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牛13个体尺性状相关基因的克隆表达、序列特征及遗传效应分析

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-20页
第一章 文献综述第20-39页
   ·引言第20-22页
     ·中国黄牛情况简介第20页
     ·中国良种黄牛选育情况简介第20-21页
     ·现代分子生物技术在中国黄牛育种上的应用情况简介第21-22页
   ·牛13 个体尺相关基因的研究进展第22-30页
     ·UQCC 基因的研究进展第22页
     ·GDF5 基因的研究进展第22-23页
     ·ADAMTSL3 基因研究进展第23-24页
     ·ZBT838 基因的研究进展第24-25页
     ·CDK6 基因的研究进展第25-26页
     ·HHIP 基因的研究进展第26-27页
     ·IHH 基因的研究进展第27页
     ·GHRL 基因的研究进展第27页
     ·PTHR1 基因的研究进展第27-28页
     ·INS 基因的研究进展第28-29页
     ·UCP2 基因的研究进展第29页
     ·c011A1 和c011A2 基因的研究进展第29-30页
   ·单核苷酸多态性标记技术的研究进展第30-37页
     ·SNP 技术简介第30页
     ·SNP 的分类第30-31页
     ·SNP 的检测方法及原理第31-37页
       ·电泳方法第31页
       ·酶学方法第31-35页
       ·杂交方法第35-36页
       ·熔解方法第36页
       ·物理方法第36页
       ·化学方法第36-37页
   ·本研究的目的与意义第37-39页
第二章 材料与方法第39-58页
   ·材料第39-41页
     ·血样第39页
     ·组织样品第39页
     ·试验牛数据第39-40页
     ·载体和菌株第40-41页
   ·主要仪器设备和试剂第41-44页
     ·主要仪器设备第41-42页
     ·主要试剂第42页
     ·主要试剂和溶液的配制第42-44页
       ·DNA 提取所需试剂的配制第42-43页
       ·电泳所用的有关试剂第43页
       ·基因克隆试剂第43-44页
   ·试验方法第44-58页
     ·RNA 的提取和检测第44页
       ·总RNA 提取第44页
       ·普通RT-PCR 合成cDNA第44页
       ·总RNA 质量检测第44页
     ·血液DNA 的提取和检测第44-45页
       ·DNA 的提取第44-45页
       ·DNA 质量检测第45页
     ·基因序列的分离和克隆第45-48页
       ·目的基因的ESTs 检索、收集与拼接第45-46页
       ·基因分离、克隆的引物设计第46-47页
       ·PCR 扩增产物的回收纯化、克隆和测序第47-48页
     ·基因的表达谱分析第48-49页
       ·Q-PCR 引物设计第48-49页
       ·Q-PCR 扩增第49页
       ·组织表达谱分析第49页
     ·启动子结构特征分析第49页
     ·基因的低通量多态检测第49-52页
       ·多态位点筛查的引物设计第49页
       ·筛查出的SNP 多态位点的酶切验证和分型第49-51页
       ·筛查出的SNP 多态位点的等位基因PCR 验证及分型第51页
       ·筛查出的SNP 多态位点的创造酶切位点PCR 验证及分型第51-52页
       ·筛查出的SNP 多态位点的直接测序法验证及分型第52页
     ·基因的中通量多态检测第52-54页
       ·基因组DNA 的准备第52页
       ·SNP 位点的准备及引物设计第52页
       ·多重PCR 反应第52-53页
       ·SAP 酶消化反应第53页
       ·单碱基延伸反应第53-54页
       ·质谱仪检测第54页
       ·质谱对SNP 多态位点的分型第54页
     ·测定指标的统计分析第54-56页
       ·基因和基因型频率第54页
       ·多态信息含量第54页
       ·有效等位基因数第54-55页
       ·群体纯合度和杂合度第55页
       ·Hardy-Weinberg 平衡第55页
       ·连锁不平衡分析第55-56页
       ·相关性统计分析模型第56页
