摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第14-25页 |
1.1 中药鉴定方法的发展及现状 | 第14-18页 |
1.1.1 随机扩增DNA多态性(RAPD)技术 | 第16-17页 |
1.1.2 DNA条形码技术 | 第17页 |
1.1.3 特异性PCR技术 | 第17-18页 |
1.2 川麦冬概况及鉴定研究 | 第18-20页 |
1.2.1 川麦冬概况 | 第18-19页 |
1.2.2 川麦冬的鉴定研究 | 第19-20页 |
1.3 白术概况及鉴定研究 | 第20-22页 |
1.3.1 白术概况 | 第20-21页 |
1.3.2 白术的鉴定研究 | 第21-22页 |
1.4 立题意义 | 第22-23页 |
1.5 研究内容 | 第23-25页 |
1.5.1 川麦冬特异性PCR鉴定方法的研究 | 第23页 |
1.5.2 白术特异性PCR鉴定方法的研究 | 第23-25页 |
第二章 植物基因组DNA的提取 | 第25-36页 |
2.1 前言 | 第25-26页 |
2.2 实验材料与仪器 | 第26-29页 |
2.2.1 实验材料 | 第26-28页 |
2.2.2 实验试剂 | 第28页 |
2.2.3 溶液制备 | 第28页 |
2.2.4 实验仪器 | 第28-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-31页 |
2.3.1 植物基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
2.3.2 植物基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第30页 |
2.3.3 植物基因组DNA的紫外分光度法检测 | 第30-31页 |
2.4 结果与讨论 | 第31-35页 |
2.4.1 植物基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳检测结果 | 第31-33页 |
2.4.2 植物基因组DNA的紫外分光光度法检测结果 | 第33-35页 |
2.5 小结 | 第35-36页 |
第三章 川麦冬特异性PCR鉴定方法的研究 | 第36-47页 |
3.1 前言 | 第36页 |
3.2 实验材料与仪器 | 第36-37页 |
3.2.1 实验材料 | 第36页 |
3.2.2 实验试剂 | 第36-37页 |
3.2.3 实验仪器 | 第37页 |
3.3 实验方法 | 第37-39页 |
3.3.1 特异性PCR引物的设计与合成 | 第37-38页 |
3.3.2 川麦冬特异性PCR鉴定方法的建立 | 第38页 |
3.3.3 川麦冬特异性PCR鉴定方法的研究 | 第38-39页 |
3.4 结果与讨论 | 第39-45页 |
3.4.1 特异性引物设计 | 第39-40页 |
3.4.2 川麦冬特异性PCR鉴定方法的建立 | 第40-42页 |
3.4.3 川麦冬特异性PCR鉴定方法的研究 | 第42-45页 |
3.4.3.1 川麦冬特异性PCR鉴定方法的准确性研究结果 | 第42-43页 |
3.4.3.2 川麦冬特异性PCR鉴定方法的灵敏性研究结果 | 第43-44页 |
3.4.3.3 川麦冬特异性PCR鉴定方法对混合样品检测效果的研究结果 | 第44-45页 |
3.5 小结 | 第45-47页 |
第四章 白术分子鉴定标记的筛选 | 第47-58页 |
4.1 前言 | 第47页 |
4.2 实验试剂及仪器 | 第47-48页 |
4.2.1 实验材料 | 第47-48页 |
4.2.2 实验试剂与仪器 | 第48页 |
4.3 实验方法 | 第48-50页 |
4.3.1 随机引物的合成 | 第48-49页 |
4.3.2 RAPD反应条件的优化 | 第49页 |
4.3.3 白术分子鉴定标记的筛选 | 第49-50页 |
4.4 结果与讨论 | 第50-57页 |
4.4.1 RAPD反应条件的优化 | 第50-52页 |
