| 中文摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 乳酸菌背景介绍 | 第11页 |
| 2 乳酸杆菌作为粘膜传递载体的应用研究 | 第11-12页 |
| 3 在分子生物学研究及基因工程技术方面的技术难点 | 第12-14页 |
| 3.1 乳酸杆菌破壁技术的应用研究 | 第12页 |
| 3.2 乳酸杆菌电转化技术的应用研究 | 第12-14页 |
| 4 开展本论文研究的背景及意义 | 第14-15页 |
| 参考文献 | 第15-19页 |
| 研究1: 乳酸杆菌破壁方法的研究 | 第19-36页 |
| 1 材料 | 第21-22页 |
| 1.1 菌株 | 第21页 |
| 1.2 质粒 | 第21页 |
| 1.3 主要试剂 | 第21-22页 |
| 1.4 主要仪器 | 第22页 |
| 2 方法 | 第22-26页 |
| 2.1 乳杆菌的培养与收集 | 第22页 |
| 2.2 乳酸乳球菌的培养与收集 | 第22页 |
| 2.3 氧化锆珠的前处理 | 第22页 |
| 2.4 乳酸菌的破壁处理 | 第22-23页 |
| 2.5 革兰氏染色 | 第23-24页 |
| 2.6 SDS-PAGE分析 | 第24页 |
| 2.7 GUS酶活力的测定 | 第24-25页 |
| 2.8 乳酸菌RNA的提取 | 第25页 |
| 2.9 优化氧化锆珠破壁条件的参数选择及试验设计 | 第25-26页 |
| 2.10 SDS-PAGE检测乳酸菌破壁效果 | 第26页 |
| 2.11 氧化锆珠破壁法对于乳酸菌破壁的适用性研究 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-32页 |
| 3.1 几种破壁方法的分析比较 | 第26-29页 |
| 3.2 氧化锆珠破壁条件的优化 | 第29-31页 |
| 3.3 氧化锆珠破壁法对于乳酸菌破壁的适用性研究 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-36页 |
| 研究2: 乳酸杆菌限制-修饰系统对转化效率影响的研究 | 第36-56页 |
| 1 材料 | 第39-40页 |
| 1.1 菌株 | 第39页 |
| 1.2 质粒 | 第39页 |
| 1.3 主要试剂 | 第39页 |
| 1.4 主要仪器 | 第39-40页 |
| 2 方法 | 第40-43页 |
| 2.1 菌株在不同培养基中生长曲线的测定 | 第40页 |
| 2.2 筛选转化子的红霉素浓度的确定 | 第40页 |
| 2.3 大肠杆菌DH5α中质粒(pMG36e)的提取及定量检测 | 第40页 |
| 2.4 乳酸乳球菌NZ3900中质粒(pMG36e)的提取及定量检测 | 第40-41页 |
| 2.5 乳酸杆菌感受态的制备 | 第41页 |
| 2.6 乳酸杆菌感受态的电转化 | 第41页 |
| 2.7 受体菌株限制-修饰系统的弱化 | 第41-43页 |
| 3 结果 | 第43-52页 |
| 3.1 5株乳酸杆菌在含不同浓度甘氨酸的培养基中生长曲线的测定 | 第43-45页 |
| 3.2 受体菌限制-修饰系统对转化效率的影响 | 第45-51页 |
| 3.4 体内DNA修饰 | 第51-52页 |
| 3.5 体外DNA修饰 | 第52页 |
| 4 讨论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 全文小结 | 第56-57页 |
| 本论文的创新点 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第59-60页 |
