| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第1章 引言 | 第12-22页 |
| 1.1 蛋白分离纯化的重要性 | 第12页 |
| 1.2 蛋白分离纯化的一般方法 | 第12-16页 |
| 1.2.1 根据蛋白质的内在特性来分离蛋白质 | 第12-14页 |
| 1.2.2 重组蛋白的纯化 | 第14-16页 |
| 1.3 离子液体应用于蛋白质的分离纯化 | 第16-19页 |
| 1.3.1 离子液体的概念 | 第16页 |
| 1.3.2 离子液体对蛋白质的稳定性 | 第16-17页 |
| 1.3.3 离子液体双水相萃取 | 第17-18页 |
| 1.3.4 功能化离子液体 | 第18-19页 |
| 1.4 1,4,7-Triazacyclononane(TACN)在IMAC中的应用 | 第19-20页 |
| 1.5 本论文的选题意义以及研究方案 | 第20-22页 |
| 1.5.1 选题意义 | 第20-21页 |
| 1.5.2 研究方案 | 第21-22页 |
| 第2章 亲和性离子液体的合成 | 第22-29页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第22-24页 |
| 2.2 亲和离子液体的合成 | 第24-27页 |
| 2.2.1 功能性配体TACN的合成 | 第24-25页 |
| 2.2.2 亲和离子液体的合成 | 第25-27页 |
| 2.2.3 离子液体萃取剂([Bdmim][NTf_2])的合成 | 第27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-29页 |
| 第3章 亲和性离子液体对组氨酸标签增强型绿色荧光蛋白(His-tagged EGFP)亲和性能的探究 | 第29-40页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第29-30页 |
| 3.2 不同离子液体体系的制备 | 第30-31页 |
| 3.2.1 AIL/IL的配置 | 第30-31页 |
| 3.2.2 M~(2+)AIL/IL(M=Cu,Ni,Zn)的制备 | 第31页 |
| 3.3 不同离子液体体系对His-tagged EGFP亲和性能的探究 | 第31页 |
| 3.4 不同离子强度下对M~(2+)-AIL/IL亲和能力的测试 | 第31-32页 |
| 3.5 不同M~(2+)-AIL含量对于定量His-tagged EGFP亲和效率的探究 | 第32页 |
| 3.6 BCA法测蛋白含量 | 第32-33页 |
| 3.7 结果与分析 | 第33-39页 |
| 3.7.1 不同离子液体体系对His-tagged EGFP亲和性能的影响 | 第33-35页 |
| 3.7.2 离子强度对M~(2+)-AIL/IL亲和能力的影响 | 第35-37页 |
| 3.7.3 M~(2+)-AIL含量对M~(2+)-AIL/IL对定量His-tagged EGFP亲和效率的影响 | 第37-39页 |
| 3.8 本章小结 | 第39-40页 |
| 第4章 亲和性离子液体应用于从大肠杆菌表达粗产物中分离纯化组氨酸标签蛋白 | 第40-48页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第40-41页 |
| 4.2 试验方法 | 第41-43页 |
| 4.2.1 M~(2+)-AIL/IL(M=Cu,Ni,Zn)从大肠杆菌细胞裂解物中纯化 | 第41-42页 |
| 4.2.2 SDS-PAGE分析 | 第42页 |
| 4.2.3 光谱特征测定 | 第42-43页 |
| 4.2.4 Zn~(2+)-AIL/IL从大肠杆菌细胞裂解物中纯化His-tagged PBP3 | 第43页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第43-47页 |
| 4.3.1 M~(2+)-AIL/IL(M=Cu,Ni,Zn)从大肠杆菌细胞裂解物中纯化His-tagged EGFP的SDS-PAGE分析 | 第43-45页 |
| 4.3.2 Zn~(2+)-AIL/IL纯化His-tagged EGFP的紫外光谱分析 | 第45-46页 |
| 4.3.3 Zn~(2+)-AIL/IL从大肠杆菌细胞裂解物中纯化His-tagged PBP3 | 第46-47页 |
| 4.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 第5章 M~(2+)-AIL/IL再生重复使用的研究 | 第48-53页 |
| 5.1 材料与仪器 | 第48-49页 |
| 5.2 M~(2+)-AIL/IL重复利用能力以及再生方法的探究 | 第49-50页 |
| 5.2.1 重复利用能力的测试 | 第49-50页 |
| 5.2.2 再生方法的探究 | 第50页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第50-52页 |
| 5.3.1 重复利用M~(2+)-AIL/IL对His-tagged EGFP的亲和性能分析 | 第50-51页 |
| 5.3.2 M~(2+)AIL/IL的再生His-tagged EGFP的亲和性能分析 | 第51-52页 |
| 5.4 本章小结 | 第52-53页 |
| 第6章 总结与展望 | 第53-55页 |
| 6.1 总结 | 第53-54页 |
| 6.2 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录：主要合成产物核磁、质谱图 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