     ·主要分子生物学软件和数据库第56-58页
       ·主要分子生物学软件第56页
       ·序列分析工具和数据库第56页
       ·蛋白质析工具第56-58页
第三章 结果与分析第58-134页
   ·总RNA 和DNA 提取结果第58页
     ·总RNA 提取结果第58页
     ·DNA 提取结果第58页
   ·基因克隆与生物信息学分析第58-93页
     ·牛UQCC 基因的克隆及生物信息学分析第58-62页
       ·牛UQCC 基因Contig 的获得第58页
       ·牛UQCC 基因cDNA 的克隆第58页
       ·牛UQCC 基因cDNA 序列分析第58-60页
       ·牛UQCC 基因推导出的蛋白质特性分析第60-62页
     ·牛GDF5 基因生物信息学分析第62-65页
       ·牛GDF5 基因序列特征分析第62页
       ·牛GDF5 基因蛋白质特性分析第62-65页
     ·牛ADAMTSL3 基因生物信息学分析第65-68页
       ·牛ADAMTSL3 基因序列特征分析第65页
       ·牛ADAMTSL3 基因蛋白质特性分析第65-68页
     ·牛ZBT838 基因生物信息学分析第68-71页
       ·牛ZBT838 基因序列特征分析第68页
       ·牛ZBT838 基因蛋白质特性分析第68-71页
     ·牛CDK6 基因生物信息学分析第71-73页
       ·牛CDK6 基因序列特征分析第71页
       ·牛CDK6 基因蛋白质特性分析第71-73页
     ·牛HHIP 基因生物信息学分析第73-75页
       ·牛HHIP 基因序列特征分析第73页
       ·牛HHIP 基因蛋白质特性分析第73-75页
     ·牛IHH 基因生物信息学分析第75-78页
       ·牛IHH 基因序列特征分析第75页
       ·牛IHH 基因蛋白质特性分析第75-78页
     ·牛GHRL 基因生物信息学分析第78-80页
       ·牛GHRL 基因序列特征分析第78页
       ·牛GHRL 基因蛋白质特性分析第78-80页
     ·牛PTHR1 基因生物信息学分析第80-83页
       ·牛PTHR1 基因序列特征分析第80页
       ·牛PTHR1 基因蛋白质特性分析第80-83页
     ·牛INS 基因生物信息学分析第83-85页
       ·牛INS 基因序列特征分析第83页
       ·牛INS 基因蛋白质特性分析第83-85页
     ·牛UCP2 基因生物信息学分析第85-87页
       ·牛UCP2 基因序列特征分析第85页
       ·牛UCP2 基因蛋白质特性分析第85-87页
     ·牛c011A1 基因生物信息学分析第87-90页
       ·牛c011A1 基因序列特征分析第87页
       ·牛c011A1 基因蛋白质特性分析第87-90页
     ·牛c011A2 基因生物信息学分析第90-93页
       ·牛c011A2 基因序列特征分析第90页
       ·牛c011A2 基因蛋白质特性分析第90-93页
   ·基因启动子序列特征分析第93-96页
     ·牛GDF5 基因的启动子序列特征分析第93-95页
       ·牛GDF5 基因启动子的克隆第93页
       ·牛GDF5 基因启动子序列特征分析第93-95页
     ·牛CDK6 基因的启动子序列特征分析第95-96页
       ·牛CDK6 基因启动子的克隆第95页
       ·牛CDK6 基因启动子的克隆第95-96页
   ·基因荧光定量组织表达谱分析第96-98页
     ·牛UQCC 基因荧光定量组织表达谱分析第96页
     ·牛ADAMTSL3 基因荧光定量组织表达谱分析第96-98页
     ·牛13 个基因表达谱在线分析第98页
   ·基因多态性检测及遗传效应分析第98-126页
     ·牛UQCC 基因的遗传变异与体尺性状的关联分析第98-103页
       ·牛UQCC 基因的SNPs 筛查第98-99页
       ·PCR 扩增产物及酶切分型结果第99页
       ·牛UQCC 基因SNP 位点等位基因频率、基因型频率及哈代-温博格平衡检验第99-101页
       ·牛UQCC 基因SNP 位点在群体中的遗传特性第101-102页
       ·牛UQCC 基因SNP 位点的连锁不平衡分析及联合基因型频率分析第102页
       ·牛UQCC 基因多态性与体尺性状的关联分析第102-103页
