摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-33页 |
第一章 猪链球菌病及猪链球菌2型研究进展 | 第11-27页 |
1 前言 | 第11页 |
2 病原及血清型 | 第11-12页 |
3 流行病学 | 第12页 |
4 毒力因子 | 第12-16页 |
·荚膜多糖 | 第12-13页 |
·溶菌酶释放蛋白(MRP)和胞外因子(EF) | 第13页 |
·溶血素 | 第13-14页 |
·黏附素 | 第14页 |
·纤连蛋白结合蛋白(fironectin-binding protein) | 第14-15页 |
·谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GDH) | 第15页 |
·SalK-SalR | 第15页 |
·Sortase | 第15-16页 |
·SAO | 第16页 |
5 致病机理 | 第16-17页 |
6 诊断与治疗 | 第17页 |
7 小鼠动物模型 | 第17-19页 |
参考文献 | 第19-27页 |
第二章 基因芯片技术 | 第27-33页 |
1 基因芯片技术的背景 | 第27页 |
2 基因芯片的工作原理 | 第27页 |
3 基因芯片的技术流程 | 第27-29页 |
·芯片的制备 | 第27-28页 |
·探针标记与杂交 | 第28-29页 |
·信号检测与结果分析 | 第29页 |
4 基因芯片的应用 | 第29-31页 |
·基因表达分析 | 第29-30页 |
·基因表达图谱的绘制 | 第30页 |
·突变和多态性分析 | 第30页 |
·杂交测序 | 第30-31页 |
参考文献 | 第31-33页 |
第二篇 实验部分 | 第33-77页 |
第一章 猪链球菌2型感染小鼠腹腔巨噬细胞基因表达谱差异分析 | 第33-51页 |
1 材料与方法 | 第34-40页 |
·菌株与培养条件 | 第34页 |
·试验动物 | 第34页 |
·试剂与仪器 | 第34页 |
·细菌的培养 | 第34页 |
·HA9801株感染A/J小鼠的半数致死量(LD50)的测定 | 第34-35页 |
·HA9801株感染A/J和B6小鼠 | 第35页 |
·腹腔巨噬细胞的制备 | 第35页 |
·RNA的制备 | 第35-36页 |
·芯片杂交与数据分析 | 第36-37页 |
·荧光定量PCR验证 | 第37-40页 |
2 结果与分析 | 第40-45页 |
·攻毒菌株的活菌计数 | 第40页 |
·LD50的测定 | 第40页 |
·小鼠攻毒后临床检验 | 第40-41页 |
·RNA样品质量控制 | 第41页 |
·差异表达基因的筛选 | 第41-42页 |
·real-time PCR验证 | 第42-44页 |
·基因表达水平比较 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
第二章 两个品系小鼠差异表达基因的生物信息学分析 | 第51-67页 |
1 材料与方法 | 第51-53页 |
·差异基因 | 第51页 |
·分析方案 | 第51-53页 |
2 结果与分析 | 第53-62页 |
·差异基因的显著性功能分析 | 第53-54页 |
·差异基因的显著性pathway | 第54-56页 |
·显著pathway间作用网络 | 第56-58页 |
·基因间作用网络 | 第58-62页 |
3 讨论 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-67页 |
第三章 小鼠巨噬细胞吞噬及清除SS2能力的研究 | 第67-77页 |
1 材料与方法 | 第67-69页 |
·菌株与培养条件 | 第67页 |
·细胞与培养条件 | 第67-68页 |
·细菌的培养 | 第68页 |
·Ana-1细胞吞噬试验 | 第68页 |
·Ana-1细胞感染 | 第68页 |
·总RNA的提取 | 第68-69页 |
·总RNA的质量控制 | 第69页 |
·RT-PCR鉴定相关基因的表达 | 第69页 |
2 结果与分析 | 第69-71页 |
·Ana-1细胞对HA9801菌株的吞噬活化能力 | 第69页 |
·Ana-1细胞总RAN质检结果 | 第69-70页 |
·Ana-1细胞感染相关基因的表达研究 | 第70-71页 |
3 讨论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-77页 |
全文总结 | 第77-79页 |
致谢 | 第79页 |