| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 世界布病疫情概况 | 第11-15页 |
| 1.1.1 布病疫情日趋蔓延 | 第11-14页 |
| 1.1.2 病原学特征 | 第14-15页 |
| 1.2 布鲁氏菌疫苗研究策略的演化 | 第15-16页 |
| 1.2.1 传统疫苗阶段 | 第15-16页 |
| 1.2.2 基因工程疫苗 | 第16页 |
| 1.2.3 以基因组为基础的疫苗 | 第16页 |
| 1.3 防御布病传播的常用疫苗 | 第16-20页 |
| 1.3.1 减毒活疫苗 | 第16-17页 |
| 1.3.2 灭活疫苗 | 第17-18页 |
| 1.3.3 突变株疫苗 | 第18页 |
| 1.3.4 基因工程疫苗的候选蛋白分子 | 第18-20页 |
| 2 实验内容 | 第20-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第20页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第20页 |
| 2.1.3 酶试剂和化学试剂 | 第20-21页 |
| 2.2 实验试剂及配方 | 第21-25页 |
| 2.3 试剂盒 | 第25页 |
| 2.4 主要实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.5 实验动物 | 第26页 |
| 2.6 实验方法 | 第26-40页 |
| 2.6.1 实验菌株的活化与培养 | 第26页 |
| 2.6.2 实验菌株基因组 DNA 的提取 | 第26-27页 |
| 2.6.3 猪型布鲁氏菌目的基因（omp31）的克隆 | 第27-29页 |
| 2.6.4 猪型布鲁氏菌目的基因（bls）的克隆及其重组质粒载体的构建 | 第29-33页 |
| 2.6.5 猪型布鲁氏菌融合基因（omp3148-74-bls）的克隆及其重组质粒载体的构建 | 第33-36页 |
| 2.6.6 重组蛋白 rBLS 和重组融合蛋白 rOmp3148-74-BLS 的诱导表达及纯化 | 第36-38页 |
| 2.6.7 多克隆抗体的制备 | 第38页 |
| 2.6.8 多克隆抗体的检测（Western blot） | 第38-39页 |
| 2.6.9 猪型布鲁氏菌内源性蛋白的免疫识别检测 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-54页 |
| 3.1 猪型布鲁氏菌 omp31 基因 PCR 扩增结果 | 第40页 |
| 3.2 猪型布鲁氏菌 omp31 基因测序结果 | 第40页 |
| 3.3 猪型布鲁氏菌 Omp31 氨基酸序列同源性分析 | 第40-43页 |
| 3.3.1 进化树的构建 | 第40-42页 |
| 3.3.2 布鲁氏菌 Omp31 亚型的氨基酸序列分析 | 第42-43页 |
| 3.4 猪型布鲁氏菌 Omp31 蛋白质分子的结构预测 | 第43页 |
| 3.5 猪型布鲁氏菌 Omp31 蛋白质分子信号肽分析 | 第43页 |
| 3.6 猪型布鲁氏菌 Omp31 蛋白质分子抗原决定簇的预测 | 第43-44页 |
| 3.7 抗原决定簇预测结果的实验证据 | 第44-45页 |
| 3.8 猪型布鲁氏菌 bls 基因 PCR 扩增结果 | 第45页 |
| 3.9 pET-bls 阳性重组子菌落 PCR 验证结果 | 第45-46页 |
| 3.10 pET-bls 阳性重组子 EcoRⅠ和 XhoⅠ双酶切验证结果 | 第46页 |
| 3.11 pET-bls 阳性重组子基因序列测序结果 | 第46-47页 |
| 3.12 猪型布鲁氏菌 omp3148-74-bls 融合基因的 PCR 扩增结果 | 第47页 |
| 3.13 pET-omp3148-74-bls 阳性重组子菌落 PCR 验证结果 | 第47-48页 |
| 3.14 pET-omp3148-74-bls 阳性重组子 EcoRⅠ和 XhoⅠ双酶切验证结果 | 第48页 |
| 3.15 pET-omp3148-74-bls 阳性重组子基因序列测序结果 | 第48-49页 |
| 3.16 重组蛋白 rBLS 和 rOmp3148-74-BLS 的诱导表达结果 | 第49-50页 |
| 3.17 rBLS 融合蛋白的纯化结果 | 第50页 |
| 3.18 rBLS 融合蛋白预测 | 第50页 |
| 3.19 rOmp3148-74-BLS 融合蛋白的纯化结果 | 第50-51页 |
| 3.20 rOmp3148-74-BLS 融合蛋白预测 | 第51页 |
| 3.21 多克隆抗体 Western blot 检测结果 | 第51-53页 |
| 3.22 猪型布鲁氏菌内源性蛋白的免疫识别检测结果 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 在学研究成果 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