     ·牛GDF5 基因的遗传变异与肉质和体尺性状的关联分析第103-106页
       ·牛GDF5 基因的SNPs 筛查第103-104页
       ·PCR 扩增产物及酶切分型结果第104页
       ·牛GDF5 基因SNP 位点等位基因频率、基因型频率及哈代-温博格平衡检验第104页
       ·牛GDF5 基因SNP 位点在群体中的遗传特性第104-105页
       ·牛GDF5 基因多态性与体尺性状的关联分析第105-106页
     ·牛ADAMTSL3 基因的遗传变异与体尺性状的关联分析第106-111页
       ·牛ADAMTSL3 基因的SNPs 筛查第106-107页
       ·PCR 扩增产物及AS-PCR 分型结果第107-108页
       ·牛ADAMTSL3 基因SNP 位点等位基因频率、基因型频率及哈代-温博格平衡检验第108-109页
       ·牛ADAMTSL3 基因SNP 位点在群体中的遗传特性第109-110页
       ·牛ADAMTSL3 基因SNP 位点的连锁不平衡分析及联合基因型频率分析第110页
       ·牛ADAMTSL3 基因多态性与体尺性状的关联分析第110-111页
     ·牛ZBT838 基因的遗传变异与体尺性状的关联分析第111-124页
       ·牛ZBT838 基因的SNPs 筛查第111-112页
       ·PCR 扩增产物及AS-PCR 分型结果第112-113页
       ·牛ZBT838 基因SNP 位点等位基因频率、基因型频率及哈代-温博格平衡检验第113-119页
       ·牛ZBT838 基因SNP 位点在群体中的遗传特性第119-122页
       ·牛ZBT838 基因SNP A841G 多态性与体尺性状的关联分析第122-123页
       ·牛ZBT838 基因直接测序得到的9 个SNP 位点的连锁不平衡分析第123-124页
       ·牛ZBT838 基因9 个SNP 位点与体尺性状的关联分析第124页
     ·牛CDK6 基因的遗传变异与体尺性状的关联分析第124-126页
       ·牛CDK6 基因的SNPs 筛查第124页
       ·PCR 扩增产物及创造酶切PCR 分型结果第124-125页
       ·牛CDK6 基因SNP 位点等位基因频率、基因型频率及哈代-温博格平衡检验第125页
       ·牛CDK6 基因SNP 位点在群体中的遗传特性第125-126页
       ·牛CDK6 基因多态性与体尺性状的关联分析第126页
   ·中通量法检测基因多态性及遗传效应分析第126-134页
     ·DNA 样品及SNPs 位点的准备第126-127页
       ·DNA 样品的预处理结果第126-127页
       ·SNPs 位点的多重PCR 软件筛选结果第127页
     ·飞行质谱分析SNPs 位点的分型结果第127-128页
       ·飞行质谱芯片分析样品的总体结果第127-128页
       ·飞行质谱筛查有效SNPs 结果第128页
     ·有效SNP 位点等位基因频率、基因型频率及哈代-温博格平衡检验第128-129页
     ·有效SNP 位点在群体中的遗传特性第129页
     ·有效SNP 位点的连锁不平衡分析第129-131页
     ·牛基因23 个有效SNP 位点与体尺性状的关联分析第131-134页
第四章 讨论第134-140页
   ·关于组织中RNA 的提取第134页
   ·关于牛基因的分离和克隆第134-135页
   ·关于基因的生物信息学的分析第135-136页
   ·关于实时荧光定量PCR 检测第136页
     ·牛UQCC 基因的组织表达谱分析第136页
     ·牛ADAMTSL3 基因的组织表达谱分析第136页
   ·关于基因启动子结构特征分析第136-137页
   ·关于SNPS 的筛查及SNPS 的群体遗传检测第137-139页
     ·关于SNPs 的筛查第137-138页
     ·SNPs 的群体遗传检测第138-139页
   ·关于基因的遗传效应分析第139-140页
第五章 结论第140-143页
   ·主要的研究结果第140-142页
   ·创新点第142-143页
参考文献第143-164页
附录1 31 个质谱检测多态位点聚合图第164-172页
附录2 31 个质谱检测多态位点分型图第172-196页
缩略词第196-198页
致谢第198-199页
作者简介第199-200页

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