 | 第21-33页 |
| 2.1 感受态的制备、质粒的转化和提取 | 第21-22页 |
| 2.1.1 氯化钙（CaCl_2）法制备感受态 | 第21页 |
| 2.1.2 质粒的转化 | 第21-22页 |
| 2.1.3 质粒的提取 | 第22页 |
| 2.2 细胞培养 | 第22-24页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第22页 |
| 2.2.2 细胞传代 | 第22页 |
| 2.2.3 细胞冻存 | 第22-23页 |
| 2.2.4 细胞计数 | 第23页 |
| 2.2.5 转染 | 第23页 |
| 2.2.6 稳定株的构建 | 第23-24页 |
| 2.3 热休克方法 | 第24页 |
| 2.4 蛋白质的提取及浓度测定 | 第24-25页 |
| 2.4.1 蛋白质提取 | 第24-25页 |
| 2.4.2 BCA法测蛋白浓度 | 第25页 |
| 2.5 Western Blot | 第25-27页 |
| 2.6 RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.7 反转录 | 第28页 |
| 2.8 Real time PCR | 第28-29页 |
| 2.9 染色质免疫共沉淀（ChIP） | 第29-31页 |
| 2.10 细胞核质分离实验 | 第31-32页 |
| 2.11 HSF1三聚化检测实验 | 第32-33页 |
| 3 实验结果 | 第33-43页 |
| 3.1 敲除ATG7使小鼠成纤维细胞中自噬被阻断，HSP25的表达被激活 | 第33-34页 |
| 3.2 不同应激刺激下，敲除ATG7可以激活MEF细胞中HSP25的蛋白表达 | 第34-35页 |
| 3.3 热激刺激下，敲除ATG7可以提高MEF细胞中HSP25的mRNA表达水平 | 第35-36页 |
| 3.4 敲除小鼠近端肾小管细胞中的ATG7基因可以阻断细胞的自噬，同时激活HSP25的蛋白表达 | 第36-37页 |
| 3.5 热激刺激下，敲除ATG7后HSF1结合hsp25启动子的能力增强 | 第37-38页 |
| 3.6 热激刺激下，阻断自噬不影响HSF1的核质分布，但阻断自噬促进HSF1的三聚化 | 第38-40页 |
| 3.7 高表达的HSP25与自噬缺失细胞的抗凋亡有关 | 第40-43页 |
| 4 讨论 | 第43-47页 |
| 结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 综述 | 第53-65页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 攻读学位期间参加的学术会议及研究成果 | 第67-68页 |
