致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
目录 | 第11-13页 |
缩略术语词表 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-26页 |
1.1 植酸存在部位与分布特点 | 第15页 |
1.2 植酸的抗营养特性与生理作用 | 第15-16页 |
1.3 作物籽粒植酸含量的基因型差异与环境生态效应 | 第16-17页 |
1.4 低植酸突变体的培育与研究 | 第17-20页 |
1.4.1 低植酸突变体的类型与遗传特点 | 第17-19页 |
1.4.2 低植酸作物的农艺性状特点与生态生理特征 | 第19-20页 |
1.5 作物籽粒植酸合成的代谢路径 | 第20-22页 |
1.6 植酸合成代谢途径的关键酶及其重要调控基因 | 第22-25页 |
1.7 本文研究意义与研究内容 | 第25-26页 |
第二章 低植酸突变水稻的高温结实障碍表现及其与籽粒植酸含量间的关系 | 第26-39页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 材料与方法 | 第26-29页 |
2.2.1 供试材料与田间种植 | 第26-27页 |
2.2.2 人工气候箱控温试验处理 | 第27-28页 |
2.2.3 常规水稻品种的高温处理试验 | 第28页 |
2.2.4 高温生长环境下的外源喷施植酸试验 | 第28页 |
2.2.5 稻米籽粒化学指标的测定 | 第28-29页 |
2.2.6 数据处理与统计分析 | 第29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-36页 |
2.3.1 低植酸突变体水稻在高温胁迫下的籽粒植酸含量与结实特性变化 | 第29-33页 |
2.3.2 高温对水稻常规栽培种籽粒植酸及结实特性的影响 | 第33-35页 |
2.3.3 外源喷施植酸对籽粒植酸含量的影响及其与水稻育性和千粒重之间的关系 | 第35-36页 |
2.4 讨论 | 第36-39页 |
第三章 水稻MIPS沉默和超表达载体构建以及MIPS基因在高温逆境生理中的调控 | 第39-63页 |
3.1 引言 | 第39-40页 |
3.2 材料与方法 | 第40-47页 |
3.2.1 试验材料及相关试剂 | 第40页 |
3.2.2 水稻胚乳总RNA提取、纯化及cDNA第一链的合成 | 第40-41页 |
3.2.3 MIPS基因片段的亚克隆及整个基因编码区的克隆 | 第41-42页 |
3.2.4 RNAi表达载体pTCK303-RiOsMIPS及超表达载体pTCK303-OeOsMIPS的构建 | 第42-43页 |
3.2.5 EHA105农杆菌介导的日本晴遗传转化 | 第43-44页 |
3.2.6 MIPS基因沉默和超表达阳性转基因植株的鉴定 | 第44-45页 |
3.2.7 实时荧光定量PCR | 第45页 |
3.2.8 植酸合成代谢关键基因的RT-PCR和qRT-PCR检测 | 第45-46页 |
3.2.9 转基因T2代阳性植株的MIPS(RINO1)基因表达分析与高温处理试验 | 第46-47页 |
3.3 结果与分析 | 第47-60页 |
3.3.1 MIPS基因RNAi片段的亚克隆与沉默载体构建 | 第47-48页 |
3.3.2 MIPS基因超表达片段的亚克隆与超表达载体的构建 | 第48-49页 |
3.3.3 表达载体的农杆菌介导与遗传转化 | 第49页 |
3.3.4 T0代转基因植株获得与T1代植株的遗传分离鉴定 | 第49-50页 |
3.3.5 转基因T2代植株田间形态观察及籽粒植酸含量差异 | 第50-53页 |
3.3.6 转基因植株不同器官中MIPS基因的表达变化 | 第53-54页 |
3.3.7 MIPS基因沉默和超表达对籽粒植酸合成代谢相关基因表达的影响 | 第54-58页 |
3.3.8 MIPS基因沉默和超表达后水稻籽粒主要品质指标的变化 | 第58-59页 |
3.3.9 花期高温胁迫对转基因T_2代植株结实率和籽粒植酸含量的影响 | 第59页 |
3.3.10 MIPS沉默和超表达对植酸合成代谢其它相关基因高温胁迫响应的影响 | 第59-60页 |
3.4 讨论 | 第60-63页 |
第四章 外源磷处理对水稻籽粒植酸含量的影响及其与相关基因表达间关系 | 第63-82页 |
4.1 引言 | 第63-64页 |
4.2 材料与方法 | 第64-67页 |
4.2.1 试验材料的田间种植与动态取样 | 第64页 |
4.2.2 温室水培试验与外源磷浓度处理 | 第64-65页 |
4.2.3 水稻穗离体培养方法与试验处理 | 第65-66页 |
4.2.4 籽粒理化指标的测定 | 第66页 |
4.2.5 基因表达的RT-PCR和qRT-PCR检测分析 | 第66-67页 |
4.2.6 统计分析 | 第67页 |
4.3 结果与分析 | 第67-78页 |
4.3.1 稻穗离体培养体系的建立 | 第67-68页 |
4.3.2 外源磷浓度处理对水稻籽粒植酸等理化指标的影响 | 第68-73页 |
4.3.3 不同磷处理水平下水稻籽粒植酸合成相关基因的相对表达量差异 | 第73-76页 |
4.3.4 植酸合成代谢相关基因在水稻籽粒灌浆不同时期的表达变化动态 | 第76-77页 |
4.3.5 外源碟处理对水稻軒粒中(hNAS2基因表达量的影响 | 第77-78页 |
4.4 讨论 | 第78-82页 |
4.4.1 外源磷处理对水稻籽粒植酸含量和锌/铁营养元素有效性的影响 | 第78-80页 |
4.4.2 外源磷处理对水稻籽粒植酸合成代谢途径相关基因表达的影响 | 第80-82页 |
第五章 外源C、N处理对水稻籽粒植酸含量及相关代谢基因表达的调控效应 | 第82-98页 |
5.1 引言 | 第82页 |
5.2 材料与方法 | 第82-84页 |
5.2.1 试验材料 | 第82-83页 |
5.2.2 穗离体培养方法与试验处理 | 第83页 |
5.2.3 籽粒理化指标的测定 | 第83-84页 |
5.2.4 植酸合成代谢关键基因表达的RT-PCR和qRT-PCR检测 | 第84页 |
5.2.5 统计分析 | 第84页 |
5.3 结果与分析 | 第84-95页 |
5.3.1 外源碳营养处理对籽粒植酸等理化指标影响及其与相关基因表达间关系 | 第84-89页 |
5.3.2 外源N营养处理对籽粒植酸等理化指标影响及其与相关基因表达间关系 | 第89-93页 |
5.3.3 相同C/N比处理下,同步改变C、N浓度对对籽粒植酸等理化指标影响及其与相关基因表达间的关系 | 第93-95页 |
5.4 讨论 | 第95-98页 |
5.4.1 外源C供应对籽粒植酸合成及锌、铁有效性的影响 | 第95-96页 |
5.4.2 外源N供应对籽粒植酸合成及锌、铁有效性的影响 | 第96-98页 |
第六章 文章结论与展望 | 第98-101页 |
6.1 结论 | 第98-99页 |
6.2 展望 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-115页 |
附录1:水稻营养液配方(磷培养试验) | 第115-116页 |
攻读博士学位期间所发表论文 | 第116页 |