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柑橘体细胞融合创制三倍体无核新种质及融合再生植株的遗传鉴定

摘要第7-8页
Abstract第8页
缩略词表第9-10页
第一章 文献综述第10-22页
    1 引言第10-11页
    2 前人研究进展第11-21页
        2.1 柑橘无核育种研究进展第11-14页
            2.1.1 柑橘无核机理第11-12页
            2.1.2 无核柑橘获得途径第12-14页
                2.1.2.1 自然途径获得无核种质第12-13页
                2.1.2.2 人工途径获得无核种质第13-14页
                    2.1.2.2.1 三倍体无核种质的获得途径第13-14页
                    2.1.2.2.2 其它无核种质的获得途径第14页
        2.2 细胞融合在柑橘无核育种中的应用第14-18页
            2.2.1 创制三倍体体细胞杂种第14-16页
                2.2.1.1 配子(n)—体细胞(2n)融合创制三倍体第14-15页
                2.2.1.2 体细胞(n)——体细胞(2n)融合创制三倍体第15-16页
            2.2.2 创制二倍体胞质杂种转移CMS性状第16-17页
            2.2.3 细胞融合创制异源四倍体第17-18页
        2.3 原生质体融合后代的鉴定第18-21页
            2.3.1 倍性鉴定第18-19页
                2.3.1.1 形态学鉴定第18页
                2.3.1.2 细胞学鉴定第18-19页
            2.3.2 遗传物质的来源鉴定第19-21页
                2.3.2.1 RFLP第19页
                2.3.2.2 RAPD第19页
                2.3.2.3 AFLP第19-20页
                2.3.2.4 SSR第20-21页
    3 本研究的目的和内容第21-22页
第二章 柑橘体细胞融合创制三倍体无核新种质第22-41页
    1 引言第22-23页
    2 实验材料与方法第23-28页
        2.1 实验材料第23-24页
            2.1.1 单倍体愈伤 + 二倍体叶肉融合模式第23页
            2.1.2 单倍体愈伤 + 二倍体愈伤融合模式第23-24页
        2.2 实验方法第24-28页
            2.2.1 实验材料准备第24-25页
            2.2.2 柑橘原生质体的分离与纯化第25-26页
            2.2.3 柑橘原生质体活力测定第26-27页
            2.2.4 原生质体融合第27页
            2.2.5 融合细胞培养第27-28页
            2.2.6 融合产物倍性分析第28页
    3 实验结果及分析第28-36页
        3.1 单倍体愈伤 + 二倍体叶肉融合模式第28-32页
            3.1.1 原生质体的分离、纯化第29-30页
            3.1.2 原生质体融合第30-31页
            3.1.3 融合产物培养情况第31-32页
        3.2 单倍体愈伤 + 二倍体愈伤融合模式第32-36页
            3.2.1 原生质体分离、纯化第32页
            3.2.2 原生质体融合情况第32-33页
            3.2.3 融合产物培养情况第33-35页
                3.2.3.1 ‘早金’甜橙单倍体愈伤Fa + ‘默科特’橘橙愈伤第33-34页
                3.2.3.2 ‘早金’甜橙单倍体愈伤Ec + ‘默科特’橘橙愈伤第34-35页
            3.2.4 倍性测定第35-36页
    4 小结与讨论第36-41页
        4.1 不同融合组合再生情况的差异分析第36-41页
            4.1.1 单倍体愈伤 + 二倍体叶肉融合未再生的原因分析第37-39页
                4.1.1.1 遗传差异的原因第38页
                4.1.1.2 培养条件的影响第38-39页
            4.1.2 单倍体愈伤 + 二倍体愈伤的融合再生情况的讨论第39-41页
                4.1.2.1 Fa+MCK、Ec+MCK再生产物形态上的比较第40页
                4.1.2.2 Fa+MCK、Ec+MCK再生产物生胚能力上的比较第40-41页
第三章 再生植株的鉴定第41-56页
    1 引言第41页
    2 实验材料与方法第41-45页
        2.1 实验材料第41-42页
        2.2 实验方法第42-45页
            2.2.1 再生植株倍性分析第42页
            2.2.2 分子标记分析核基因组和细胞质基因组第42-45页
                2.2.2.1 融合材料全基因组DNA的提取第42-43页
                2.2.2.2 PCR扩增第43-44页
                2.2.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳第44-45页
                2.2.2.4 SSR分析核基因组和胞质基因组来源第45页
    3 实验结果及分析第45-52页
        3.1 G1 + ‘卡特’夏橙第45-48页
            3.1.1 植株再生及倍性鉴定第45-46页
            3.1.2 分子标记分析核基因组及胞质基因组来源第46-48页
        3.2 G1 + ‘Itabori’甜橙第48-50页
            3.2.1 植株再生及倍性鉴定第48页
            3.2.2 分子标记分析核基因组及胞质基因组来源第48-50页
        3.3 G1 + ‘默科特’橘橙第50-52页
            3.3.1 植株再生及倍性鉴定第50-51页
            3.3.2 分子标记分析核基因组及胞质基因组来源第51-52页
    4 小结与讨论第52-56页
        4.1 核基因组鉴定结果复杂性的原因第53-54页
            4.1.1 融合细胞的变异与复杂性第53-54页
            4.1.2 其它因素第54页
        4.2 关于胞质基因组鉴定结果的讨论第54-56页
参考文献第56-63页
附录Ⅰ 部分果实图片第63-64页
附录Ⅱ BH3培养基配方第64-66页
附录Ⅲ 分子鉴定所用引物序列信息第66-68页
致谢第68页

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