4.4.1.1 模板浓度的优化结果 | 第50-51页 |
4.4.1.2 Taq DNA聚合酶浓度的优化结果 | 第51页 |
4.4.1.3 退火温度的优化结果 | 第51-52页 |
4.4.1.4 白术RAPD最佳反应条件 | 第52页 |
4.4.2 白术分子鉴定标记的筛选 | 第52-57页 |
4.4.2.1 S9的RAPD结果 | 第52-53页 |
4.4.2.2 S10的RAPD结果 | 第53-54页 |
4.4.2.3 S28的RAPD结果 | 第54-55页 |
4.4.2.4 S349的RAPD-PCR结果 | 第55-57页 |
4.5 小结 | 第57-58页 |
第五章 白术分子鉴定标记的回收、克隆和测序 | 第58-71页 |
5.1 前言 | 第58页 |
5.2 实验材料与仪器 | 第58-61页 |
5.2.1 实验试剂盒 | 第58-59页 |
5.2.2 实验试剂 | 第59页 |
5.2.3 实验仪器 | 第59-60页 |
5.2.4 实验培养基配方 | 第60-61页 |
5.2.5 实验菌种 | 第61页 |
5.3 实验方法 | 第61-65页 |
5.3.1 分子鉴定标记的回收 | 第61页 |
5.3.2 分子鉴定标记的克隆 | 第61-65页 |
5.3.2.1 感受态细胞的制备 | 第61-62页 |
5.3.2.2 白术分子标记与T载体连接 | 第62-63页 |
5.3.2.3 连接产物转入宿主细胞 | 第63-64页 |
5.3.2.4 重组质粒的提取 | 第64-65页 |
5.3.2.5 重组质粒的鉴定 | 第65页 |
5.3.3 分子鉴定标记的测序 | 第65页 |
5.4 结果与讨论 | 第65-69页 |
5.4.1 浙白术和河北小白术分子鉴定标记的回收 | 第65-66页 |
5.4.2 重组质粒的鉴定结果 | 第66-67页 |
5.4.3 两种白术分子鉴定标记的测序结果 | 第67-69页 |
5.5 小结 | 第69-71页 |
第六章 浙白术和河北小白术特异性PCR鉴定方法的研究 | 第71-91页 |
6.1 前言 | 第71页 |
6.2 实验材料与仪器 | 第71-72页 |
6.2.1 实验材料 | 第71页 |
6.2.2 实验试剂及仪器 | 第71-72页 |
6.3 实验方法 | 第72-75页 |
6.3.1 特异性引物设计与合成 | 第72页 |
6.3.2 两种白术特异性PCR鉴定方法的建立 | 第72-73页 |
6.3.2.1 浙白术特异性PCR鉴定方法的建立 | 第72页 |
6.3.2.2 河北小白术特异性PCR鉴定方法的建立 | 第72-73页 |
6.3.3 浙白术和河北小白术特异性PCR鉴定方法的研究 | 第73-75页 |
6.3.3.1 浙白术特异性PCR鉴定方法的研究 | 第73-74页 |
6.3.3.2 河北小白术特异性 PCR 鉴定方法的研究 | 第74-75页 |
6.4 结果与讨论 | 第75-89页 |
6.4.1 两种白术的特异性PCR鉴定方法的引物设计 | 第75-77页 |
6.4.1.1 浙白术特异性PCR鉴定方法的引物设计 | 第75-76页 |
6.4.1.2 河北小白术特异性PCR鉴定方法的引物设计 | 第76-77页 |
6.4.2 两种白术的特异性PCR鉴定方法的建立 | 第77-84页 |
6.4.2.1 浙白术特异性PCR鉴定方法的建立 | 第77-80页 |
6.4.2.2 河北小白术特异性PCR鉴定方法的建立 | 第80-84页 |
6.4.3 两种白术的特异性PCR鉴定方法的研究 | 第84-89页 |
6.4.3.1 浙白术特异性 PCR 鉴定方法的研究结果 | 第84-86页 |
6.4.3.2 河北小白术特异性 PCR 鉴定方法的研究结果 | 第86-89页 |
6.5 小结 | 第89-91页 |
第七章 结论与展望 | 第91-94页 |
7.1 结论 | 第91-92页 |
7.2 展望 | 第92-94页 |
参考文献 | 第94-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第99页 |