| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 部分缩略符号说明 | 第9-13页 |
| 前言 | 第13页 |
| 1 文献综述 | 第13-27页 |
| 1.1 板栗疫病发生与危害 | 第13-15页 |
| 1.2 板栗疫病菌研究 | 第15-18页 |
| 1.2.1 病原特征 | 第15页 |
| 1.2.2 病原分类地位变化 | 第15-16页 |
| 1.2.3 生物学特性 | 第16页 |
| 1.2.4 毒力分化 | 第16-17页 |
| 1.2.5 防治研究 | 第17-18页 |
| 1.3 分子标记技术在植物病原真菌检测上的应用研究 | 第18-25页 |
| 1.3.1 DNA探针技术 | 第19-20页 |
| 1.3.2 DNA指纹技术 | 第20-21页 |
| 1.3.3 PCR技术及基于PCR技术的其它检测技术 | 第21-25页 |
| 1.3.4 DNA芯片技术 | 第25页 |
| 1.4 分子标记技术在板栗疫病菌上的应用研究 | 第25-27页 |
| 1.4.1 板栗疫病菌的起源 | 第25-26页 |
| 1.4.2 板栗疫病菌的遗传变异 | 第26-27页 |
| 1.4.3 板栗疫病菌的分子检测研究 | 第27页 |
| 2 研究目的与意义 | 第27-28页 |
| 3 研究内容与技术路线 | 第28-29页 |
| 3.1 研究内容 | 第28页 |
| 3.1.1 板栗疫病菌ITS检测体系的建立 | 第28页 |
| 3.1.2 板栗疫病菌RAPD特异性引物及特异片段的筛选 | 第28页 |
| 3.1.3 板栗疫病菌特RAPD异性片段化为SCAR分子标记 | 第28页 |
| 3.1.4 双重PCR检测体系的建立 | 第28页 |
| 3.2 技术路线 | 第28-29页 |
| 4 材料与方法 | 第29-40页 |
| 4.1 材料 | 第29-32页 |
| 4.1.1 供试菌株 | 第29-30页 |
| 4.1.2 培养基 | 第30-31页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 4.1.4 试剂 | 第31-32页 |
| 4.2 研究方法 | 第32-40页 |
| 4.2.1 基因组DNA提取 | 第32-33页 |
| 4.2.2 ITS-PCR扩增体系建立 | 第33-34页 |
| 4.2.3 RAPD反应体系构建 | 第34-36页 |
| 4.2.4 RAPD-SCAR标记转化 | 第36-38页 |
| 4.2.5 双重PCR检测体系构建 | 第38-39页 |
| 4.2.6 板栗发病组织检测 | 第39-40页 |
| 5 结果与分析 | 第40-50页 |
| 5.1 ITS-PCR扩增体系建立 | 第40-42页 |
| 5.1.1 ITS-PCR扩增结果 | 第40页 |
| 5.1.2 板栗疫病菌ITS区特异引物设计 | 第40-41页 |
| 5.1.3 引物CP1/CP2退火温度筛选 | 第41页 |
| 5.1.4 引物CP1/CP2特异性检测 | 第41-42页 |
| 5.2 RAPD反应体系构建 | 第42-44页 |
| 5.2.1 RAPD反应条件优化 | 第42-43页 |
| 5.2.2 RAPD反应引物筛选 | 第43-44页 |
| 5.3 RAPD-SCAR标记转化 | 第44-47页 |
| 5.3.1 RAPD特异片段回收 | 第44页 |
| 5.3.2 RAPD特异片段克隆测序 | 第44-45页 |
| 5.3.3 SCAR标记引物设计 | 第45-46页 |
| 5.3.4 SCAR标记引物退火温度筛选 | 第46页 |
| 5.3.5 SCAR标记引物特异性检测 | 第46-47页 |
| 5.4 双重PCR扩增体系建立 | 第47-50页 |
| 5.4.1 退火温度选择 | 第47-48页 |
| 5.4.2 体系优化 | 第48页 |
| 5.4.3 特异性检测 | 第48-49页 |
| 5.4.4 灵敏度检测 | 第49-50页 |
| 5.5 双重PCR检测板栗发病组织 | 第50页 |
| 6 讨论与结论 | 第50-57页 |
| 6.1 讨论 | 第50-56页 |
| 6.1.1 ITS靶DNA序列的选择 | 第50-51页 |
| 6.1.2 RAPD反应条件优化及引物筛选 | 第51-53页 |
| 6.1.3 板栗疫病菌RAPD特异引物筛选 | 第53页 |
| 6.1.4 影响RAPD-SCAR标记转化成败的因素 | 第53-54页 |
| 6.1.5 影响双重PCR扩增效果的因素 | 第54-55页 |
| 6.1.6 双重PCR检测板栗疫病菌 | 第55-56页 |
| 6.2 结论 | 第56-57页 |
| 7 研究创新点与展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第65页 |
