摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 文献综述 | 第9-21页 |
1.1 棒状体 | 第9-17页 |
1.1.1 概述 | 第9-10页 |
1.1.2 棒状体组成 | 第10-11页 |
1.1.3 棒状体蛋白的生物信息学 | 第11-12页 |
1.1.4 棒状体颈部蛋白和移动复合体 | 第12-13页 |
1.1.5 后基因组时代对棒状体蛋白的分析 | 第13页 |
1.1.6 弓形虫棒状体蛋白质组的特征。 | 第13-14页 |
1.1.7 已知重要的棒状体蛋白 | 第14-17页 |
1.2 CRISPR/Cas9技术 | 第17-19页 |
1.2.1 CRISPR/Cas系统研究历程 | 第17-18页 |
1.2.2 CRISPR/Cas9系统结构与分类 | 第18页 |
1.2.3 CRISPR/Cas9的作用机理 | 第18-19页 |
1.3 研究目的与意义 | 第19-21页 |
第二章 ROP46与弓形虫阳性血清ELISA反应 | 第21-33页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第21页 |
2.1.2 实验主要试剂 | 第21页 |
2.1.3 主要设备仪器 | 第21页 |
2.1.4 主要溶液及培养基的配制 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-28页 |
2.2.1 ROP46蛋白表达 | 第22-27页 |
2.2.3 ROP46原核表达和纯化 | 第27-28页 |
2.2.4 ELISA检测ROP46蛋白 | 第28页 |
2.3 实验结果 | 第28-31页 |
2.3.1 弓形虫ROP46基因扩增 | 第28-29页 |
2.3.2 ROP46表达载体酶切鉴定 | 第29-30页 |
2.3.3 ROP46在大肠杆菌中的表达 | 第30页 |
2.3.4 ELISA检测结果 | 第30-31页 |
2.4 讨论 | 第31-32页 |
2.5 小结 | 第32-33页 |
第三章 弓形虫Rop46基因的敲除及鉴定 | 第33-43页 |
3.1 实验材料 | 第33页 |
3.1.1 菌株和质粒 | 第33页 |
3.1.2 实验主要试剂 | 第33页 |
3.2 实验方法 | 第33-38页 |
3.2.1 Rop46 敲除质粒构建 | 第33-35页 |
3.2.2 转染 | 第35页 |
3.2.3 单克隆虫株筛选 | 第35-36页 |
3.2.4 Rop46敲除虫株鉴定 | 第36-38页 |
3.3 实验结果 | 第38-40页 |
3.3.1 Rop46敲除质粒pCD-Rop46的构建 | 第38-39页 |
3.3.2 Rop46敲除虫株的制备 | 第39页 |
3.3.3 Rop46敲除虫株的初步鉴定 | 第39-40页 |
3.3.4 Rop46基因缺失虫株的鉴定 | 第40页 |
3.4 讨论 | 第40-41页 |
3.5 小结 | 第41-43页 |
第四章 Rop46基因敲除虫株对PLK侵入和复制的影响 | 第43-49页 |
4.1 实验材料 | 第43页 |
4.1.1 菌株和细胞 | 第43页 |
4.2 实验方法 | 第43-44页 |
4.3 实验结果 | 第44-46页 |
4.3.1 侵入复制 | 第44-45页 |
4.3.2 毒力测定 | 第45-46页 |
4.4 讨论 | 第46-47页 |
4.5 小结 | 第47-49页 |
第五章 结论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-59页 |
个人简介 | 第59页 |