| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 猪流行性腹泻概述 | 第11-13页 |
| 1.1.1 PED的流行病学 | 第11-12页 |
| 1.1.2 PED的诊断 | 第12页 |
| 1.1.3 PED的防治措施 | 第12-13页 |
| 1.2 PEDV的生物学特性 | 第13-16页 |
| 1.2.1 PEDV的形态结构 | 第13页 |
| 1.2.2 PEDV的理化特性 | 第13页 |
| 1.2.3 PEDV抗原性 | 第13页 |
| 1.2.4 PEDV病毒学分类地位 | 第13-14页 |
| 1.2.5 PEDV基因组结构 | 第14-16页 |
| 1.3 PEDV受体的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 整合素 | 第17-21页 |
| 1.4.1 整合素的一般特性 | 第17-19页 |
| 1.4.2 整合素作为病毒受体的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4.3 整合素与PEDV潜在关联性 | 第20-21页 |
| 1.5 病毒受体研究方法 | 第21-22页 |
| 1.6 本研究的目的意义 | 第22-23页 |
| 第二章 猪整合素αv多克隆抗体制备与鉴定 | 第23-31页 |
| 2.1 主要材料 | 第23页 |
| 2.1.1 实验动物及主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 基因及引物的合成 | 第23-24页 |
| 2.2.2 猪整合素αv基因原核表达及纯化 | 第24页 |
| 2.2.3 猪整合素αv重组蛋白的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.4 猪整合素αv重组蛋白抗体的制备 | 第25页 |
| 2.2.5 猪整合素αv重组蛋白抗体效价检测 | 第25-26页 |
| 2.2.6 猪整合素αv重组蛋白抗体的Western blot鉴定 | 第26页 |
| 2.3 结果 | 第26-29页 |
| 2.3.1 猪整合素αv跨膜区与抗原性分析 | 第26-27页 |
| 2.3.2 猪整合素αv的原核表达及纯化 | 第27-28页 |
| 2.3.3 猪整合素αv重组蛋白的Western blot分析 | 第28页 |
| 2.3.4 猪整合素αv多克隆抗体鉴定 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-30页 |
| 2.5 小结 | 第30-31页 |
| 第三章 猪整合素β3 多克隆抗体制备与鉴定 | 第31-39页 |
| 3.1 主要材料 | 第31页 |
| 3.1.1 主要试剂及实验动物 | 第31页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第31页 |
| 3.2 试验方法 | 第31-34页 |
| 3.2.1 基因及引物的合成 | 第31页 |
| 3.2.2 猪整合素β3 基因原核表达及纯化 | 第31-32页 |
| 3.2.3 猪整合素β3 重组蛋白的鉴定 | 第32-33页 |
| 3.2.4 猪整合素β3 重组蛋白抗体的制备 | 第33页 |
| 3.2.5 猪整合素β3 重组蛋白抗体效价检测 | 第33页 |
| 3.2.6 猪整合素β3 重组蛋白抗体的Western blot鉴定 | 第33-34页 |
| 3.3 结果 | 第34-37页 |
| 3.3.1 猪整合素β3 跨膜区与抗原性分析 | 第34-35页 |
| 3.3.2 猪整合素β3 的原核表达及纯化 | 第35-36页 |
| 3.3.3 猪整合素β3 重组蛋白的Western blot分析 | 第36-37页 |
| 3.3.4 猪整合素β3 多克隆抗体鉴定 | 第37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-38页 |
| 3.5 小结 | 第38-39页 |
| 第四章 猪整合素αvβ3 真核表达载体构建及对PEDV感染作用的初步验证 | 第39-51页 |
| 4.1 主要材料 | 第39页 |
| 4.1.1 细胞与病毒 | 第39页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第39页 |
| 4.2 试验方法 | 第39-44页 |
| 4.2.1 合成基因及引物设计 | 第39-40页 |
| 4.2.2 重组质粒的鉴定 | 第40-41页 |
| 4.2.3 重组质粒的大量提取 | 第41-42页 |
| 4.2.4 CHO细胞的培养 | 第42页 |
| 4.2.5 转染 | 第42-43页 |
| 4.2.6 间接免疫荧光试验 | 第43页 |
| 4.2.7 转染细胞的蛋白表达量测定 | 第43-44页 |
| 4.2.8 病毒接种 | 第44页 |
| 4.2.9 病毒感染率测定 | 第44页 |
| 4.3 结果 | 第44-49页 |
| 4.3.1 pCAGGS-pIαv和pCAGGS-pIβ3 重组质粒鉴定结果 | 第44-45页 |
| 4.3.2 pCAGGS-pIαv和pCAGGS-pIβ3 转染细胞的蛋白表达结果 | 第45-47页 |
| 4.3.3 pCAGGS-pIαv和pCAGGS-pIβ3 重组蛋白表达时间测定 | 第47-48页 |
| 4.3.4 PEDV在CHO细胞中感染鉴定与分析 | 第48-49页 |
| 4.4 讨论 | 第49-50页 |
| 4.5 小结 | 第50-51页 |
| 第五章 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 附录 | 第63-69页 |
| 作者简历 | 第69页 |
