| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-22页 |
| 1 TLRs | 第14-17页 |
| 1.1 TLRs分类、亚细胞定位及其相关配体 | 第14-16页 |
| 1.2 TLRs结构及其信号传导通路 | 第16-17页 |
| 2 TLR7亚家族在鱼类中的研究进展 | 第17-19页 |
| 3 TLR7亚家族信号通路相关基因 | 第19-20页 |
| 3.1 MyD88 | 第19页 |
| 3.2 IRAK4 | 第19-20页 |
| 3.3 IRF3和IRF7 | 第20页 |
| 4 卵形鲳鲹分子免疫相关研究现状 | 第20-21页 |
| 5 研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 卵形鲳鲹TLR7亚家族基因的克隆与序列分析 | 第22-64页 |
| 1 引言 | 第22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-31页 |
| 2.1 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.2 主要试剂 | 第22页 |
| 2.3 实验鱼、菌株和载体 | 第22-23页 |
| 2.4 卵形鲳鲹TLR7亚家族基因cDNA全长克隆 | 第23-31页 |
| 2.4.1 总RNA提取、纯化及检测 | 第23-24页 |
| 2.4.2 反转录cDNA第一链和SMART cDNA链的合成 | 第24-25页 |
| 2.4.3 TLR7亚家族基因中间片段扩增 | 第25-26页 |
| 2.4.4 TLR7亚家族基因cDNA末端扩增 | 第26-30页 |
| 2.4.5 PCR产物电泳检测与胶回收 | 第30页 |
| 2.4.6 PCR胶回收产物与PMD18-T载体连接 | 第30页 |
| 2.4.7 感受态细胞TOP10的制备 | 第30-31页 |
| 2.4.8 连接产物转化与涂板 | 第31页 |
| 2.4.9 菌液阳性克隆检测与测序 | 第31页 |
| 2.5 卵形鲳鲹TLR7亚家族基因cDNA测序结果分析 | 第31页 |
| 3 结果 | 第31-61页 |
| 3.1 总RNA提取样品质量 | 第31-32页 |
| 3.2 卵形鲳鲹TLR7亚家族基因cDNA全长序列分析 | 第32-61页 |
| 3.2.1 TrTLR7基因cDNA全长特征分析 | 第32-42页 |
| 3.2.2 TrTLR8基因cDNA全长特征分析 | 第42-52页 |
| 3.2.3 TrTLR9基因cDNA全长特征分析 | 第52-61页 |
| 4 讨论 | 第61-64页 |
| 第三章 卵形鲳鲹TLR7亚家族信号通路相关基因的克隆与序列分析 | 第64-97页 |
| 1 引言 | 第64页 |
| 2 材料与方法 | 第64-71页 |
| 2.1 主要仪器设备 | 第64页 |
| 2.2 主要试剂 | 第64页 |
| 2.3 实验鱼、菌株和载体 | 第64页 |
| 2.4 卵形鲳鲹TLR7亚家族相关基因cDNA全长克隆 | 第64-71页 |
| 2.4.1 总RNA提取、纯化及检测 | 第64页 |
| 2.4.2 反转录cDNA第一链和SMART cDNA链的合成 | 第64-65页 |
| 2.4.3 TrTLR7亚家族相关基因中间片段扩增 | 第65-66页 |
| 2.4.4 TrTLR7亚家族相关基因cDNA末端扩增 | 第66-70页 |
| 2.4.5 PCR产物电泳检测与胶回收 | 第70-71页 |
| 2.4.6 PCR胶回收产物与PMD18-T载体连接 | 第71页 |
| 2.4.7 感受态细胞TOP10的制备 | 第71页 |
| 2.4.8 连接产物转化与涂板 | 第71页 |
| 2.4.9 菌液阳性克隆检测与测序 | 第71页 |
| 2.5 卵形鲳鲹TLR7亚家族相关基因cDNA测序结果分析 | 第71页 |
| 3 结果 | 第71-94页 |
| 3.1 总RNA提取样品质量检测 | 第71页 |
| 3.2 卵形鲳鲹TLR7亚家族相关基因cDNA全长序列分析 | 第71-94页 |
| 3.2.1 TrMyD88基因cDNA全长特征分析 | 第71-76页 |
| 3.2.2 TrIRAK4基因cDNA全长特征分析 | 第76-82页 |
| 3.2.3 TrIRF3基因cDNA全长特征分析 | 第82-88页 |
| 3.2.4 TrIRF7基因cDNA全长特征分析 | 第88-94页 |
| 4 讨论 | 第94-97页 |
| 第四章 卵形鲳鲹TLR7亚家族及其信号通路相关基因的免疫应答分析 | 第97-111页 |
| 1 前言 | 第97页 |
| 2 材料与方法 | 第97-99页 |
| 2.1 主要仪器设备 | 第97页 |
| 2.2 主要试剂 | 第97页 |
| 2.3 实验鱼、菌株和载体 | 第97页 |
| 2.4 卵形鲳鲹TLR7亚家族及其相关基因qPCR分析方法的建立 | 第97-99页 |
| 2.4.1 引物设计 | 第97-98页 |
| 2.4.2 质粒制备 | 第98页 |
| 2.4.3 标准曲线 | 第98-99页 |
| 2.5 卵形鲳鲹的溶藻弧菌和Polyl：C刺激处理及采样 | 第99页 |
| 2.6 RNA处理及cDNA合成 | 第99页 |
| 2.7 qPCR检测 | 第99页 |
| 3 结果分析 | 第99-107页 |
| 3.1 标准曲线分析 | 第99-103页 |
| 3.2 TrTLR7亚家族及其信号通路相关基因在健康组织中的分布情况 | 第103-104页 |
| 3.3 溶藻弧菌和Polyl：C刺激处理后各基因在头肾和脾脏组织中的表达水平 | 第104-107页 |
| 4 讨论 | 第107-111页 |
| 第五章 总结 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第122页 |
