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中药川麦冬及白术特异性PCR鉴定方法的研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 绪论第14-25页
    1.1 中药鉴定方法的发展及现状第14-18页
        1.1.1 随机扩增DNA多态性(RAPD)技术第16-17页
        1.1.2 DNA条形码技术第17页
        1.1.3 特异性PCR技术第17-18页
    1.2 川麦冬概况及鉴定研究第18-20页
        1.2.1 川麦冬概况第18-19页
        1.2.2 川麦冬的鉴定研究第19-20页
    1.3 白术概况及鉴定研究第20-22页
        1.3.1 白术概况第20-21页
        1.3.2 白术的鉴定研究第21-22页
    1.4 立题意义第22-23页
    1.5 研究内容第23-25页
        1.5.1 川麦冬特异性PCR鉴定方法的研究第23页
        1.5.2 白术特异性PCR鉴定方法的研究第23-25页
第二章 植物基因组DNA的提取第25-36页
    2.1 前言第25-26页
    2.2 实验材料与仪器第26-29页
        2.2.1 实验材料第26-28页
        2.2.2 实验试剂第28页
        2.2.3 溶液制备第28页
        2.2.4 实验仪器第28-29页
    2.3 实验方法第29-31页
        2.3.1 植物基因组DNA的提取第29-30页
        2.3.2 植物基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳检测第30页
        2.3.3 植物基因组DNA的紫外分光度法检测第30-31页
    2.4 结果与讨论第31-35页
        2.4.1 植物基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳检测结果第31-33页
        2.4.2 植物基因组DNA的紫外分光光度法检测结果第33-35页
    2.5 小结第35-36页
第三章 川麦冬特异性PCR鉴定方法的研究第36-47页
    3.1 前言第36页
    3.2 实验材料与仪器第36-37页
        3.2.1 实验材料第36页
        3.2.2 实验试剂第36-37页
        3.2.3 实验仪器第37页
    3.3 实验方法第37-39页
        3.3.1 特异性PCR引物的设计与合成第37-38页
        3.3.2 川麦冬特异性PCR鉴定方法的建立第38页
        3.3.3 川麦冬特异性PCR鉴定方法的研究第38-39页
    3.4 结果与讨论第39-45页
        3.4.1 特异性引物设计第39-40页
        3.4.2 川麦冬特异性PCR鉴定方法的建立第40-42页
        3.4.3 川麦冬特异性PCR鉴定方法的研究第42-45页
            3.4.3.1 川麦冬特异性PCR鉴定方法的准确性研究结果第42-43页
            3.4.3.2 川麦冬特异性PCR鉴定方法的灵敏性研究结果第43-44页
            3.4.3.3 川麦冬特异性PCR鉴定方法对混合样品检测效果的研究结果第44-45页
    3.5 小结第45-47页
第四章 白术分子鉴定标记的筛选第47-58页
    4.1 前言第47页
    4.2 实验试剂及仪器第47-48页
        4.2.1 实验材料第47-48页
        4.2.2 实验试剂与仪器第48页
    4.3 实验方法第48-50页
        4.3.1 随机引物的合成第48-49页
        4.3.2 RAPD反应条件的优化第49页
        4.3.3 白术分子鉴定标记的筛选第49-50页
    4.4 结果与讨论第50-57页
        4.4.1 RAPD反应条件的优化第50-52页
            4.4.1.1 模板浓度的优化结果第50-51页
            4.4.1.2 Taq DNA聚合酶浓度的优化结果第51页
            4.4.1.3 退火温度的优化结果第51-52页
            4.4.1.4 白术RAPD最佳反应条件第52页
        4.4.2 白术分子鉴定标记的筛选第52-57页
            4.4.2.1 S9的RAPD结果第52-53页
            4.4.2.2 S10的RAPD结果第53-54页
            4.4.2.3 S28的RAPD结果第54-55页
            4.4.2.4 S349的RAPD-PCR结果第55-57页
    4.5 小结第57-58页
第五章 白术分子鉴定标记的回收、克隆和测序第58-71页
    5.1 前言第58页
    5.2 实验材料与仪器第58-61页
        5.2.1 实验试剂盒第58-59页
        5.2.2 实验试剂第59页
        5.2.3 实验仪器第59-60页
        5.2.4 实验培养基配方第60-61页
        5.2.5 实验菌种第61页
    5.3 实验方法第61-65页
        5.3.1 分子鉴定标记的回收第61页
        5.3.2 分子鉴定标记的克隆第61-65页
            5.3.2.1 感受态细胞的制备第61-62页
            5.3.2.2 白术分子标记与T载体连接第62-63页
            5.3.2.3 连接产物转入宿主细胞第63-64页
            5.3.2.4 重组质粒的提取第64-65页
            5.3.2.5 重组质粒的鉴定第65页
        5.3.3 分子鉴定标记的测序第65页
    5.4 结果与讨论第65-69页
        5.4.1 浙白术和河北小白术分子鉴定标记的回收第65-66页
        5.4.2 重组质粒的鉴定结果第66-67页
        5.4.3 两种白术分子鉴定标记的测序结果第67-69页
    5.5 小结第69-71页
第六章 浙白术和河北小白术特异性PCR鉴定方法的研究第71-91页
    6.1 前言第71页
    6.2 实验材料与仪器第71-72页
        6.2.1 实验材料第71页
        6.2.2 实验试剂及仪器第71-72页
    6.3 实验方法第72-75页
        6.3.1 特异性引物设计与合成第72页
        6.3.2 两种白术特异性PCR鉴定方法的建立第72-73页
            6.3.2.1 浙白术特异性PCR鉴定方法的建立第72页
            6.3.2.2 河北小白术特异性PCR鉴定方法的建立第72-73页
        6.3.3 浙白术和河北小白术特异性PCR鉴定方法的研究第73-75页
            6.3.3.1 浙白术特异性PCR鉴定方法的研究第73-74页
            6.3.3.2 河北小白术特异性 PCR 鉴定方法的研究第74-75页
    6.4 结果与讨论第75-89页
        6.4.1 两种白术的特异性PCR鉴定方法的引物设计第75-77页
            6.4.1.1 浙白术特异性PCR鉴定方法的引物设计第75-76页
            6.4.1.2 河北小白术特异性PCR鉴定方法的引物设计第76-77页
        6.4.2 两种白术的特异性PCR鉴定方法的建立第77-84页
            6.4.2.1 浙白术特异性PCR鉴定方法的建立第77-80页
            6.4.2.2 河北小白术特异性PCR鉴定方法的建立第80-84页
        6.4.3 两种白术的特异性PCR鉴定方法的研究第84-89页
            6.4.3.1 浙白术特异性 PCR 鉴定方法的研究结果第84-86页
            6.4.3.2 河北小白术特异性 PCR 鉴定方法的研究结果第86-89页
    6.5 小结第89-91页
第七章 结论与展望第91-94页
    7.1 结论第91-92页
    7.2 展望第92-94页
参考文献第94-98页
致谢第98-99页
攻读学位期间发表的学术论文目录第99页

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