前言 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写词表 | 第10-11页 |
第1章 文献综述 | 第11-18页 |
1.1 膀胱癌概述 | 第11-12页 |
1.2 组蛋白去乙酰化酶 | 第12-16页 |
1.2.1 HDACs 组成和研究进展 | 第12-13页 |
1.2.2 HDAC 的生物学效应 | 第13页 |
1.2.3 经典 HDAC 家族与癌症 | 第13-14页 |
1.2.4 HDAC 抑制剂及在癌症治疗中的应用 | 第14-16页 |
1.3 细胞凋亡与 Bcl-2 家族 | 第16页 |
1.4 PTEN 简述 | 第16-17页 |
1.5 RNAi 干扰 | 第17-18页 |
第2章 材料和方法 | 第18-39页 |
2.1 实验材料 | 第18-26页 |
2.1.1 细胞株 | 第18页 |
2.1.2 主要仪器及试剂 | 第18-21页 |
2.1.3 主要试剂配制 | 第21-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-39页 |
2.2.1 siRNA 重组质粒的转化、提取与鉴定 | 第26-29页 |
2.2.2 RT112 细胞培养 | 第29-30页 |
2.2.3 重组质粒转染细胞 | 第30-31页 |
2.2.4 提取细胞总 RNA | 第31-32页 |
2.2.5 RT-PCR 检测 HDAC1-siRNA 干扰效果 | 第32-34页 |
2.2.6 Real-time PCR 检测 siRNA 干扰 RT112 细胞 HDAC1、Bax、Bcl-2 基因 mRNA 的表达情况 | 第34-35页 |
2.2.7 Western blot 检测 HDAC1、Bax、Bcl-2、PTEN、GAPDH 蛋白的表达 | 第35-37页 |
2.2.8 流式细胞术检测 HDAC1-siRNA 对 RT112 细胞凋亡的影响 | 第37-38页 |
2.2.9 统计学计算 | 第38-39页 |
第3章 实验结果 | 第39-47页 |
3.1 重组质粒的酶切与测序鉴定 | 第39-40页 |
3.1.1 重组质粒的酶切 | 第39-40页 |
3.1.2 重组质粒的测序鉴定 | 第40页 |
3.2 倒置荧光显微镜观察 HDAC1-siRNA 转染 RT112 细胞 | 第40-41页 |
3.3 RT-PCR 结果 | 第41-42页 |
3.4 Real-time PCR 检测 mRNA 表达结果 | 第42-44页 |
3.5 Western Blot 检测蛋白表达结果 | 第44-45页 |
3.6 流式细胞术检测 HDAC1-siRNA 对 RT112 细胞凋亡结果 | 第45-47页 |
第4章 结论 | 第47-48页 |
第5章 讨论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
作者简介 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |