| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-37页 |
| 第一章 猪瘟病毒的生物学特征及其编码蛋白功能 | 第16-30页 |
| 1 生物学特征 | 第16-18页 |
| 2 流行情况 | 第18-20页 |
| 3 病毒编码蛋白功能 | 第20-30页 |
| 3.1 结构蛋白 | 第21-24页 |
| 3.2 非结构蛋白 | 第24-30页 |
| 第二章 | 第30-36页 |
| 2 E2亚单位疫苗及其保护效力 | 第30-32页 |
| 3 影响E2亚单位疫苗免疫效力的因素 | 第32-34页 |
| 3.1 E2蛋白变异 | 第32-34页 |
| 3.2 母源抗体 | 第34页 |
| 4 控制猪瘟病毒感染面临的主要问题 | 第34-36页 |
| 本研究的目的和意义 | 第36-37页 |
| 第二部分 试验研究 | 第37-87页 |
| 第三章 杆状病毒表达猪瘟病毒C株E2嵌合流行毒株E2高变区重组蛋白 | 第38-54页 |
| 摘要 | 第38-39页 |
| 1 材料 | 第39-40页 |
| 1.1 菌株、细胞和培养条件 | 第39页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第39-40页 |
| 2 方法 | 第40-47页 |
| 2.1 pFastBac~(TM)HT B载体改造 | 第40-41页 |
| 2.2 携带E2基因的pFastHTB-M1重组质粒构建 | 第41-42页 |
| 2.3 重组E2蛋白杆状病毒基因组构建 | 第42-43页 |
| 2.4 表达E2蛋白的重组杆状病毒制备 | 第43-44页 |
| 2.5 重组E2蛋白纯化 | 第44-45页 |
| 2.6 SDS-PAGE/免疫印迹 | 第45-47页 |
| 3 结果 | 第47-52页 |
| 3.1 pFastBac~(TM)HT B改造载体鉴定 | 第47-48页 |
| 3.2 携带E2基因pFastHTB-M1重组质粒鉴定 | 第48-49页 |
| 3.3 重组E2蛋白杆状病毒基因组鉴定 | 第49-50页 |
| 3.4 重组E2杆状病毒制备 | 第50页 |
| 3.5 重组E2蛋白纯化与鉴定 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 猪瘟病毒流行毒株E2抗原区对C株诱导的免疫反应性影响 | 第54-68页 |
| 摘要 | 第54-55页 |
| 1 材料 | 第55页 |
| 1.1 动物、细胞和养殖及培养条件 | 第55页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-60页 |
| 2.1 C株疫苗免疫血清及外周血单核细胞分离 | 第55-56页 |
| 2.2 ELISA | 第56-57页 |
| 2.3 免疫印迹 | 第57页 |
| 2.4 外周血单核细胞抗体分泌水平检测 | 第57-58页 |
| 2.5 外周血单核细胞IFN-γ分泌水平检测 | 第58-60页 |
| 3 结果 | 第60-66页 |
| 3.1 携带流行毒株E2高变区重组蛋白与C株高免血清反应性 | 第60-62页 |
| 3.2 携带流行毒株E2高变区重组蛋白对PBMC抗体水平分泌的影响 | 第62-63页 |
| 3.3 携带流行毒株E2高变区重组蛋白对PBMC分泌IFN-γ的影响 | 第63-66页 |
| 4 讨论 | 第66-68页 |
| 第五章 猪瘟病毒C株E2置换流行毒株高变区差异氨基酸对C株免疫猪血清反应性的影响 | 第68-87页 |
| 摘要 | 第68页 |
| 1 材料 | 第68-70页 |
| 1.1 动物、毒株和细胞 | 第69页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第69-70页 |
| 2 方法 | 第70-78页 |
| 2.1 流行毒株高变区AR3差异氨基酸位点分析 | 第70-72页 |
| 2.2 基于C株E2的pFastHTB-M1-C-E2为骨架置换流行毒株高变区氨基酸 | 第72页 |
| 2.3 置换流行毒株高变区氨基酸的重组E2蛋白杆状病毒基因组构建 | 第72-73页 |
| 2.4 表达E2突变蛋白杆状病毒的制备 | 第73页 |
| 2.5 重组蛋白表达与纯化 | 第73-76页 |
| 2.6 突变蛋白与高免血清反应性分析 | 第76-78页 |
| 3 结果 | 第78-85页 |
| 3.1 流行毒株高变区AR3变异显著的氨基酸位点 | 第78-80页 |
| 3.2 携带C株E2置换流行毒株AR3差异氨基酸的pFastHTB-M1载体鉴定 | 第80-82页 |
| 3.3 突变C株E2基因的杆状病毒基因组和重组病毒鉴定 | 第82页 |
| 3.4 重组E2蛋白鉴定 | 第82-83页 |
| 3.5 流行毒株高变区氨基酸置换对E2蛋白与高免血清反应性的影响 | 第83-85页 |
| 4 讨论 | 第85-87页 |
| 结论和创新性 | 第87-88页 |
| 附图 | 第88-93页 |
| 参考文献 | 第93-107页 |
| 作者简介 | 第107-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
