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多种鱼类病毒性传染疾病中病毒的检测方法研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 文献综述第12-24页
    1.1 鲤春病毒血症(SVC)第12页
    1.2 鲤春病毒(SVCV)第12-14页
        1.2.1 结构蛋白第13页
        1.2.2 宿主细胞第13页
        1.2.3 影响因素第13-14页
    1.3 SVCV流行病学调查第14-17页
        1.3.1 疾病发现史第14页
        1.3.2 感染谱系第14-15页
        1.3.3 发病症状第15-16页
        1.3.4 传播途径第16页
        1.3.5 疾病爆发第16页
        1.3.6 预防措施第16-17页
    1.4 SVCV检测方法第17-19页
        1.4.1 细胞分离病毒第17页
        1.4.2 生物分子学检测方法第17-19页
    1.5 传染性胰脏坏死病(IPN)第19页
    1.6 传染性胰脏坏死病毒(IPNV)第19-20页
        1.6.1 结构蛋白第19-20页
        1.6.2 宿主细胞第20页
        1.6.3 理化特性第20页
    1.7 IPNV流行病学调查第20-22页
        1.7.1 疾病发现史第20页
        1.7.2 发病症状第20-21页
        1.7.3 传播途径第21页
        1.7.4 疾病的爆发第21-22页
        1.7.5 预防措施第22页
    1.8 IPNV检测方法第22-23页
    1.9 立题意义第23-24页
第二章 病毒的增殖及RT-PCR检测方法的建立第24-50页
    2.1 实验材料第24-27页
        2.1.1 实验原料第24页
        2.1.2 实验仪器第24-25页
        2.1.3 实验试剂第25-26页
        2.1.4 主要试剂配置第26页
        2.1.5 实验用试剂盒第26-27页
    2.2 实验方法第27-35页
        2.2.1 病毒的增殖第27-28页
        2.2.2 毒株的鉴定第28-34页
        2.2.3 人工感染实验第34-35页
        2.2.4 应用PCR对人工感染鲤鱼进行鉴定第35页
    2.3 结果与讨论第35-49页
        2.3.1 病毒增殖结果第35-36页
        2.3.2 病毒滴度测定结果第36-39页
        2.3.3 毒株鉴定结果第39-47页
            2.3.3.1 病毒电泳检测结果第39-40页
            2.3.3.2 胶回收结果第40-41页
            2.3.3.3 菌液检测结果第41-42页
            2.3.3.4 质粒检测结果第42-43页
            2.3.3.5 测序结果第43-44页
            2.3.3.6 碱基序列及氨基酸序列同源性分析比较第44-47页
        2.3.4 人工感染结果第47页
        2.3.5 病鱼PCR鉴定结果第47-49页
    2.4 本章小结第49-50页
第三章 荧光定量RT-PCR检测方法的研究第50-60页
    3.1 实验材料与设备第50-51页
        3.1.1 实验原料第50页
        3.1.2 主要仪器第50页
        3.1.3 主要试剂第50-51页
    3.2 实验方法第51-52页
        3.2.1 引物和探针的设计第51页
        3.2.2 定量RT-PCR特异性第51-52页
        3.2.3 定量RT-PCR灵敏度及重复性实验第52页
        3.2.4 病鱼的检测第52页
    3.3 结果与讨论第52-58页
        3.3.1 引物设计结果第52-53页
        3.3.2 特异性实验结果第53-54页
        3.3.3 灵敏性及重复性实验结果第54-56页
        3.3.4 标准曲线的建立第56-57页
        3.3.5 人工感染鲤鱼检测结果第57-58页
    3.4 本章小结第58-60页
第四章 原位杂交检测方法的研究第60-75页
    4.1 实验材料与设备第60-63页
        4.1.1 实验原料第60页
        4.1.2 主要仪器第60页
        4.1.3 主要试剂第60-62页
        4.1.4 主要试剂配置第62-63页
        4.1.5 实验用试剂盒第63页
    4.2 实验方法第63-68页
        4.2.1 探针的标记第63-64页
        4.2.2 探针浓度的选择第64-65页
        4.2.3 探针特异性检测第65-66页
        4.2.4 石蜡切片的制作第66-67页
        4.2.5 病鱼组织切片的原位杂交第67-68页
    4.3 结果与讨论第68-73页
        4.3.1 探针的制备第68-69页
        4.3.2 探针浓度的选择第69-70页
        4.3.3 探针特异性检测第70-72页
        4.3.4 原位杂交结果第72-73页
    4.4 本章小结第73-75页
第五章 结论第75-76页
第六章 展望第76-77页
参考文献第77-82页
致谢第82页

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