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稻瘟病菌MoMET3和MoNSR1的基因功能分析

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
1 文献综述第10-24页
    1.1 稻瘟病菌的研究概况第10-13页
        1.1.1 稻瘟病与稻瘟病菌第10页
        1.1.2 稻瘟病菌的侵染循环第10-13页
            1.1.2.1 分生孢子的萌发第11页
            1.1.2.2 附着胞的形成和成熟第11-12页
            1.1.2.3 侵染栓的形成和分化第12页
            1.1.2.4 侵入后菌丝的分化与扩展第12页
            1.1.2.5 产孢与再侵染第12-13页
    1.2 稻瘟病菌致病相关基因第13页
    1.3 硫与真菌间的密切关系第13-16页
        1.3.1 硫元素在生物中的作用第13页
        1.3.2 硫代谢过程第13-15页
        1.3.3 硫代谢相关基因的研究进展第15-16页
    1.4 核仁素第16-21页
        1.4.1 核仁素第16-19页
        1.4.2 核仁素和核仁素类蛋白的相关基因第19页
        1.4.3 核仁素和核仁素类蛋白的研究进展第19-21页
    1.5 本研究的目的和意义第21-22页
    1.6 实验路线图第22-24页
2 稻瘟病菌MoMET3的基因功能分析第24-41页
    2.1 材料与方法第25-29页
        2.1.1 实验材料第25-26页
        2.1.2 菌株培养及保存第26页
        2.1.3 基因序列分析第26页
        2.1.4 敲除载体的构建第26-27页
        2.1.5 基因缺失突变体的获得第27-28页
        2.1.6 基因缺失突变体表型鉴定第28-29页
            2.1.6.1 突变体菌丝生长速度和分生孢子产量的测定第28页
            2.1.6.2 突变体对硫营养的利用情况第28页
            2.1.6.3 突变体侵染相关形态的分析第28页
            2.1.6.4 致病性测定第28-29页
        2.1.7 基因互补子的获得第29页
        2.1.8 数据统计和分析第29页
    2.2 结果与分析第29-39页
        2.2.1 MoMET3基因序列分析第29-32页
        2.2.2 MoMET3基因缺失突变体的获得第32-33页
        2.2.3 MoMET3突变体菌丝生长速度减慢、产孢减少第33-35页
        2.2.4 MoMET3基因缺失次生菌丝的生长受到硫酸盐利用缺陷的限制第35-36页
        2.2.5 MoMET3基因缺失,不影响分生孢子的萌发和附着胞的分化成熟第36-37页
        2.2.6 MoMET3基因缺失不影响稻瘟病菌的致病性第37-38页
        2.2.7 MoMET3互补恢复了缺失突变体对硫酸盐的利用能力第38-39页
    2.3 小结与讨论第39-41页
3 稻瘟病菌MoNSR1的基因功能分析第41-60页
    3.1 材料与方法第41-45页
        3.1.1 实验材料第41-42页
        3.1.2 菌株培养及保存第42页
        3.1.3 基因序列分析第42页
        3.1.4 敲除载体的构建第42-43页
        3.1.5 基因缺失突变体的获得第43页
        3.1.6 GFP融合蛋白表达载体构建第43页
        3.1.7 DAPI染色与GFP共定位第43页
        3.1.8 突变体表型鉴定第43-45页
            3.1.8.1 突变体菌丝生长速度和分生孢子产量的测定第43页
            3.1.8.2 突变体侵染相关形态的分析第43-44页
            3.1.8.3 致病性测定第44页
            3.1.8.4 侵染菌丝观察第44页
            3.1.8.5 细胞壁完整性和活性氧敏感性的测定第44页
            3.1.8.6 高盐离子敏感性的测定第44-45页
            3.1.8.7 杀菌剂敏感性的测定第45页
            3.1.8.8 拓扑异构酶抑制剂敏感性的测定第45页
        3.1.9 数据统计和分析第45页
    3.2 结果与分析第45-59页
        3.2.1 MoNSR1基因序列分析第45-47页
        3.2.2 MoNSR1蛋白核定位第47-48页
        3.2.3 MoNSR1突变体菌丝生长速度减慢第48-49页
        3.2.4 MoNSR1基因缺失不影响产孢第49-50页
        3.2.5 MoNSR1参与分生孢子的萌发和附着胞的成熟第50-51页
        3.2.6 MoNSR1基因缺失突变体的致病性下降第51-52页
        3.2.7 MoNSR1基因缺失突变体的侵染率下降第52-53页
        3.2.8 MoNSR1基因参与调控细胞壁完整性第53-54页
        3.2.9 MoNSR1基因缺失突变体对活性氧的敏感性增强第54-55页
        3.2.10 MoNSR1基因缺失突变体对高盐离子的敏感性增强第55-56页
        3.2.11 MoNSR1基因缺失突变体对多菌灵的敏感性增强第56-57页
        3.2.12 MoNSR1基因缺失突变体对拓扑异构酶I抑制剂的敏感性降低第57-59页
    3.3 小结与讨论第59-60页
4 结论与展望第60-62页
    4.1 结论第60页
    4.2 展望第60-62页
5 本论文创新点第62-63页
参考文献第63-75页
附录第75-91页
个人简介第91-92页
致谢第92页

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