| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第1章 引言 | 第15-39页 |
| 1.1 细胞自噬 | 第15-24页 |
| 1.1.1 自噬的发现 | 第15-17页 |
| 1.1.2 自噬体的形成和分类 | 第17-18页 |
| 1.1.3 自噬的研究方法 | 第18-21页 |
| 1.1.4 自噬的紊乱与疾病的发生 | 第21-24页 |
| 1.1.4.1 自噬调控与癌症治疗 | 第21-24页 |
| 1.1.4.2 自噬调控与神经退行性疾病 | 第24页 |
| 1.2 纳米颗粒与细胞自噬 | 第24-30页 |
| 1.2.1 纳米颗粒引起细胞自噬的机制 | 第25-27页 |
| 1.2.2 纳米颗粒对自噬的调节 | 第27-28页 |
| 1.2.3 纳米颗粒在治疗自噬相关疾病中的应用 | 第28-30页 |
| 1.3 纳米颗粒与蛋白的相互作用及其生物效应 | 第30-37页 |
| 1.3.1 纳米颗粒与蛋白的相互作用 | 第31-32页 |
| 1.3.2 纳米颗粒-蛋白复合物的生物效应 | 第32-34页 |
| 1.3.3 纳米颗粒-蛋白复合物在生物医学领域的应用 | 第34-37页 |
| 1.4 本课题的提出 | 第37-39页 |
| 第2章 Fe_3O_4纳米颗粒与蛋白的相互作用 | 第39-55页 |
| 2.1 引言 | 第39-42页 |
| 2.2 实验部分 | 第42-45页 |
| 2.2.1 材料 | 第42-43页 |
| 2.2.2 Fe_3O_4纳米颗粒水溶液的制备 | 第43页 |
| 2.2.3 蛋白溶液的制备 | 第43页 |
| 2.2.4 不同浓度的蛋白溶液与Fe_3O_4纳米颗粒相互作用 | 第43-44页 |
| 2.2.5 不同时间内蛋白溶液和Fe_3O_4纳米颗粒的相互作用 | 第44页 |
| 2.2.6 Fe_3O_4纳米颗粒吸附蛋白的定量检测分析 | 第44页 |
| 2.2.7 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的TEM表征 | 第44页 |
| 2.2.8 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的DLS和Zeta电位检测 | 第44页 |
| 2.2.9 蛋白与Fe_3O_4纳米颗粒吸附前后二级结构的测定——圆二色谱 | 第44-45页 |
| 2.3 实验结果 | 第45-53页 |
| 2.3.1 Fe_3O_4纳米颗粒的表征 | 第45-46页 |
| 2.3.2 蛋白浓度对Fe_3O_4纳米颗粒与蛋白相互作用的影响 | 第46页 |
| 2.3.3 相互作用时间对Fe_3O_4纳米颗粒与蛋白相互作用的影响 | 第46-47页 |
| 2.3.4 SDS-PAGE分析Fe_3O_4纳米颗粒对蛋白的吸附 | 第47-48页 |
| 2.3.5 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的表征 | 第48-50页 |
| 2.3.6 蛋白冠的形成不影响蛋白的结构 | 第50-51页 |
| 2.3.7 分析Fe_3O_4纳米颗粒与蛋白的相互作用能力的强弱与蛋白质性质的关系 | 第51-53页 |
| 2.4 本章小结 | 第53-55页 |
| 第3章 纳米颗粒-蛋白复合物对细胞自噬调控作用 | 第55-69页 |
| 3.1 引言 | 第55-56页 |
| 3.2 实验部分 | 第56-60页 |
| 3.2.1 材料 | 第56-57页 |
| 3.2.2 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的细胞摄取实验 | 第57-58页 |
| 3.2.3 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的细胞毒性实验 | 第58页 |
| 3.2.4 Western Blot分析自噬相关蛋白的表达 | 第58-59页 |
| 3.2.5 免疫染色法研究细胞自噬 | 第59-60页 |
| 3.2.6 透射电镜观察细胞自噬 | 第60页 |
| 3.2.7 Caspase-3 活性检测 | 第60页 |
| 3.3 实验结果 | 第60-67页 |
| 3.3.1 Fe_3O_4纳米颗粒具有良好的生物相容性 | 第60-61页 |
| 3.3.2 有无血清对Fe_3O_4纳米颗粒引发细胞自噬效应的影响 | 第61-62页 |
| 3.3.3 四种Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物对细胞自噬的调控 | 第62-65页 |
| 3.3.4 四种Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的细胞摄取 | 第65页 |
| 3.3.5 蛋白吸附、细胞自噬水平以及细胞摄取量之间的相关性分析 | 第65-66页 |
| 3.3.6 纳米颗粒-蛋白复合物的生物相容性良好 | 第66-67页 |
| 3.4 本章小结 | 第67-69页 |
| 第4章 纳米颗粒-蛋白复合物对细胞自噬调控的粒径效应研究 | 第69-83页 |
| 4.1 引言 | 第69-70页 |
| 4.2 实验部分 | 第70-74页 |
| 4.2.1 材料 | 第70-71页 |
| 4.2.2 Fe_3O_4纳米颗粒水溶液的制备 | 第71页 |
| 4.2.3 Fe_3O_4纳米颗粒吸附血清蛋白实验 | 第71-72页 |
| 4.2.4 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的制备 | 第72页 |
| 4.2.5 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的TEM电镜表征 | 第72页 |
| 4.2.6 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的Zeta电位和DLS检测 | 第72页 |
| 4.2.7 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的细胞摄取实验 | 第72-73页 |
