| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 技术路线 | 第6-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-15页 |
| 1 引言 | 第9页 |
| 2 目前研究红系分化的主要模型 | 第9-12页 |
| 2.1 常用的细胞系及分化诱导剂 | 第9-11页 |
| 2.1.1 MEL细胞 | 第10页 |
| 2.1.2 K562细胞 | 第10页 |
| 2.1.3 分化诱导剂 | 第10页 |
| 2.1.4 鼠胚胎干细胞 | 第10-11页 |
| 2.2 动物模型 | 第11-12页 |
| 2.2.1 小鼠 | 第11页 |
| 2.2.2 斑马鱼和非洲爪蟾 | 第11页 |
| 2.2.3 鸟(禽)类系统 | 第11-12页 |
| 3 胞质杂交体模型 | 第12-13页 |
| 3.1 胞质杂交体概述 | 第12页 |
| 3.2 胞质杂交体的构建 | 第12-13页 |
| 3.2.1 细胞融合 | 第12-13页 |
| 3.2.2 选择性标记 | 第13页 |
| 3.2.3 胞质因子反式调控实例 | 第13页 |
| 4 红系分化的蛋白质组学研究 | 第13-14页 |
| 5 本课题研究目的及意义 | 第14-15页 |
| 第二章 网织红细胞的诱发 | 第15-19页 |
| 1 前言 | 第15页 |
| 2 材料和方法 | 第15-16页 |
| 2.1 实验动物 | 第15页 |
| 2.2 试剂 | 第15页 |
| 2.3 网织红细胞的诱发 | 第15页 |
| 2.4 网织红细胞的获取及染色 | 第15-16页 |
| 3 结果 | 第16-17页 |
| 3.1 药物不同注射剂量对动物生存影响 | 第16页 |
| 3.2 网织红细胞诱发结果 | 第16-17页 |
| 3.2.1 注射剂量对网织红细胞诱发率的影响 | 第16页 |
| 3.2.2 注射时间对网织红细胞诱发率的影响 | 第16-17页 |
| 4 讨论 | 第17-19页 |
| 第三章 胞质杂交体的构建、筛选以及检测 | 第19-27页 |
| 1 前言 | 第19-20页 |
| 1.1 红系分化相关的基因:gata-1、nf-e2、β-globin | 第19页 |
| 1.2 细胞周期基因:p53和p16 | 第19-20页 |
| 1.3 增殖、凋亡基因以及癌基因 | 第20页 |
| 1.4 细胞骨架蛋白 | 第20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-23页 |
| 2.1 亲本细胞的获得及培养 | 第20页 |
| 2.2 pEGFP-C1质粒的提取 | 第20-21页 |
| 2.3 pEGFP-C1质粒转染网织红细胞 | 第21页 |
| 2.4 细胞融合 | 第21-22页 |
| 2.5 融合细胞的筛选与培养 | 第22页 |
| 2.6 mRNA的提取、反转录以及基因表达检测 | 第22-23页 |
| 3 结果 | 第23-24页 |
| 3.1 pEGFP-C1质粒提取结果 | 第23-24页 |
| 3.2 筛选得到的融合细胞 | 第24页 |
| 3.3 MR.K562 mRNA的提取、反转录以及基因表达检测 | 第24页 |
| 4 讨论 | 第24-27页 |
| 第四章 胞质杂交体差异蛋白质组学研究 | 第27-37页 |
| 1 前言 | 第27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-30页 |
| 2.1 双向电泳样品制备 | 第27页 |
| 2.2 蛋白定量 | 第27页 |
| 2.3 等电聚焦 | 第27-28页 |
| 2.4 胶条的平衡 | 第28页 |
| 2.5 灌制12.5%SDS-PAGE胶 | 第28-29页 |
| 2.6 转移胶条和第二向SDS-PAGE | 第29页 |
| 2.7 与质谱连用的银染及图像分析 | 第29页 |
| 2.8 胶内酶解 | 第29-30页 |
| 2.9 质谱鉴定及数据库搜索 | 第30页 |
| 3 结果 | 第30-36页 |
| 3.1 双向电泳结果 | 第30-32页 |
| 3.2 差异蛋白点的质谱鉴定结果 | 第32-36页 |
| 4 讨论 | 第36-37页 |
| 第五章 结论和展望 | 第37-38页 |
| 1 结论 | 第37页 |
| 2 展望 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-44页 |
| 致谢 | 第44页 |