| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| 1.1 氧化压力 | 第10-13页 |
| 1.1.1 自由基 | 第10-12页 |
| 1.1.2 细菌凋亡 | 第12-13页 |
| 1.2 氧化应激 | 第13-14页 |
| 1.3 抗氧化剂和有机抗过氧蛋白Ohr | 第14-15页 |
| 1.4 谷氨酸棒状杆菌 | 第15-16页 |
| 1.5 研究目的意义 | 第16-17页 |
| 第二章 材料和方法 | 第17-22页 |
| 2.1 材料 | 第17页 |
| 2.1.1 菌种与培养条件 | 第17页 |
| 2.1.2 试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 试剂盒 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-22页 |
| 2.2.1 构建克隆载体 | 第17-18页 |
| 2.2.2. Ohr半胱氨酸位点点突变 | 第18页 |
| 2.2.3 构建ohr基因敲除载体 | 第18页 |
| 2.2.4 构建lacZ融合基因报告载体 | 第18页 |
| 2.2.5 ohr的基因敲除与互补 | 第18-19页 |
| 2.2.6 蛋白表达和纯化 | 第19页 |
| 2.2.7 过氧化物酶活性的测定 | 第19页 |
| 2.2.8 MALDI-TOF MS-MS质谱分析 | 第19-20页 |
| 2.2.9 NEM处理失活Ohr蛋白 | 第20页 |
| 2.2.10 次磺酸的测定 | 第20页 |
| 2.2.11 氧化剂敏感性检测 | 第20页 |
| 2.2.12 ROS检测 | 第20页 |
| 2.2.13 蛋白羰基化的定量 | 第20页 |
| 2.2.14 MSH的纯化与定量 | 第20-21页 |
| 2.2.15 构建报告基因菌株和 β-galactosidase实验 | 第21-22页 |
| 第三章 结果分析 | 第22-33页 |
| 3.1 Ohr是一个依赖于硫醇的过氧化物酶 | 第22-27页 |
| 3.1.1 Ohr含有两个半胱氨酸残基 | 第22-25页 |
| 3.1.2 Ohr的活性依赖于半胱氨酸和硫醇 | 第25页 |
| 3.1.3 Ohr的半胱氨酸作用的机制 | 第25-27页 |
| 3.2 LpdA, Lpd/SucB和Trx/TrxR支持C. glutamicum中Ohr的活性 | 第27-29页 |
| 3.3 有机氧化剂降低 Δohr突变体的存活率 | 第29-30页 |
| 3.4 Ohr能够降低细胞内ROS水平 | 第30-31页 |
| 3.5 Ohr被CHP诱导表达 | 第31-33页 |
| 第四章 讨论 | 第33-35页 |
| 总结 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-42页 |
| 附录 1 | 第42-44页 |
| 附录 2 | 第44-45页 |
| 缩略词 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 作者简介 | 第47页 |