| 4.2.8 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的细胞毒性实验 | 第73页 |
| 4.2.9 Western Blot分析自噬相关蛋白的表达 | 第73页 |
| 4.2.10 免疫染色法研究细胞自噬 | 第73页 |
| 4.2.11 透射电镜观察细胞自噬 | 第73页 |
| 4.2.12 Caspase-3 活性检测 | 第73-74页 |
| 4.3 实验结果 | 第74-81页 |
| 4.3.1 材料的表征 | 第74-75页 |
| 4.3.2 Fe_3O_4纳米颗粒吸附血清蛋白具有粒径效应 | 第75页 |
| 4.3.3 不同粒径Fe_3O_4纳米颗粒及其蛋白复合物的DLS和Zeta电位检测 | 第75-76页 |
| 4.3.4 三种粒径的Fe_3O_4纳米颗粒均有良好的生物相容性 | 第76-77页 |
| 4.3.5 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物对细胞自噬水平的调节具有粒径依赖性 | 第77-79页 |
| 4.3.5.1 LC3-Ⅱ蛋白表达水平分析 | 第77-78页 |
| 4.3.5.2 自噬体的观察 | 第78-79页 |
| 4.3.5.3 定量分析自噬调控的粒径依赖性Scale bar = 200 nm | 第79页 |
| 4.3.6 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物细胞摄取的粒径依赖性 | 第79-80页 |
| 4.3.7 不同粒径的纳米颗粒-蛋白复合物具有良好的生物相容性 | 第80-81页 |
| 4.3.8 蛋白吸附、细胞自噬水平以及细胞摄取量之间的相关性分析 | 第81页 |
| 4.4 本章小结 | 第81-83页 |
| 第5章 纳米颗粒-蛋白复合物对细胞自噬调控的形状依赖性研究 | 第83-95页 |
| 5.1 引言 | 第83页 |
| 5.2 实验部分 | 第83-87页 |
| 5.2.1 材料 | 第84-85页 |
| 5.2.2 Fe_3O_4纳米颗粒吸附血清蛋白实验 | 第85页 |
| 5.2.3 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的TEM电镜表征 | 第85页 |
| 5.2.4 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的细胞摄取实验 | 第85-86页 |
| 5.2.5 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的细胞毒性实验 | 第86页 |
| 5.2.6 Western Blot分析自噬相关蛋白的表达 | 第86页 |
| 5.2.7 免疫染色法研究细胞自噬 | 第86页 |
| 5.2.8 透射电镜观察细胞自噬 | 第86-87页 |
| 5.3 实验结果 | 第87-93页 |
| 5.3.1 材料表征 | 第87-88页 |
| 5.3.2 纳米颗粒吸附血清蛋白具有形状依赖性 | 第88-89页 |
| 5.3.3 Fe_3O_4-cube纳米颗粒、Fe_3O_4-rod纳米颗粒具有良好的生物形容性 | 第89页 |
| 5.3.4 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物对细胞自噬水平的调节具有形状依赖性 | 第89-92页 |
| 5.3.4.1 LC3-Ⅱ蛋白表达水平分析 | 第89-90页 |
| 5.3.4.2 自噬体的观察 | 第90-91页 |
| 5.3.4.3 定量分析细胞自噬调控的形状依赖性 | 第91-92页 |
| 5.3.5 Fe_3O_4纳米颗粒-蛋白复合物的细胞摄取 | 第92-93页 |
| 5.3.6 蛋白吸附、细胞自噬水平以及细胞摄取量之间的相关性分析 | 第93页 |
| 5.4 本章小结 | 第93-95页 |
| 第6章 纳米颗粒-蛋白复合物对细胞自噬调控的核心组分依赖性研究 | 第95-105页 |
| 6.1 引言 | 第95页 |
| 6.2 实验部分 | 第95-98页 |
| 6.2.1 材料 | 第95-97页 |
| 6.2.2 AuNPs的合成 | 第97页 |
| 6.2.3 纳米颗粒吸附血清蛋白实验 | 第97页 |
| 6.2.4 纳米颗粒-蛋白复合物的TEM电镜表征 | 第97页 |
| 6.2.5 纳米颗粒-蛋白复合物的细胞摄取实验 | 第97页 |
| 6.2.6 纳米颗粒-蛋白复合物的细胞毒性实验 | 第97页 |
| 6.2.7 Western Blot分析自噬相关蛋白的表达 | 第97-98页 |
| 6.2.8 免疫染色法研究细胞自噬 | 第98页 |
| 6.2.9 透射电镜观察细胞自噬 | 第98页 |
| 6.3 实验结果 | 第98-104页 |
| 6.3.1 AuNPs的表征 | 第98-99页 |
| 6.3.2 AuNPs-蛋白复合物的TEM表征 | 第99-100页 |
| 6.3.3 不同核心组成的纳米颗粒吸附血清蛋白 | 第100页 |
| 6.3.4 AuNPs具有良好的生物相容性 | 第100-101页 |
| 6.3.5 纳米颗粒-蛋白复合物调节细胞自噬能力的核心组分依赖性 | 第101-103页 |
| 6.3.5.1 LC3-Ⅱ蛋白表达水平分析 | 第101-102页 |
| 6.3.5.2 自噬体的观察 | 第102页 |
| 6.3.5.3 定量分析细胞自噬调控的核心组分依赖性 | 第102-103页 |
| 6.3.6 不同核心组分纳米颗粒-蛋白复合物的细胞摄取 | 第103页 |
| 6.3.7 蛋白吸附、细胞自噬水平以及细胞摄取量之间的相关性分析 | 第103-104页 |
| 6.4 本章小结 | 第104-105页 |
| 第7章 总结与展望 | 第105-109页 |
| 参考文献 | 第109-121页 |
| 致谢 | 第121-123页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第123-124页 |
