| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第16-27页 |
| 1.1 引言 | 第16-24页 |
| 1.1.1 背景介绍 | 第16页 |
| 1.1.2 研究现状及未来发展方向 | 第16-17页 |
| 1.1.3 木质素的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.1.4 植物漆酶及其研究进展 | 第19-21页 |
| 1.1.5 漆酶的应用 | 第21-22页 |
| 1.1.6 漆酶的异源表达 | 第22页 |
| 1.1.7 木质素含量及组分测定方法研究进展 | 第22-24页 |
| 1.2 研究的目的与主要内容 | 第24-26页 |
| 1.2.1 研究的关键科学问题及研究内容 | 第24页 |
| 1.2.2 主要的研究内容 | 第24-26页 |
| 1.3 技术路线 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂及所用仪器 | 第27页 |
| 2.1.3 载体、菌种及主要的培养基 | 第27-28页 |
| 2.1.4 实验引物 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-36页 |
| 2.2.1 毛竹基因组DNA及其总RNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.2 去除毛竹总RNA中DNA及反转录合成cDNA | 第30-31页 |
| 2.2.3 基因的克隆和分析 | 第31-34页 |
| 2.2.4 毛竹Phe-miR397对其靶基因的切割验证 | 第34-36页 |
| 2.3 漆酶家族的查找及生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 2.3.1 漆酶序列的获得 | 第36页 |
| 2.3.2 漆酶家族的生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 2.4 7 个组织中毛竹漆酶基因转录组表达分析 | 第37页 |
| 2.5 毛竹PeLAC及PeLAC190基因时空表达分析 | 第37-38页 |
| 2.5.1 毛竹不同组织取材 | 第37页 |
| 2.5.2 多种逆境胁迫及激素处理毛竹实生苗 | 第37-38页 |
| 2.5.3 定量分析 | 第38页 |
| 2.6 植物表达载体的构建及拟南芥转化 | 第38-43页 |
| 2.6.1 目的基因的扩增 | 第38-39页 |
| 2.6.2 植物过量表达载体的构建及检测 | 第39-40页 |
| 2.6.3 重组质粒转化农杆菌GV3101及验证 | 第40页 |
| 2.6.4 转化拟南芥 | 第40-42页 |
| 2.6.5 转基因拟南芥植株的验证 | 第42页 |
| 2.6.6 转基因拟南芥植株的功能分析 | 第42-43页 |
| 2.7 漆酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第43-47页 |
| 2.7.1 表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 2.7.2 转化毕赤酵母GS115 | 第44-46页 |
| 2.7.3 漆酶酶学性质研究 | 第46-47页 |
| 第三章 结果分析 | 第47-73页 |
| 3.1 漆酶家族的查找及生物信息学分析 | 第47-51页 |
| 3.1.1 漆酶家族基因获得 | 第47页 |
| 3.1.2 漆酶基因结构分析 | 第47页 |
| 3.1.3 漆酶基因家族进化树分析 | 第47-49页 |
| 3.1.4 漆酶不同组织转录组表达分析 | 第49-51页 |
| 3.2 核酸的提取与基因克隆 | 第51-57页 |
| 3.2.1 核酸的提取 | 第51页 |
| 3.2.2 相关基因的克隆 | 第51-54页 |
| 3.2.3 Phe-miR397准确切割靶基因PeLAC和PeLAC190 | 第54-55页 |
| 3.2.4 PeLAC和PeLAC190上游启动子调控原件分析 | 第55-57页 |
| 3.3 漆酶基因表达分析 | 第57-61页 |
| 3.3.1 PeLAC和PeLAC190组织特异性表达 | 第57-58页 |
| 3.3.2 不同处理对PeLAC和PeLAC190表达的影响 | 第58-61页 |
| 3.4 基因异位表达及功能分析 | 第61-69页 |
| 3.4.1 植物表达载体的构建 | 第61-62页 |
| 3.4.2 植物表达载体的构建菌液PCR验证 | 第62-63页 |
| 3.4.3 转基因植株的检测 | 第63-64页 |
| 3.4.4 转基因拟南芥植株的表型分析 | 第64-65页 |
| 3.4.5 转基因拟南芥植株应对外界胁迫的分析 | 第65-67页 |
| 3.4.6 转基因拟南芥植株木质素含量的分析 | 第67-69页 |
| 3.5 PeLAC在毕赤酵母中的表达分析 | 第69-73页 |
| 3.5.1 表达载体的构建 | 第69页 |
| 3.5.2 载体的线性化及电击转化毕赤酵母 | 第69-70页 |
| 3.5.3 SDS-PAGE凝胶电泳检测漆酶的表达 | 第70-71页 |
| 3.5.4 漆酶酸稳定性分析 | 第71-73页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第73-79页 |
| 4.1 结论 | 第73-74页 |
| 4.2 讨论 | 第74-77页 |
| 4.3 展望 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 附录 | 第86-87页 |
| 在读期间的学术研究 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
